测定豆类胰蛋白酶抑制剂活性和种类的电泳方法改良     

黄国伟  巫光宏  何嘉雯  吴奕文  陈晓峰 《大豆科学》2010,29(2)

以赤豆胰蛋白酶抑制剂(ABTI)及绿豆的胰蛋白酶抑制剂(MBTI)为材料,采用明胶-PAGE技术对其进行活性和种类检测。同时对影响明胶-PAGE技术体系的明胶浓度、酶解时间、脱酶液及电泳的灵敏度等因素进行探讨。结果表明:改良后的明胶-PAGE技术,鉴定胰蛋白酶抑制剂活性和种类的时间大大缩短,成本低,技术操作可行性强,重复性好,且检测ABTI的种类达7种,灵敏度达到每孔1.0 BAEE、蛋白点样量为每孔0.154μg。  相似文献   

姬菇采后贮藏过程中几种酶活性变化的研究     

巫光宏  詹福建  詹爱军  李俊  黄卓烈 《食用菌学报》2005,12(4):17-21

姬菇子实体在5℃、25℃下贮藏6d，测定纤维素酶、淀粉酶、过氧化氢酶活性，研究其在采后衰老软化过程中的生理生化变化规律。结果表明，姬菇子实体在25℃贮藏5～6d，其纤维素酶、淀粉酶活性较5℃处理的高；贮藏4d，其过氧化氢酶活性较5℃处理的低，清除自由基的能力较弱，从而使25℃处理组的菇体易快速衰老软化，而5℃处理组贮藏1～5d不软化。研究表明，姬菇子实体采后贮藏保鲜与纤维素酶、淀粉酶、过氧化氢酶活性有关。  相似文献   

超声波对淀粉酶催化活性的影响   总被引：11，自引：0，他引：11  

陈小丽黄卓烈  巫光宏何平詹福建  丘泰球 《华南农业大学学报》2005,26(1):76-79

为了探索不同参数超声波对淀粉酶活性的影响效果,将水稻淀粉酶经分级盐析初步纯化后,用DEAE-纤维素进行柱层析,层析结果分离出两个蛋白峰,第1个蛋白峰无酶活力;第2个蛋白峰有很高的酶活力,且酶活力峰与蛋白峰吻合,将此峰中蛋白成分进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳结果显示的蛋白带比粗酶的蛋白带明显减少,经柱层析后淀粉酶被纯化13．726倍,将部分纯化的淀粉酶用适宜参数的超声波处理可以使酶活力提高9．09％-33．09％。  相似文献   

马占相思树对低温冻害的抗性研究   总被引：28，自引：1，他引：28  

詹福建  巫光宏  黄卓烈  罗焕亮  孟立科 《林业科学》2003,39(1):56-61

以盆栽马占相思（Acacia mangium)PNE17868家系幼苗为材料，研究了低温胁迫下树苗生长发育有关的生理生化指标的变化及其与抗冻害的关系。结果表明，随着低温胁迫程度的加深和时间延长，植株细胞电导率显著升高，细胞膜ATPase活性呈下降趋势，而可溶性糖、脯氨酸和可溶性蛋白质含量亦不断升高，表现出耐寒植物较典型的生理特点，说明该植株有明显的渗透调节能力和抗寒性。在零下低温（0～-6℃）胁迫下，植物细胞防御系统的保护酶类（CAT、POD、SOD）的活性先是升高，然后有所下降，但下降幅度不大。这表明了马占相思PNE17868家系对低温有较强的适应能力，在温度日益降低（0～-6℃）条件下体内保护酶仍能维持较高的活性水平，减轻了由膜脂过氧化引起的膜伤害，是植物提高抗寒性、免遭低温冻害的重要原因。  相似文献   

低温胁迫对马占相思树代谢的影响研究   总被引：19，自引：1，他引：19       下载免费PDF全文

巫光宏  詹福建  黄卓烈  罗焕亮  邵志芳 《林业科学研究》2001,14(6):633-640

报道了马占相思QLD19835家系7个月苗龄的树苗在低温胁迫下，电导率、可溶性糖、脯氨酸和可溶性蛋白质的含量变化及ATP酶（ATPase)、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、超氧物歧化酶（SOD）的活性动态变化，揭示了在低温逆境下，由于细胞膜系统受到寒害而使电导率不断升高，ATPase活性亦有所下降，而可溶性糖、脯氨酸和可溶性蛋白质的含量则显著升高。这在保护细胞膜稳定性方面起到重要的作用，增强了植株本身对低温的忍耐能力。另外，CAT活性升高，POD、SOD的活性有所下降，但仍保持一定活性，提高了它们对氧自由基和过氧化物的清除，这些变化的总效应是使植物细胞膜结构和物质代谢过程中免遭寒害，提高植物的抗寒力。  相似文献   

