超低温保存对藏獒犬精子质量及超微结构的研究(英文)   总被引：1，自引：0，他引：1  

武彩红  张斌  戴建军  赵旭庭  谭菊  管远红 《农业科学与技术》2012,(6):1353-1358

[目的]该研究旨在观察超低温保存对藏獒犬精子质量及超微结构的影响。[方法]通过精子运动度、膜完整率及顶体完整率评价4种冷冻保护剂、冷冻时距液氮面3种不同高度及添加物(SDS和Vc)对精子超低温冷冻效果的影响;在此基础上,在扫描电镜和透射电镜下观察超低温冷冻对精子超微结构的影响。[结果]试验1表明,EG作为冷冻保护剂获得了最好的冷冻效果,解冻后精子运动度、膜完整率及顶体完整率分别为36.3%、38.0%和42.0%。但EG和甘油作为冷冻保护剂并无显著差异存在(P>0.05)。试验2表明,距离液氮面5cm冷冻时冷冻效果最好。但除顶体完整率外,冷冻高度2和5cm间不存在显著差异(P>0.05)。试验3表明,稀释液中单独或共同添加十二烷基磺酸钠(SDS)和维生素C(Vc)均能改善精子冷冻-解冻效果。单独添加SDS或Vc时,除单独添加Vc组表现精子冷冻-解冻后运动度更低外(P<0.05),其它指标并无显著差异存在(P>0.05)。共同添加SDS和Vc时,精子冷冻效果最好,精子解冻后运动度、膜完整率和顶体完整率分别为44.1%、48.0%和48.2%。超微结构显示超低温保存引起藏獒犬精子不同程度的损伤,顶体损伤更严重,如顶体肿胀、囊泡化,甚至顶体消失。[结论]冷冻保护剂EG、距液氮面5cm高度及共同添加SDS和Vc可提高精子超低温保存效果,但超低温对精子超微结构仍具有一定损伤作用。  相似文献   

[Ca2+]及山梨醇电激液对猪卵母细胞孤雌激活的影响     

张廷宇  戴建军  吴彩凤  马恒东  王磊  杨山亭  张德福 《农业生物技术学报》2009,17(6):1007-1012

研究了电激液中不同[Ca2+]与不同电脉冲强度对猪体外成熟卵母细胞孤雌激活的影响;以及山梨醇电激活液在猪孤雌激活中的应用。结果表明：（1）[Ca2+]为0.05 和 0.1 mmol/L时,分别以1.6 和1.2 kV/cm激活,得到的卵裂率为73.75% 和 74.70%;囊胚率为37.50%和36.83%,显著高于其余各组（P < 0.05）;当[Ca2+]过高,增加脉冲强度卵母细胞孤雌发育能力反而下降,退化率升高;（2）以山梨醇液进行电激活,在1.6 kV/cm时,卵裂率和囊胚率最高,分别为77.23% 和 34.15%;（3）与甘露醇电激液不同,施加交流电,山梨醇液不能对孤雌胚胎发育起到促进作用;（4）将山梨醇和甘露醇电激液等体积混合,交流脉冲后进行电激活,1.2、1.6 kV/cm组卵裂率分别72.33%和70.03%,囊胚率分别为31.03%和29.60%,虽然略低于甘露醇组（77.07%、36.03%）,但优于山梨醇组（69.63%、26.93%）,差异不显著（P > 0.05）。以上结果说明：猪卵母细胞激活所需内流[Ca2+]存在临界值,临界值内,提高[Ca2+]或电参数,都能提高卵母细胞的激活效果;超过临界值,发育能力下降;山梨醇液能够取代甘露醇液用于猪卵细胞的电激活;同时以山梨醇和甘露醇作为电激液的基本成分,可以用于猪卵母细胞的电激活。  相似文献   

胎儿宫内生长受限动物模型的研究     

孙玲伟  戴建军  梁菲  张树山  吴彩凤  张德福  吕松洁 《上海农业学报》2019,(2)

胎儿宫内生长受限(IUGR)是围产期胎儿发病率和死亡率的主要原因之一。胎儿宫内生长发育与母体及宫内环境等多种因素都密切相关,且IUGR的病因和发病机制未完全揭示。因此,建立与人类临床病理特征相似的IUGR动物模型是研究其发病机制及寻求有效治疗方法的有效途径。通过介绍啮齿类、灵长类、家养类等不同动物的IUGR模型,并综述自然选择法、子宫动脉结扎法、营养限饲法等IUGR动物模型的构建方法,为选择复制IUGR的动物以及复制模型的方法提供新的依据。  相似文献   

原花青素对湖羊冻精抗氧化能力的影响     

吕松洁  吴彩凤  范文华  张树山  戴建军  孙玲伟  张德福 《上海农业学报》2019,(3)

