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为阐明cilp基因在斑马鱼椎骨和肌间骨发育中的作用,利用CRISPR/Cas9建立了斑马鱼cilp基因敲除纯合突变系（cilp-/-）,对其进行了骨骼表型的观察,并进一步采用qRT-PCR分析了14个骨骼发育相关基因在突变体胚胎发育阶段和成鱼骨骼中的表达水平变化。结果显示,与野生型斑马鱼相比,90 dph（days post hatched）cilp-/-斑马鱼的肌间骨数量显著减少了10.27%（P<0.05）,而肌间骨的长度无明显变化;同时突变体斑马鱼中椎骨发生异常融合及髓棘缺失。qRT-PCR结果显示,与野生型相比,col1a1a、sp7、smad4a和smad5基因在胚胎发育的整个时期都存在显著的差异（P<0.01）;在突变体成鱼尾部骨骼组织中bmp2a、bmp2b、smad5、sp7、runx2a、runx2b和bglap基因的表达量均显著低于野生型,表明cilp基因敲除导致了BMPs和SMADs家族基因的表达水平下降,并下调了下游的成骨细胞发育相关基因的表达量,推测cilp功能缺失可能通过抑制BMPs信号通路,影响成骨细胞分化和骨形成,从而导致了肌间骨数量的减少和脊椎骨异常融合。 相似文献
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为了给油田开采地区的粟米种植和生产提供可靠的理论依据,同时丰富重金属Cd的毒理学基础知识,采用营养液培养的方法,研究不同浓度的Cd离子溶液(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mg/L)对粟米幼苗生理生化指标的影响。结果表明:随着Cd离子浓度的增加,粟米幼苗的可溶性蛋白含量先降低后增加,但均低于对照组水平;可溶性糖含量逐渐增加,均高于对照组水平;丙二醛(MDA)含量除0.5mg/L组和1.0mg/L组,其他实验组均显著增加;而叶绿素a和叶绿素b含量均显著降低。可见,粟米对重金属Cd敏感,较低浓度的Cd离子胁迫即可对粟米幼苗产生较为明显的毒害作用,该农作物不适合在有石油污染的区域种植。 相似文献
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为了解江陵县家禽养殖场H7N9禽流感疫苗的免疫抗体水平，湖北省江陵县动物疫病预防控制中心于2021年11月在不同乡镇养殖场采集不同品种家禽血液，离心后分离血清样本，其中采集鸡血清和鸭血清分别为1 830份和1 080份，用血凝抑制试验检测采集样本H7N9禽流感免疫抗体滴度。结果显示，来源于江陵县不同乡镇的鸡和鸭血清样本H7N9禽流感抗体合格率均80%以上，其中规模化家禽养殖场H7N9抗体合格率高于散养户，鸡场H7N9抗体合格率高于鸭场。结果表明，江陵县对家禽H7N9禽流感病毒的免疫效果整体较好，强制免疫工作取得了预期的效果。 相似文献
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【目的】鉴定水稻颖壳类病斑突变体，并进行基因定位，为基因克隆及其分子机制研究奠定基础。【方法】对野生型材料LR005和经EMS诱变得到的颖壳类病斑突变体glmm1(glume lesion mimics mutant 1)进行农艺性状分析、扫描电镜分析、DAB染色和全硅含量测定。glmm1与广亲和材料L422杂交获得的F2群体用于遗传分析，利用图位克隆和BSA-seq方法进行基因定位。【结果】突变体glmm1在抽穗10 d后颖壳和叶片逐渐出现褐色斑点，成熟后颖壳完全呈现褐色。与野生型相比，突变体的株高、穗长、每穗总粒数、结实率和千粒重等都极显著降低。DAB染色表明glmm1颖壳和叶片的活性氧含量增多；扫描电镜显示突变体颖壳和叶片表面硅质细胞皱缩。遗传分析结果表明，突变体glmm1的颖壳类病斑表型受到一对隐性基因控制。利用glmm1与L422的F2分离群体，通过图位克隆和BSA-seq等策略将glmm1定位在水稻第2染色体上68 kb的区间内。该区间内有10个候选基因。序列分析发现该区间仅有一个SNP位点，位于基因Lsi1(LOC＿Os02g51110)的第5个外显子上，导致第238位氨... 相似文献
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为了获得高酶活力的苎麻脱胶果胶裂解酶，为后续分子改造和新型苎麻生物脱胶酶制剂复配提供理论依据。将果胶裂解酶基因pel419从重组质粒pEASY-Blunt E1-pel419更换至pET28a载体中，转化大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达；用SDS-PAGE和Western Blot检验pel419基因的表达效果；用生物信息学软件分析Pel419理化表征和系统发育，预测其二级结构、高级结构及关键氨基酸位点。结果表明，工程菌pET28a-pel419/BL21的果胶裂解酶活力为434.4 U/mL,较pEASY-Blunt E1-pel419/BL21提高了1.7倍；Pel419含375个氨基酸，N末端前22个氨基酸为信号肽，理论pI值为6.59,有4个半胱氨酸，不稳定系数为18.20;其蛋白结构域含有典型的右手β-螺旋结构，属于Pec lyase C家族；Pel419的Ca2+结合位点为ASP151、ASP153和ASP192,定位发现3个保守位点均暴露在三维空间的表面，并处于底物结合空间口袋。大幅度提高了Pel419表达量，并获得了Pel419关键结构信息。 相似文献