犬和北极狐白细胞介素-2基因的克隆及序列分析     

易立  张海玲  程世鹏  闫喜军  柴秀丽  罗国良  王建科  赵建军 《经济动物学报》2008,12(1):18-20

为了给制备犬和狐白细胞介素-2相关免疫治疗剂、免疫增强剂提供材料,并且为构建插入犬和狐白细胞介素-2基因表达盒的新型基因工程疫苗提供物质基础,从犬、北极狐两种犬科动物基因组中克隆白细胞介素-2,经测序验证扩增片断长度为580 bp,包含全部编码序列和两侧非翻译区。序列分析表明犬与狐核苷酸序列同源性都超过99%,氨基酸序列完全一致。  相似文献   

水貂出血性肺炎的诊断与治疗     

罗国良  闫喜军  赵春霏  赵建军  张海玲 《特种经济动植物》2007,10(10):16-16

水貂出血性肺炎是由绿脓杆菌引起的一种急性传染病,该病曾于2000年在河北某养殖场暴发,2004年山东某养殖场也暴发过此病,近3年来,大连一些  相似文献   

水貂肠炎细小病毒结构蛋白VP2基因的克隆和序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

闫喜军  张海玲  柴秀丽  吴威  易立  王凤雪  邵西群  罗国良 《特产研究》2007,29(4):1-3,6

对水貂肠炎细小病毒SMPV-11株结构蛋白VP2基因进行扩增,获得了基因序列全长为1755bp的SMPV-11株VP2基因,其编码584个氨基酸;应用DNAStar分析软件对该序列进行同源性分析发现,SMPV-11株VP2基因与其他6株水貂肠炎细小病毒株核苷酸和氨基酸均有较高的同源性,分别为99.2%～99.4%和98.6%～99.1%,与猫泛白细胞减少症病毒标准株CU-4株同源性为99.3%和99.1%,系统发生树分析表明它们属于同一个分支。本研究为水貂肠炎细小病毒分子流行病学调查和新型疫苗的研究奠定基础。  相似文献   

水貂肠炎病毒VP2基因的原核表达及间接ELISA方法的建立     

陈涛  赵建军  张海玲  柴秀丽  闫喜军  吴威  钱爱东 《中国预防兽医学报》2009,31(9)

为了对水貂肠炎病毒(MEV)疫苗免疫后抗体水平的监测和疫苗免疫效力的评价,本研究在分析MEV VP2蛋白抗原性的基础上,设计1对特异性引物克隆VP2蛋白抗原性较好的基因片段,将克隆的基因片段定向插入到pProEXHTb原核表达载体中,构建了VP2基因原核表达重组质粒pProEXHTb-VP2A,并实现在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,经鉴定表达的重组蛋白以包涵体形式存在,免疫印迹试验表明获得的重组蛋白具有与抗体较好的反应原性.应用His-Bind亲和层析柱纯化重组蛋白VP2A,以纯化后的重组蛋白作为ELISA诊断抗原,并对反应条件进行优化,初步建立了检测MEV抗体的VP2A-ELISA方法.确定了抗原最佳包被浓度为9.65 μg/mL,血清最佳稀释倍数为1:10.判定标准为S/P值≥0.312为阳性,S/P值≤0.243为阴性,介于两者之间为疑似.该抗原不与犬瘟热病毒、阿留申病毒阳性血清反应,具有良好的特异性.采用VP2A-ELISA对180份水貂血清样品进行检测,结果显示VP2A-ELISA与HI试验的符合率达到87.8%,表明建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,为现地免疫貂群抗体检测和MEV流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法.  相似文献   