二甲基亚砜对木瓜蛋白酶活性与构象的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

何平  黄卓烈  巫光宏  初志战  黄家乐  史清翠 《华南农业大学学报》2008,29(3)

利用紫外吸收光谱、荧光发射光谱研究了二甲基亚砜对木瓜蛋白酶活性与构象的影响.当二甲基亚砜溶液为低体积分数时,木瓜蛋白酶活性比对照(ψ二甲基亚砜=0)有所上升;随着二甲基亚砜溶液体积分数升高,木瓜蛋白酶活性却不断降低,紫外吸收光谱的第1吸收峰明显地向长波长方向移动;且紫外光吸收峰值逐渐降低,到ψ二甲基亚砜为50%时又有所升高.木瓜蛋白酶在不同体积分数二甲基亚砜溶液中荧光发射光谱发生变化.在ψ二甲基亚砜为5%、10%、20%二甲基亚砜溶液中,与对照(ψ二甲基亚砜=0)相比,酶对底物分子的亲和力降低;最大反应速度上升.结果表明:低体积分数的二甲基亚砜对木瓜蛋白酶的构象影响较小,酶活性上升;高体积分数的二甲基亚砜对木瓜蛋白酶的构象影响较大,酶活性下降.  相似文献   

水稻SDG711蛋白C末端原核表达及多克隆抗体制备(英文)     

张志刚  李超  林欣欣  巫光宏  杜平州  王玉琪 《农业科学与技术》2013,(1):11-13,48

[目的]对水稻SDG711蛋白C末端进行原核表达,并制备其多克隆抗体。[方法]选取水稻SDG711蛋白抗原决定簇较密集的C末端进行原核表达,通过构建原核表达载体pET28a-711C,转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达融合蛋白后进行纯化,再以纯化的融合蛋白为抗原免疫新西兰白兔,制备多克隆抗体,并对其进行Western-blot分析。[结果]试验制备的多克隆抗体能有效地检测抗原的表达。[结论]该研究为进一步深入研究SDG711蛋白的功能奠定了基础。  相似文献   

大豆总DNA经穗茎注射与花粉管法导入春小麦的研究   总被引：3，自引：0，他引：3       下载免费PDF全文

赵亚华  巫光宏  佟传利  何平  詹福建 《华南农业大学学报》2001,22(2):49-51

采有穗茎注射，花粉管通道法，将大豆总DNA导入春小麦品种宁春四号和宁春16号，引起受体小麦穗长，穗粒数，粒型和化学品质等性状的广泛变异，对变异株进行筛选，获得了比受体蛋白质量提高2．0%-5．5％的变异株系，平均变异率为3．5％，SDS－PAGE结果显示变异株新增加的蛋白质相对分子质量的78．5，0，33．7的组分。  相似文献   

乙腈对木瓜蛋白酶活性与构象的影响     

何平  黄卓烈  初志战  巫光宏  詹福建  郑彪 《上海交通大学学报(农业科学版)》2006,24(3):245-249

在乙腈浓度为5%、10%中,木瓜蛋白酶活性比在磷酸缓冲液中显著提高;在乙腈浓度为15%中,木瓜蛋白酶活性与磷酸缓冲液中的基本相等;随着乙腈浓度进一步升高,木瓜蛋白酶活性不断降低。在200￣240nm吸收峰区间内,随着乙腈浓度的逐渐升高,木瓜蛋白酶的紫外光吸收值逐渐降低,而且吸收峰也逐渐向长波长方向移动;在240￣300nm吸收峰区间内,乙腈溶液中木瓜蛋白酶的紫外光吸收值比在磷酸缓冲液中的高。在200￣225nm负吸收峰中,随着乙腈浓度的升高,木瓜蛋白酶的紫外光差示吸收值逐渐降低。乙腈浓度为5%时,木瓜蛋白酶荧光发射峰的荧光强度低于在磷酸缓冲液中的;随着乙腈浓度进一步升高,木瓜蛋白酶荧光发射峰的荧光强度都高于在磷酸缓冲液中的,并逐渐升高,而且发射峰逐渐向短波长方向移动。在5%、10%、20%乙腈中,木瓜蛋白酶的Km、Vmax均高于0%乙腈中的。  相似文献