IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的研究     

陈建军  曹香林  古勤生  张亚冰  刘崇怀 《河南农业科学》2006,(8):109-112

结合ELISA和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的特点,引入了另外一种方法,即免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)对葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了检测。从免疫捕捉病毒、释放RNA到反转录成cDNA,最后扩增出了约300bp的预期目的片段。为了进一步明确PCR扩增的特异性,将PCR产物连接到pGEM-T载体上,转化大肠杆菌E.coliJM109菌株,通过蓝白斑筛选,获得重组质粒,提取质粒DNA,经酶切对重组质粒进行鉴定,结果得到了含有目的片段的重组质粒。由此证明,IC-RT-PCR检测GLRaV-3结果准确可靠。最重要的是它弥补了ELISA易出现假阴性、假阳性以及RT-PCR提取RNA难等的缺点,不失为病毒检测的新型方法。  相似文献   

克瑞森无核葡萄种植中遇到的问题及解决措施     

张亚冰  王征红  刘崇怀  孙海生 《中国种业》2006,(4):35-35

克瑞森无核葡萄又名绯红无核葡萄,是由美国农业部加州福尼亚弗瑞斯诺园艺场培育.自1999年引入我国,作为一个优质晚熟的无核鲜食葡萄品种,在我国的种植面积逐年扩大,发展迅速,但经过几年的种植观察,也存在一些问题需要解决.  相似文献   

葡萄发生裂果的原因及防治措施     

张亚冰  刘崇怀  孙海生  王文旺 《果农之友》2005,(9):33-33,35

葡萄裂果病是葡萄的主要生理病害之一,从幼果期到葡萄成熟均可发生,但以转色期到成熟期发病最为严重,出现裂果的果实完全失去商品价值,并极易引起其他病害如酸腐病等,明显造成减产,个别品种严重发生时甚至造成绝收,如郑州早玉,严重影响葡萄种植户的收益。因此许多优质丰产的葡萄品种,不能作为主栽品种在生产上推广。  相似文献   

红地球葡萄果穗枯萎病与矿质元素的关系     

张亚冰  樊秀彩  刘崇怀  李民  孙海生 《中国南方果树》2006,35(6):66-67

红地球葡萄（Red Globe）属欧亚种，美国加州大学1982年发表，目前，我国栽培面积5万hm^2左右，仅次于巨峰。1999年我们在部分红地球葡萄园发现一种果穗或果穗分枝枯死而果粒没有明显症状的病害，随后在全国主要红地球葡萄产区均发现该病害，我们将其称作“果穗枯萎病”。近两年我们针对该病害进行了较为详细的研究。  相似文献   

伏牛山野生有毒植物资源调查与研究   总被引：4，自引：2，他引：4  

戴攀峰  侯小改  张亚冰  段春燕 《河南农业科学》2005,(7):48-53

通过调查,整理出伏牛山有毒植物共92科239属358种。其中,蕨类植物5科6属9种;裸子植物2科2属2种;被子植物85科231属347种,其中,双子叶植物77科208属314种,单子叶植物8科23属33种。并列出了伏牛山有毒植物名录,提出了开发和保护对策。  相似文献   

植物叶表皮制片方法改进   总被引：1，自引：0，他引：1  

张亚冰  王秀云  洪亚平 《安徽农业科学》2008,36(29)

针对NaOC l法在叶表皮制片上存在的问题,对叶表皮制片方法和工具进行了一些改进,使用改进的方法和工具进行了植物叶表皮制片。结果表明,改进法可提高制片效率,获得较好的制片效果,并有利于初学者使用。  相似文献   

利用改进的整体染色与透明技术观察垂柳的幼胚   总被引：1，自引：0，他引：1  

洪亚平  张亚冰 《安徽农业科学》2009,37(22):10400-10402

[目的]利用改进的整体染色与透明技术,对垂柳受精后的胚珠进行了整体染色与透明,以观察胚珠内的幼胚形态。[方法]使用稀释的爱氏苏木精染液对垂柳胚珠进行适时染色,然后用生理盐水（或水）冲洗,使用无水乙醇和油镜油的混合液对其进行脱水,用油镜油进行透明、制片。同时,还对整体染色与透明技术的方法进行了讨论。[结果]在普通（明视野）显微镜下,不仅能够观察到垂柳受精后胚珠的层次结构,还能清楚地观察到胚珠内的幼胚形态。垂柳的鱼雷形幼胚具有2枚子叶,偶尔见到具有3枚子叶的鱼雷形幼胚。[结论]与爱氏苏木精染色-冬青油透明技术相比,使用油镜油作为透明剂,制片方法简单,制片时间短,并且具有比较好的观察效果。  相似文献   

葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测技术研究   总被引：4，自引：3，他引：4  

刘三军  张亚冰  郭卫东  张秋叶  何水涛  周厚成 《果树学报》2002,19(1):15-18

利用ＲＴ－ＰＣＲ技术,对葡萄卷叶病毒株系Ⅲ进行了检测。采用的技术流程为:通过提取葡萄叶片或韧皮部总ＲＮＡ,获得病毒的ＲＮＡ,反转录合成ｃＤＮＡ,经ＰＣＲ扩增,获得病毒ｃＤＮＡ的特征片段,并进行了序列分析。对提取的总ＲＮＡ进行了完整性和纯度检测,确定了良好的ＲＮＡ获得方法。结果表明,通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增的片段序列与病毒源序列的同源性高达９９．３%,说明采用本研究确定的方法检测葡萄卷叶病毒株系Ⅲ结果可靠。  相似文献   

葡萄硬枝离体嫁接试验     

孙海生  王忠跃  樊秀彩  李民  张亚冰 《果农之友》2007,(4):8-8

葡萄根瘤蚜是一种世界性的检疫对象,曾经对生产发达的欧美国家的葡萄造成过毁灭性的灾害.目前,在我国的上海、湖南等地已经发现该害虫,造成部分葡萄园被毁.选用抗根瘤蚜的砧木品种进行嫁接栽培已成为防治根瘤蚜的必要措施.但由于河南省的气候条件不适宜葡萄绿枝嫁接育苗,而坐地砧嫁接又需要2年时间,周期长、成本高.针对这种情况,我们借鉴国外硬枝离体嫁接的经验,开展该项研究,为河南省葡萄嫁接苗生产提供一些技术指导.  相似文献   

一种新的非酶法分离荠幼胚的方法     

洪亚平  张亚冰  吴国锋  赵文娟  阎婵婵 《安徽农业科学》2009,37(23):10852-10853

[目的]用非酶法手工分离荠的胚珠和幼胚等微小结构。[方法]应用胶块和解剖镜等普通工具,手工、非酶法分离并观察荠的花形态及荠胚珠和幼胚。[结果]荠花具有4片花萼、4片花瓣、四强雄蕊,短角果;荠的胚发育过程包括球形胚、心形胚和鱼雷形胚3个发育阶段。[结论]利用胶块的黏性,能使植物胚珠和胚等微小结构的手工分离操作变得比较简单,具有对幼胚损伤小、能保持原有形态等优点。可用于多领域的研究。该类工作在实验设施较差的实验室也能完成。  相似文献