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为了鉴定从蓝狐粪便中分离的病毒是否为细小病毒,试验采用病毒培养、电镜观察、中和试验、间接免疫荧光试验和分子生物学试验对其进行鉴定。结果表明:分离毒株在F81细胞中培养96 h后出现细胞病变(CPE);电镜观察可见直径为20 nm左右的病毒粒子;该病毒能被水貂肠炎细小病毒(MEV)阳性血清中和;PCR检测可扩增得到大小为570 bp的特异性条带,并证明分离毒株为细小病毒,将其命名为BFPV-HeB05/16;VP2全基因遗传进化与氨基酸序列分析显示,分离毒株BFPV-HeB05/16与MEV和BFPV处在同一分支上,具有较高的同源性,其关键氨基酸位点(80,300,426,564,568位)与BFPV和MEV保持一致。 相似文献
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用PCR技术从含鸡IL-18全长基因质粒扩增出编码鸡IL-18成熟蛋白基因，亚克隆于pPROEX^TM HTa原核表达载体上，重组质粒转化大肠杆菌感受态DH5a中，随机筛选到阳性重组质粒，经酶切和测序证实目的基因止确克隆于表达载体。IPTG诱导，重组蛋白以包涵体形式表达。薄层扫描结果表明表达产物约占菌体总蛋白的21．95％，用Ni-NTA树脂纯化重组蛋白，免疫SPF鸡制备抗血清。Western blot结果显示鸡抗血清可以很好地和所表达的蛋白带特异结合。ELISA可以检测到较高的多克隆抗体效价，表明此蛋白具有良好的抗原性。 相似文献
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为了验证高能混合粒子场作为诱变源应用在紫花苜蓿品种改良上的效果和价值,将1 000粒龙牧803紫花苜蓿干种子平均分为两份,一份由5个剂量(109、145、195、284和560Gy)的高能混合粒子场辐照处理,另一份用和高能粒子场相同5个剂量的60 Co-γ射线辐照处理。对M1和M2株高、产量和品质等表型性状进行统计分析。结果表明:高能粒子处理紫花苜蓿所诱发的突变频率要略高于γ射线,其中高能粒子284Gy的效果最好。 相似文献
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农杆菌介导的大豆植株整体转化 总被引：1，自引：0，他引：1
农杆菌介导的植物整体转化法主要以植物的分生组织和生殖器官作为外源基因导人的受体,通过真空渗透法、浸蘸法及注射法等方法使农杆菌与受体材料接触,以完成可遗传细胞的转化,通过抗生素筛选和分子检测鉴定转基因植株后代.以大豆幼苗的顶端生长点和叶腋生长点为靶点,通过农杆菌介导的整体转化法--注射法进行转录因子DREB1C基因的遗传转化,最终获得6株T0代PCR阳性转基因植株,转化率为9.2%.T1代植株的PCR、Southern blot和RT-PCR鉴定结果表明获得1株阳性植侏,DREB1C基因以单拷贝形式整合于大豆基因组中,在200 mmol·L-1NaCl胁迫条件下在转录水平得到成功表达.该方法克服了大豆组织培养再生难、转化率低的缺点,是一种高频、简单、快捷的非组培遗传转化途径. 相似文献
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