母牛生殖激素水平异常与屡配不孕的关系     

张彦明  王建辰 《国外兽医学(畜禽疾病)》1989,(2):1-4

  相似文献   

猪传染性胃肠炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立     

董玲娟  张彦明  何雷 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2012,40(2):13-19

【目的】建立一种能检测猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）含量的荧光定量RT-PCR方法,为猪传染性胃肠炎（TGE）的诊断和防治提供技术支持。【方法】根据TGEV TH98株的N基因序列设计1对特异性引物,扩增出目的片段,连接克隆载体后构建质粒标准品;对荧光定量的循环条件进行优化,建立猪传染性胃肠炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法,对其重复性、特异性进行检测,并与普通PCR检测方法进行比较,最后应用该方法对采自陕西杨凌周边的30份临床样品进行检测。【结果】成功构建了质粒标准品,建立了检测猪传染性胃肠炎病毒的荧光定量RT-PCR方法,该方法特异性高、重复性好、敏感性比普通PCR检测方法高2个数量级,对质粒标准品的线性检测范围为1.0×10⁷～1.0×10¹拷贝/μL。用建立的检测方法对从陕西杨凌周边猪场采集的30份样品进行检测,检出4份阳性,与普通PCR检测方法符合率为100%。【结论】建立的TGEV荧光定量RT-PCR方法敏感性高、特异性好、省时省力,可以对猪传染性胃肠炎病毒进行快速检测。  相似文献   

逆向遗传学技术在猪瘟病毒研究中的应用   总被引：1，自引：1，他引：0  

张淼涛  张彦明 《动物医学进展》2005,26(2):9-12

猪瘟是猪的最严重疾病之一,其病原 是猪瘟病毒,基因组为单股正链RNA。猪瘟 弱毒疫苗在猪瘟的免疫防治中发挥了巨大作 用,但由于弱毒疫苗免疫的动物不能从血清 学上与自然感染动物区分,使其应用受到很 大限制,研制标记疫苗是解决这个问题的重 要途径。由于RAN的结构不稳定成为阻碍 RNA病毒研究的主要障碍,所以病毒分子生 物学是新型猪瘟疫苗研究的必要手段。近年 来兴起的逆向遗传研究将RNA病毒的基因 组转化为cDNA,文章就猪瘟病毒逆向遗传 研究的意义、方法、概况及其在猪瘟新型疫苗 研究中的应用进行了全面综述。  相似文献   

南瓜良种良法配套栽培技术     

龙荣华  沙毓沧  浦恩达  张彦明  高华彬  杨兴助  刘发万  王勇  秦荣  肖卿 《中国瓜菜》2018,(8)

优良的品种是农业增产的内在因素,是农业生产中其他措施不可替代的重要生产资料。但是,优良的品种必须有与之相配套的栽培技术,才能充分挖掘良种的增产增收潜力。因此在推广良种时应结合当地的气候、土质、栽培习惯情况,根据良种的特征特性制定适宜的栽培管理方法。以‘云南瓜2号’为例,阐述了南瓜的良种良法配套栽培技术,供生产者参考。  相似文献   

猪支气管黏膜上皮细胞的分离培养和传代研究   总被引：3，自引：1，他引：2  

孙裴  张彦明  杨小云  温元鹏  张浩  何建锋  郭抗抗  党如意 《畜牧兽医学报》2008,39(6)

利用气管-支气管扎结灌注酶冷消化法分离气管黏膜上皮细胞,比较胰蛋白酶和链霉蛋白酶消化效果,并研究含不同细胞生长因子和血清浓度的培养体系来寻找经济、易重复的气管上皮细胞最适培养技术。用抗8/18细胞角蛋白免疫组化法鉴定气管上皮细胞,用流式细胞仪检测细胞凋亡来分析本研究中气管上皮细胞最大传代次数。研究结果表明胰蛋白酶消化气管所得的目的细胞量小、活性差、细胞贴壁和生长困难,链霉蛋白酶灌注冷消化法可获得数量大、活性高、纯度好的目的细胞;基础的上皮细胞培养体系中含低浓度血清、转铁蛋白和人表皮生长因子可以有效保证气管上皮原代和传代生长。本研究所分离的气管上皮细胞可连续传到第6代,传代细胞活性好、纯度高,可为进一步的气管上皮细胞永生化研究提供材料和奠定技术基础。  相似文献   

TGF-β1基因真核表达载体的构建及在猪脐静脉内皮细胞中的表达     

王文秀  邓文  张彦明  代晨  熊奎州  谢林红  温元鹏 《畜牧兽医学报》2008,39(6)

