马立克氏病病毒Rispens株和RL株B抗原基因的分离、克隆及初步酶切分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

邢力  彭大新  刘秀梵  张如宽  吴艳涛 《中国兽医学报》1998,(4)

将马立克氏病病毒（ＭＤＶ）血清Ⅰ型Ｒｉｓｐｅｎｓ株和ＲＬ株分别接种于原代鸡胚成纤维细胞，待出现８０％以上细胞病变后收获，经蛋白酶Ｋ消化，酚、氯仿抽提，乙醇沉淀细胞和病毒的总ＤＮＡ（ｔｏｔａｌＤＮＡ）。以此为模板，根据已发表的Ｂ抗原基因核苷酸序列设计１对引物，通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增出１条约２．８５ｋｂ的特异性条带，斑点杂交证实其为Ｂ抗原基因。双酶切消化后，克隆到质粒ｐＵＣ１９中。酶切分析表明，在这２株病毒的Ｂ抗原基因上，ＨｉｎｄⅢ、ＥｃｏＲＶ、ＢａｍＨＩ、ＥｃｏＲＩ的酶切位点分布与超强毒ＲＢＩＢ株、标准强毒ＧＡ株的完全相同。  相似文献   

新城疫单抗ELISA试剂盒监测免疫鸡群中新城疫强毒   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵虎  张如宽  刘秀梵 《中国预防兽医学报》2001,23(3):223-225

应用新城疫（ND）单抗ELISA试剂盒对2个免疫鸡群中ND强毒感染情况及个体感染强毒后排毒动态跟踪监测，并平等测定其HI抗体效价。共采集泄殖腔棉拭子和血液对应样品2317份。结果表明：HI效价2－14之间的个体均可检出强毒，其中HI效价在6以下和11以上的个体强毒检出率都较高。HI效价在6以上的个体仍角感染强毒，强毒感染导致HI抗体水平上升，且感染前低者上升速度较快，幅度亦较大；并且发现排毒个体的高水平抗体是强毒感染所致。个体感染强毒后排毒过程可长达3周，而且感染前抗体水平低者排毒时间相对较长。强毒一旦侵入鸡群便可在群内巡回传播，长期维持下来。  相似文献   

应用间接ELISA检测鸡痘病毒抗体方法的建立   总被引：2，自引：0，他引：2  

张体银  李军伟  孙蕾  孙学辉  张如宽  刘秀梵 《中国兽医学报》2005,25(2):128-130

建立了检测鸡痘病毒抗体的间接ELISA方法。应用该方法检测鸡痘阳性血清，其灵敏度为琼脂扩散试验的400～800倍，而且还具有特异性强、操作简便、快速等特点。  相似文献   

禽源大肠杆菌的药敏试验     

杨玲高璐  高崧张如宽  刘文博刘慧谋 《中国禽业导刊》2001,18(7):26-26

鸡大肠杆菌病是一种严重危害养鸡业的多型性传染病。近年来，随着养鸡业的发展，鸡大肠杆菌病的发生和流行十分普遍。在一些大型和专业户鸡场中，由于环境卫生差，饲养管理不善，消毒措施不力，常暴发大肠杆菌病，给养鸡业造成巨大损失。前不久，某大型坞场饲养的20-40日龄商品代AA肉鸡出现大批死亡，死亡鸡有典型的大肠杆菌病病变。从大批死鸡的脏器中分离培养出102株细菌，经生化反应确定为大肠杆菌。  相似文献   

鸡γ干扰素对H5亚型禽流感疫苗的免疫增强作用   总被引：6，自引：0，他引：6  

贾立军  刘秀梵  张艳梅  彭大新  张如宽 《农业生物技术学报》2004,12(4):427-430

利用表达鸡γ干扰素的重组鸡痘病毒(rFPV-IFN-γ)与表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)或灭活疫苗联合应用，接种SPE鸡、无母源抗体商品鸡和含有母源抗体商品鸡，研究鸡γ干扰素的免疫增强作用。结果发现，rFPV-IFN-γ和rFPV-HA联合应用诱导的HI抗体应答水平同rFPV-HA单独免疫相近；rFPV-IFN-γ和灭活疫苗联合应用后HI抗体应答水平略低于灭活疫苗单独免疫组。攻毒后，对于SPF鸡和无母源抗体商品鸡，rFPV-IFN-γ与rFPV-HA或灭活疫苗联合免疫诱导的保护率同相应疫苗单独免疫相当，均为95％～100％；对含有母源抗体的商品鸡，10^6PFU的rFPV-HA与10^5PFU的rFPV-IFN-γ联合免疫组保护率(33．5％)高于rFPV-HA单独免疫组(11．4％～16．8％)，而其它剂量组合的rFPV-HA与rFPV-IFN-γ联合应用不能提高免疫保护效力；rFPV-IFN-γ与灭活疫苗联合免疫含母源抗体商品鸡诱导的保护率同灭活疫苗单独免疫组相近。结果表明，rFPV-IFN-γ不能促进疫苗诱导的HI抗体应答；适当剂量组合的rFPV-HA与rFPV-IFN-γ联合免疫含有母源抗体的商品鸡，可提高免疫保护效力，发挥免疫增强作用。  相似文献   

