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动物疫病PCR检测实验室的污染与对策 总被引:1,自引:0,他引:1
PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)技术是美国Cetus公司人类遗传研究室的科学家Mullis于1985年发明的一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,又称为基因的体外扩增法。这种技术操作简单,容易掌握,有极高的灵敏度,结果可靠。近几年,随着PCR相关技术的发展,复合PCR、定量PCR、荧光PCR等PCR技术在动物疫病的快速检测方面得到了广泛应用,为动物疫病的诊断及检验检疫提供了良好的依据。但该方法较强的扩增能力也带来了令人头痛的问题?易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。1引起PCR污染的因素1.1 PCR试剂的… 相似文献
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【背景】在青藏高原及周边高海拔地区,青稞是当地唯一的小禾谷类粮食作物,也是主要饲草来源。穗腐病是近年来仅在青藏高原青稞种植区发现的一种新真菌病害,病原菌为禾生指葡孢霉(Dactylobotrys graminicola),它能侵染多种麦类作物及禾本科杂草,给青稞安全生产带来严重的挑战。【目的】研究禾生指葡孢霉遗传多样性、系统进化以及对寄主种子萌发的影响,揭示该病原菌的流行传播、与寄主植物互作关系以及初侵染菌源,为病害防治提供参考。【方法】从病害流行区采集病株标本,并从典型病穗组织分离禾生指葡孢霉菌株27个,依据无性世代形态特征加以鉴定,分离获得菌株的单孢培养物,提取基因组DNA。利用SRAP分子标记分析禾生指葡孢霉的全基因组多态性,获得菌株特异性分子标记;利用LSU和Rpb2保守遗传位点比较禾生指葡孢霉与其近缘种属的进化关系;将禾生指葡孢霉分生孢子悬浮液与未萌发或发芽后的青稞种子共培养,分析其对青稞种子萌发及幼苗的影响。【结果】选用14对SRAP引物组合进行穗腐菌遗传多样性分析,平均一对引物扩增产生90个多态性条带;平均每个穗腐病菌株1.4个特异分子性标记,分离自小麦的菌株Z 13008特异性标记最多(7个),而对照菌株禾谷镰孢(Fusarium graminearum)具有20个特异性标记。禾生指葡孢霉的地域分布与其遗传多样性缺乏明显相关性。在鉴定的菌株中,仅有分离自小麦(Z 13008)、黑麦(Z 13024)和2个分离自青稞的菌株(Z 13013和Z 13006)的遗传多样性与其他菌株差异较大,说明病原菌群体的遗传变异水平较低。利用20个分子标记编制DNA指纹二叉式分类检索表,可鉴定21个禾指葡孢霉菌株。系统进化分析揭示禾生指葡孢霉与丛赤壳属真菌遗传距离较近。青稞种子萌发前接种处理对种子萌发、幼苗生长均无明显的抑制作用,在萌发后共培养处理能明显抑制幼苗根系生长,导致根系变为浅褐色,但对幼苗植株生长无明显影响。【结论】与近缘种禾谷镰孢相比,禾生指葡孢霉群体内基因组DNA多态性较低,而且其遗传变异与寄主种类密切相关。禾生指葡孢霉致病性较弱,对青稞种子萌发和幼苗生长无明显的抑制作用。 相似文献
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以三文鱼皮为原料,研究虾青素的提取及其抗氧化性,分别从脱脂液和脱脂鱼皮中提取虾青素。单因素试验确定脱脂液中萃取剂及其料液比,脱脂鱼皮中NaOH浓度、加碱量、提取时间、中性蛋白酶加酶量、酶解温度及酶解时间,并通过正交试验进行工艺优化,研究虾青素清除DPPH·的能力。结果表明,脱脂液中加入1∶1二氯甲烷时虾青素提取率最高,脱脂鱼皮中虾青素提取的最佳条件为NaOH浓度0.3 mol/L,加碱量(m原料∶VNaOH)1∶10,提取时间18 h,中性蛋白酶加酶量350 U/g,酶解温度40℃,酶解时间7 h;虾青素清除DPPH·的能力强于VE。 相似文献
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蛋鸡养殖一般规模较大,生长周期较长,感染鸡滑液囊支原体病后蔓延极其迅速,常在还没产生经济效益时就发生不可挽回的损失,对蛋鸡产业带来极大的损失.本文就蛋鸡滑液囊支原体病的流行病学特征、临床症状、诊断方法及防治进行全面介绍,为蛋鸡滑液囊支原体病的预防和治疗提供理论依据. 相似文献
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通过临界点理论中的鞍点定理和极小化作用原理证明了具有非自治的p次线性的常维的p-Laplacian系统的周期解的存在性.Abstract: The existence of periodic solutions is studied for ordinary p-Laplacian systems involving non-autonomous p-sublinear by using the saddle point theorem and the least action principle in critical point theory. 相似文献
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传统的宏观理论认为,消费与可支配收入存在一阶线性关系,收入增加的幅度一定,消费额和消费倾向正向相关,这对我们解决内需不足有很大的现实意义。本文对新疆城乡居民的平均消费倾向和边际消费倾向进行了实证分析和研究,探讨了1985年以来新疆农村居民消费倾向偏低的原因,并由此提出几点建议。 相似文献
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采价时间:2006年9月l日咨询电话:010一87766396一、獭兔生板皮(单位:元/张)产地特级一级二级三级产地特级一级二级三级浙江宁波65 55 30 15江西进贤55 36 25 15四川新津45 32 25 10哈尔滨市55 45 20 15河北尚村65 55 30 15北京怀柔55 40 25 15江苏太仓55 42 30 15广东惠州65 42 25 15二、兔毛(单位:元/千克,粗毛即手拔兔毛)产地剪毛统货粗毛兔绒产地剪毛统货浙江新昌125 135四川苍溪110山东乳山120 150重庆石柱1 10安徽谢桥112,160上海南汇120河南舞阳115 158河南唐河110江苏东台118 150山东临沂120三、肉兔(单位:元/千克,活兔2.5千克以… 相似文献