应用RT-PCR技术从猪外周血单个核细胞扩增转化生长因子β1（Transforming growth factor-β1,TGF-β1）全基因,构建含有TGF-β1基因及EGFP报告基因的真核表达质粒pEGFP-C1-TGF-β1。采用脂质体法转染体外培养的猪脐静脉内皮细胞（SUVECs）后,通过直接荧光观察pEGFP-C1-TGF-β1融合蛋白在细胞中的分布定位,并通过RT-PCR、间接免疫荧光方法检测TGF-β1基因在SUVECs中的表达。结果在转染后1周观察到绿色荧光,RT-PCR、间接免疫荧光法检测TGF-β1表达均为阳性。本研究成功构建了含有绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pEGFP-C1-TGF-β1,且TGF-β1基因在SUVECs中获得表达。  相似文献   

三维子宫组织的构建及形态学观察     

陈秀荔  赵永贞  尹宝英  张彦明 《畜牧兽医学报》2008,39(9)

本研究旨在体外构建含有3种细胞的三维子宫组织。体外成功分离和培养兔子宫内膜细胞和平滑肌细胞,将3代以内的平滑肌细胞以1×10^7/mL与3 mg/mLⅠ型鼠尾胶原和Matrigel（4∶1）的混合物混合,迅速接种在自制的模具中,置于37℃、体积分数5%CO2培养箱中待其凝固,以同样的方法接种1×10^7/mL子宫内膜基质细胞,待其凝固后接种上皮细胞悬液,将其置于37℃,体积分数5%CO2培养箱中培养。采用HE染色和免疫组织化学染色方法观察和鉴定三维子宫组织。结果表明,在体外成功地构建了含有3种细胞结构的类似于在体子宫组织的三维子宫组织;HE染色观察,在静态外力作用下,培养10 d的子宫组织细胞呈明显的按拉伸方向排列;细胞在细胞外基质中自由移动,上皮层呈弯曲状;免疫组织化学染色可以观察到具有3层细胞结构的子宫组织,弯曲的上皮层细胞呈柱状。可见子宫内膜细胞和平滑肌细胞能在细胞外基质中生长;建立了一套由3种细胞组成的类似于在体子宫组织结构的三维子宫培养体系;为胚胎植入机理的研究提供良好的体外模型。  相似文献   

抑制性消减杂交技术在对虾基因克隆中的应用     

赵永贞  蒋伟明  陈秀荔  李咏梅  张彦明  黎铭  陈晓汉 《动物医学进展》2008,29(4):76-80

抑制性消减杂交技术是一项筛选、分离未知差异表达基因的试验方法,该技术具有快速、简便、灵敏、特异、高效,所需起始样本量较少等优点。利用该技术构建对虾组织消减cDNA文库,鉴定差异表达相关基因及其表达特性。通过对对虾差异性表达的免疫相关基因、抗病基因及其他性状基因的了解,旨在为进一步研究对虾抗病机理奠定基础,为利用抗病基因进行抗病育种提供一个有效途径,为提高对虾的经济效益提供前景。  相似文献   

犬尿石症诊断与治疗研究     

李俊生  周茹  李小丽  张彦明 《动物医学进展》2008,29(3):109-112

随着经济的发展,宠物犬的饲粮水准不断提高。由于饲粮结构的不合理造成尿石症发病率逐年增加,病犬表现尿急、尿频、尿血或排尿困难,甚至尿闭。依2004年到2006年门诊95例犬尿石症资料,对发病率、年龄、性别、日粮、品种间的关系进行分析。结果表明,犬尿石症发病主要集中在2岁~5岁,发病率较高的犬种是京巴,雄性犬发病率略高于雌性犬。通过日粮调查,日粮中蛋白含量越高其发病率越高。临床统计发现,犬膀胱结石发病率最高,其次是膀胱尿道混合型,单纯尿道结石最少。手术是治疗犬尿石症有效手段,治愈率达到81%以上。早期尿道结石采用保守疗法效果较好。  相似文献   

陕西省关中地区鸡马立克氏病调查研究     

张彦明  王晶钰  张国祥 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1998,26(2):66-70

１９９５～１９９７年对陕西省１１个县（市、区）的养鸡场（户）进行了ＭＤ流行病学调查。结果表明,１３个品种５８８个鸡群中有１９９群发生了ＭＤ,发病鸡群占３３．８％;ＭＤ临床表现与鸡的品系有明显相关性;１９９个发病鸡群死淘率１８．９％（２６３９７／１３９７００）,其中肉仔鸡群死淘率明显低于蛋用鸡;血清学检查表明,蛋用鸡ＭＤ抗体阳性率为１５．６％～５８．３％,ＭＤ抗原阳性率为７４．１％～８４．４％,而肉仔鸡ＭＤ抗体阳性率为４．２％～６．０％,ＭＤ抗原阳性率为６８．１％～７９．２％．经ＨＶＴ疫苗免疫鸡群仍有３９．７％发生了ＭＤ．  相似文献