几种病毒与禽病原性大肠杆菌的人工联合感染   总被引：6，自引：0，他引：6  

高崧  彭大新  焦新安  甘军纪  吴艳涛  滕峰  石火英  刘文博  张如宽  刘秀梵 《中国兽医学报》2001,21(4):334-337

以2种剂量的低致病性禽流感病毒(lowly pathogenic avian influenza virus,LPAIV)，传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV)疫苗株H120和H52，新城疫病毒（Newcastle disese viurs,NDV)Lasota株分别于气管内注射10日龄易感鸡，2d后，气管注射禽病原性大肠杆菌O37株（O78），连续观察5d，结果，除LPAIV单独感染组有6．25％的死亡率外，其余各病毒单独接种组均健活；大肠杆菌O37株单独接种组的死亡率为62．50％，较高剂量的LPAIV，IBV H120和H52，NDV Lasota株与大肠杆菌O37株有效强的协同致病作用，死亡率分别达到81.25%,100.00%,93.75%和87.50%，而较低剂量的上述病毒则无明显的协同作用，IBV，NDV疫苗株与大肠杆菌联合接种组的多数死亡鸡病程推迟。  相似文献   

应用抗NDV单抗夹心ELISA试验快速诊断非典型新城疫     

陈昌海  张如宽  刘秀梵  周建华 《中国家禽》1993,(1)

今年3月,某鸡场产蛋鸡群发生以呼吸困难、产蛋下降和腹泻为特点的疫病.疑为慢性呼吸道病,用抗生素等药物治疗.不见效果.经单抗夹心ELISA和常规病毒分离试验,确诊为新城疫(ND).现将诊断结果报告如下. 1.抗NDV革抗夹心ELISA试验: (1)包被:M_(22)腹水单抗用PH9.6的碳酸盐溶液稀释成1:1000,按100μl/孔加入40孔酶标板(奉县医疗器械厂产品),4℃过夜后37℃作用2小时,去包被液后以PBST洗1分钟×3次,再以10％FCS· PBS加满孔,37℃水浴封闭2小时,甩去封闭液后以PBST洗5分钟×3次,包被好的酶标板置-20℃冰箱备用。 (2)测定:取出已包被的酶标板以PBST洗5  相似文献   

马立克氏病超强毒株的特性及其防制的措施   总被引：1，自引：0，他引：1  

甘军纪  张如宽 《中国畜禽传染病》1993,(6):58-60

  相似文献   

两种消毒剂对禽流感病毒的杀灭效果     

卢建红  刘玉良  韦栋平  邵卫星  张如宽  刘秀梵 《中国兽医杂志》2004,40(5):43-44

禽流感是由正粘病毒科中的A型流感病毒引起的一种禽类感染和疾病综合征。A型流感病毒基因易变、亚型众多、分布广泛，虽然中国出现的禽流感主要是低致病性的H9N2亚型，但各种家禽散养和混养的生态以及香港和世界各地不断从活禽市场检出H5N1流感病毒或发生禽流感等情况提示我们加  相似文献   

鸡沙门氏菌弱毒苗与微生态制剂联合应用对三黄肉鸡的增重试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

张小荣  潘志明  焦新安  刘文博  甘军纪  高崧  张如宽  刘秀梵 《中国兽医杂志》2002,38(12):14-15

鸡白痢、鸡伤寒是重要的蛋传疾病之一 ,严重危害养鸡业 ,造成的经济损失巨大。国内常采用药物控制的方法减轻其危害 ,多次反复用药 ,不仅使成本上升 ,而且带来耐药性和药残等一系列问题 [1～ 3 ]。事实证明仅依赖药物控制不是上选之策 ,加之在实际生产中并没有采取严格的净化措  相似文献