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基于Golden Gate载体构建过程,对CRISPR/Cas9双靶点敲除技术的载体构建系统进行了优化,建立了一种简单快速高效且无PCR扩增的双靶点CRISPR/Cas9载体构建方法。在本方法中,只需将设计好的2个靶点DNA小片段和1个外源片段用T4DNA连接酶构建到CRISPR/Cas9载体上即可。用本方法对10个已报道的水稻基因构建了20个双靶点CRISPR/Cas9载体,阳性率为100%,测序结果显示无突变。该载体系统非常适合大批量CRISPR/Cas9载体的构建,同时也为其他植物中构建双靶点CRISPR/Cas9载体提供借鉴。 相似文献
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以甘蓝纯合显性不育材料（DGMS）03-01Z608-1、04Z521-12、04Z-01Z126-1为试材，研究不同激素种类和浓度以及基因型对甘蓝纯合DGMS材料快速繁殖的影响。结果表明：04Z521-12、03Z-01Z608-1最适宜增殖的激素组成是：MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L，而04Z-01Z126-1最适宜增殖的培养基组成是：MS＋KT 1.0 mg/L＋6-BA 0.5 mg/L；不同甘蓝DGMS材料在相同培养条件下，由于基因型的不同增殖系数有很大差别；圆球类型甘蓝DGMS材料04Z521-12增殖系数最高，尖球类型甘蓝DGMS材料03Z-01Z608-1增殖系数最低。 相似文献
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断面密度分布是纤维板一个重要的物理量，与板材物理力学性能和产品用途密切相关。本文论述了不同热压状态下纤维板断面密度分布的形成过程、断面密度分布曲线的类型与特性、断面密度分布与板材性能的关系，并分析了影响中密度断面密度分布的各种工艺因数。 相似文献
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单缸柴油机水箱上止点记号与工作性能的关系由于单缸柴油机在出厂时，厂家便在水箱上刻记了与飞轮上止点记号相对的上止点记号，它是进行进排气门间隙调整和供油提前角调整的基准和依据，因此水箱上止点记号的准确性也就直接影响着进排气门间隙和供油提前角的准确性，从而... 相似文献
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在大面积草菇生产中,都是使用草菇栽培种。但生产草菇栽培种要有设备条件,这对一般的个体户来说有一定的困难。为此,我们用采完菇的大床菌块和菇根作菌种,进行栽培试验,初步结果表明,其产量接近栽培种的水平。 (一)处理与方法:试验设五个处理,①采菇后的菇根、菇脚及其基部附着的菌丝块;②头潮菇采后的菌块中间层:③两潮菇后的菌块中间层;④头潮菇后的菌块混合菌丝;⑤栽培种(对照)。 相似文献
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