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猪萎缩性鼻炎支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
对表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离得到的34株支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),采用针对Bb flagellum gene的一对引物进行PCR扩增,结果所有分离物均能扩增出237bp特异性DNA条带,与传统生化鉴定结果相一致,且其最小检出量为0.64pg;而猪鼻腔和肺组织中常见的多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌及大肠埃希氏菌均未能出现任何DNA条带。这表明,本试验建立的PCR方法具有特异性强、灵敏度高、可靠性好等特点,可用于猪萎缩性鼻炎的临床诊断。 相似文献
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根据GenBank中的牛结核分枝杆菌IS6110的基因片段,设计了1对引物,通过对PCR反应条件进行优化,研制了用于检测牛结核病的PCR试剂盒,该试剂盒扩增的阳性条带为317 bp;敏感性结果显示,该PCR检测试剂盒的最低核酸检测量为1.025 pg/μL;特异性试验表明,仅结核分枝杆菌扩增结果为阳性,副结核分枝杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、金葡萄球菌、链球菌的扩增结果均为阴性。-20 ℃至少可保存12个月,且重复性良好。应用该PCR试剂盒对24份临床样本进行了检测,其PCR检测结果与结核菌素试验检测结果相一致。结果表明,牛结核病PCR检测试剂盒能够对牛结核临床样本进行快捷、灵敏、准确的检测。 相似文献
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR检测试剂盒的研制 总被引:1,自引:1,他引:0
根据GenBank中猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅣA基因序列,设计了1对引物,通过对PCR反应条件进行优化,研制了检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的PCR试剂盒。该试剂盒扩增的阳性条带为600 bp,特异性与敏感性结果显示,该PCR检测试剂盒的最低核酸检测量为50 CFU/mL,而对金黄色葡萄球菌、链球菌、多杀性巴氏杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、副猪嗜血杆菌、大肠杆菌的扩增结果均为阴性。-20℃至少可保存12个月,且重复性良好。应用该PCR试剂盒对41份临床样本进行了检测,其PCR检测结果与细菌学检测结果相一致。结果表明,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR检测试剂盒能够对APP临床样品进行快捷、灵敏、准确的检测。 相似文献
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为建立一种能同时检测大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌的多重PCR方法,试验根据大肠杆菌phoA基因、鸭疫里默氏杆菌ompA基因、多杀性巴氏杆菌kmt 1基因、金黄色葡萄球菌FemB基因的保守区域设计4对特异性引物,通过优化退火温度和引物浓度建立多重PCR方法,检验该方法的特异性、敏感性性、重复性,应用该方法检测145份病死水禽临床样品,并与传统细菌分离鉴定方法进行比较。结果表明:优化后的最佳退火温度为52℃,引物浓度为10μmol/L。建立的多重PCR方法能特异性地扩增出靶基因,沙门氏菌、链球菌、产气荚膜梭菌等临床常见菌均未扩增出条带,对大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌4种细菌的检出下限是0.4 pg/mL,单一PCR扩增ompA、kmt 1、phoA和FemB基因的检出下限分别为4×10-3,0.4,4×10-3,4×10-6 pg/mL。多重PCR方法对临床样品的检测结果与传统细菌分离鉴定方法的符合率均在90%以上。说明试验建立的多重PCR方法具有结果稳定、重复性高的特... 相似文献
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为了解贵州猪伪狂犬病(Pseudorabies)的感染情况并为其防控及净化提供依据,采用酶联免疫吸附(ELISA)法,对贵州主要猪场及屠宰场的1078份猪血清样品进行PRVɡE抗体检测。结果表明:1 078份猪血清样品中PRVɡE抗体阳性检出率为8.5%,其中,养殖场的PRVɡE抗体阳性检出率为18.1%,屠宰场为4%;不同地区猪场的PRVɡE阳性检出率以黄平县的最高,为64.4%,镇远县和贵阳市的次之,分别为14.3%和5.4%,瓮安县和贵定县均未检出;不同猪群育肥猪、妊娠母猪、保育猪的PRVɡE抗体阳性率略高于仔猪。 相似文献
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选择金银花、连翘、蒲公英、枇杷叶、木通、黄芪、甘草组成中草药方剂。取20只小鼠,雌雄各半,体重(20±2)g,按序贯法测出中草药方剂腹腔注射小鼠100%致死率;采用寇氏法将高剂量组与低剂量组的组间剂量比设定为1.15,染毒测定其半数致死量(LD50),测定腹腔注射对小鼠的LD50,取单方草药及其组方对副猪嗜血杆菌进行药物敏感性试验。结果中草药复方腹腔注射对小鼠的LD50为1 374.358 4 mg/kg,95%可信限为1 375.495 2~1 373.221 6 mg/kg;副猪嗜血杆菌对金银花、连翘、蒲公英高敏,对枇杷叶中敏,对木通、黄芪、甘草低敏,但对金银花、连翘、蒲公英、枇杷叶、木通、黄芪、甘草组方水煎剂高敏。该中草药防制方剂的配制及其基本药理试验将为副猪嗜血杆菌病的有效防治提供参考。 相似文献
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山羊传染性胸膜肺炎(Contagious Caprine Pleuropneu-monia,CCPP)是山羊高度接触性传染病,是国际兽疫局控制的B类传染病〔1〕。在夏末和秋季,气温骤变时最常流行,其特征是高热、咳嗽、渐进性消瘦,以及肺实质、小叶间质及胸膜发生浆液性和纤维性炎,肺有明显的肝变〔2〕。自Thomas(1873)首次报道阿尔及利亚发生山羊传染性胸膜肺炎以来,全球已有40多个国家和地区曾有该病发生的报道〔3〕。 相似文献