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[目的]制备成本廉价、使用方便、效率高的T载体。[方法]用PstI充分酶切纯化的质粒pUC19,再用T4DNA聚合酶消化15min,电泳得到T载体,进行质量检测,并与商品化的T载体pMD18-T进行对比。[结果]自制的T载体自连检测只发现2个菌落与PCR扩增片段连接。经转化大肠杆菌JM109,pMD18-T的平均白斑率为99.4%,转化菌落为3.55万个/μg,自制T载体的平均白斑率为99.7%,转化菌落为3.38万个/μg,完全可以与商品出售的T载体媲美。[结论]该研究自制的T载体自连率低,假阳性率低,克隆效率高,可替代商品化的T载体用于TA连接,而且制备时间短,成本低廉,技术简单,值得推广。 相似文献
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为了解上海及周边地区猪源沙门氏菌的血清型分布、毒力基因及分子分型情况,我们对21株临床分离到的猪源沙门氏菌用沙门氏菌属诊断血清鉴定血清型;采用多重聚合酶链式反应,检测17个主要的毒力基因;应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行分子分型,探寻21株沙门氏菌之间的亲缘关系。结果显示,21株沙门氏菌中,19株血清型为7∶c∶5,1株为4∶i∶2,1株未鉴定出;21株沙门氏菌的17个毒力基因中检出16个,菌株之间无差别;经PFGE后,每个菌株产生13~18条电泳条带,用Bionumerics软件进行聚类分析表明,21株猪源沙门菌相似度在77%~100%,可分为2种不同的基因型,其中A型有19株、B型2株,亲缘关系较近。本次实验分离的沙门氏菌血清型以7∶c∶5为主,含有16个主要的毒力基因,A型为优势基因型。 相似文献
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为了解上海地区历年猪链球菌流行情况、血清型分布情况,本研究对中心2003—2017年间保存的130株猪链球菌开展血清型PCR检测,并与血清凝集实验相验证。结果显示,本地区共鉴定出19种血清型,其中:优势菌株为猪链球菌2型(30.8%),其次为9型(10.8%)、7型( 9.2%),3型、8型、28型和29型均占5.4%。此外,2型、7型、9型、5型、28型、30型为门诊发病菌株的优势血清型,而19型、27型、29型和未定型菌株主要来自健康猪群。提示上海地区流行菌株存在一定的地缘性特征,9型流行率高于全国报道;健康猪群仍存在一定的2型、9型菌株携带,可能成为感染人和猪群的潜在风险因素。 相似文献
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<正>鸭大肠杆菌病是由致病性埃希氏大肠杆菌引起的以临床表现气囊炎、心包炎、肝周炎、关节炎为特征的一种细菌性传染病。该病发生后,经流行病学调查、临床症状、病理剖检、实验室诊断可确诊,经药敏试验,选择对该病比较敏感的药物治疗,可取得较好效果。1发病情况江苏阜宁县某养殖户饲养200日龄种鸭6500只,按正常免 相似文献
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西双版纳在傣语中意为“十二个坝子”。十二个坝子就像十二颗珍珠，镶嵌在祖国的西南边陲。1961年4月14日，周恩来总理在景洪接见我国著名植物学家、中国科学院云南热带植物研究所所长蔡希陶时指示：一定要保护好西双版纳——这块世界上北回归线附近惟一的绿色地带。此后，保护西双版纳这一“植物王国”、“动物王国”、“动植物基因库”，就成了一项光荣的使命。多年来，西双版纳各级森林公安机关一直牢记周总理的指示，认真履行职责，与傣、汉、哈尼、布朗、基诺等13个民族的儿女一道，严厉打击破坏森林和野生植物资源违法犯罪活动，为当地的林业发展和生态建设， 相似文献
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