水貂肠炎病毒NS1基因进化分析     

张海玲  张蕾  胡博  白雪  赵建军  刘昊  徐淑娟  苗立光  冯卓  闫喜军 《特产研究》2014,(2):1-5

采用PCR方法,从辽宁省、吉林省、山东省、河北省采集的32份样品中检测出21份水貂肠炎病毒感染阳性样品。每个地区选取有代表性的样品共计11份进行NS1基因的克隆和测序,并与已知参考毒株进行比对及系统发育分析。结果显示,本次检测的11个阳性样品的核苷酸序列和氨基酸序列同源性为98.8%~100.0%和98.5%~100%;本次测序序列和国内毒株MEVB基因的核苷酸和氨基酸序列同源性为98.7%~99.9%和98.7%~99.9%;与国外毒株MEVAbashiri基因的核苷酸和氨基酸序列同源性为99.0%~99.5%和98.7%~99.1%。11份阳性样品中水貂肠炎病毒的NS1基因有24个氨基酸位点存在变异。11份阳性样品可划分为3个分支。  相似文献   

核酸水平检测犬副流感病毒方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

王凤雪  闫喜军  柴秀丽  张海玲  罗国良  易立  邵西群 《中国动物检疫》2007,24(12):24-25

根据GenBank中与犬副流感(CPIV)同源性较近的SV5病毒N基因保守序列,利用DNAStar软件设计了一对特异性引物,能扩增265bp大小的片段,并以此建立了检测CPIV的RT-PCR方法,实验证明该对引物特异扩增CPIV;不扩增犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒和狂犬病病毒犬的四种病原的核酸。检测临床病料20份,其中2分为CPIV阳性。此法敏感性较高。是检测犬急性传染性呼吸道疾病(CIRD)中CPIV的有效的方法。  相似文献   

犬细小病毒的分离鉴定及VP2基因的克隆分析     

易立  程世鹏  闫喜军  柴秀丽  罗国良  张海玲  王建科  赵建军 《畜牧与兽医》2008,40(4):60-63

2006年从南京疑似细小病毒感染的病犬中分离犬细小病毒一株,分离的病毒培养物能凝集猪红细胞,凝集效价达到128倍,并能被已知的犬细小病毒阳性血清所抑制。其衣壳蛋白基因VP2被克隆并测序,核酸、氨基酸序列同源性分析表明:血清型为CPV-2b。通过软件对其氨基酸序列分析,预测VP2区域可能的B细胞表位分别为:5-30,300-320,360-380,380-400,400-420区段,这为犬细小病毒基因工程疫苗的研制奠定了基础。  相似文献   

淳化苹果园土壤肥力与施肥调查     

张海玲 《西北园艺》2018,(1)

正土壤是苹果树赖以生存的基础,土壤理化性状和肥力水平高低决定了苹果树的生长状况,而施肥种类和肥料质量又深刻影响土壤性状及土壤肥力。了解苹果园土壤养分情况与施肥现状,对指导果农科学合理施肥、生产优质苹果意义重大。为此,对陕西淳化县20户果农进行了入户调查,结合淳化县农技中心土肥站对果园土壤的测定分析,对如何改进当地苹果园施肥、提高苹果园肥力提出建议。1土壤养分和施肥现状  相似文献   

紫外可见分光光度法同时测定水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的含量     

卢新生  张海玲  苟如虎  刘伯渠  王亚玲 《安徽农业科学》2011,(10):6025-6026,6066

[目的]同时测定水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的含量。[方法]在波长为440和545 nm下,以硫酸作为参比测定水的吸光度,根据吸光度的加和性,用紫外可见分光光度法同时测定水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的含量。[结果]在440和545 nm适宜波长下测定铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）的吸光度,对数据进行回归处理,得线性回归方程和相关系数,表明线性关系均良好。[结论]此方法反应灵敏,操作简单,适合天然水或工业废水中铬（Ⅵ）和锰（Ⅶ）含量的同时测定。  相似文献   

应用电位滴定法测定海带中碘的含量     

卢新生  张海玲  苟如虎  刘伯渠  王亚玲 《江苏农业科学》2011,39(6)

本试验采用电位滴定法测定海带中碘含量,该方法反应灵敏,操作简单,专一性强,符合测定结果和分析的技术要求.本试验同时讨论了由E-V曲线、△E/△V-V曲线、△2E/△V2 -V曲线确定电位滴定终点的方法.  相似文献