在湖羊冻精基础稀释液中分别添加原花青素(PC),使其最终质量浓度为0μg/mL (CK)、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL,经冷冻解冻后对精子质量进行检测,探讨原花青素对湖羊精液冷冻效果的影响。结果表明:当PC的质量浓度为10μg/mL时,解冻后精子的活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性最高,分别达58. 91%、56. 03%、50. 03%、53. 42%和50. 19%,其中活力和质膜完整性显著高于对照组;SOD值和GSH-PX值分别为212. 60 U/mL和125. 04 U/L,均显著高于对照组; ROS和MDA值分别为363. 05 U/mL和7. 02 nmol/L,显著低于对照组; NO和NOS值分别为8. 22μmol/L和35. 90μmol/L,其中NOS值显著低于对照组。当PC的质量浓度提高至40μg/mL时,精子解冻后质量显著下降,表现为促氧化损伤。在湖羊精液冷冻中,添加10μg/mL的PC可降低精子氧化损伤,提高冻精品质,当PC质量浓度提高至40μg/mL时,对精子具有毒副作用。  相似文献   

猪冷冻精液体外受精研究   总被引：2，自引：1，他引：1  

丁义  戴建军  吴华莉  张德福  徐刚毅 《畜牧兽医学报》2008,39(8)

为简化猪体外受精过程中精液的来源,避免不同公猪精液和不同采精时间对猪体外受精的影响,本研究采用5mL大管冷冻精液进行体外受精（IVF）,研究IVF过程中的各项参数。结果表明：精卵共孵2～8h对多精人卵率影响不大（P〉0．05）,2-细胞率随着共孵时间的延长而增加,8h时达到72．8％,显著高于2h组（60．5％,P〈0．05）,桑椹胚和囊胚发育率以6h组最高,分别达46．1％和3．48％。多精人卵率随精子浓度的增加而增加,且各组之间差异显著（P〈0．05）,2-细胞率也以10^8组（81．2％）最高,且显著高于10^5组（63．7％）（P〈0．05）,同时10^7组和10^8组分别获得了8．11％和3．13％的囊胚发育率。以NCSU-23作为成熟培养液,并部分去除卵丘细胞的IVF卵裂率和囊胚率最高,达77．1％和7．33％。冻精和新鲜精液的IVF,无论是在卵裂率,还是桑椹胚或囊胚率上均无显著差异（P〉0．05）。  相似文献   

应用冷冻环玻璃化法冷冻猪MⅡ期卵母细胞     

杨山亭  王磊  戴建军  吴彩凤  张廷宇  张德福 《上海农业学报》2009,25(3):27-30

利用冷冻环玻璃化法对猪MⅡ期卵母细胞进行冷冻试验.结果表明:冷冻环玻璃化法冻后存活率达80.00%,显著高于OPS法和细管法的72.50%和53.33%;冷冻环玻璃化法激活后的卵裂率为7.22%,也显著高于后两者的4.85%和0;紫杉醇和细胞松弛素预处理能在一定程度上提高猪MⅡ期卵母细胞的抗冻能力,两种添加物对冻后卵母细胞的存活率和卵裂率无显著影响.  相似文献   

猪卵母细胞中细胞骨架的激光共聚焦显微技术     

武彩红  张斌  芮荣  戴建军  吴敏秋  苏治国 《江苏农业科学》2008,(3):187-189

为了探讨卵母细胞中细胞骨架的激光共聚集显微技术,为相关研究提供技术平台,以猪新鲜GV期和体外成熟MⅡ期卵母细胞为研究对象,通过对其进行固定、穿透、封闭、免疫荧光染色、压片和封片等处理,于激光扫描共聚集显微镜下观察微管、微丝和染色体形态分布,摸索出一套适合于猪卵母细胞中细胞骨架的显微方法,可准确定位卵母细胞相应细胞骨架的形态。卵母细胞染色前处理、染色过程及压片均为该方法的关键性步骤,其中保证所有操作在37℃条件下进行尤为重要。  相似文献   

脂质对猪未成熟卵母细胞超低温保存效果的影响     

张斌  武彩红  芮荣  戴建军 《江苏农业科学》2008,(6)

对猪卵母细胞进行直接冷冻,或冷冻前进行细胞松弛素B处理或细胞松弛素B和离心极化共处理.结果表明,各冷冻组在解冻后均获得了较高的形态正常率,但冻后FDA染色存活率均显著低于对照组,分别为56.8%、45.7%和49.0%,对照组为95.4%(P＜0.05).冻后各组体外成熟率分别为42.6%、30.4%和27.0%,均存在显著差异(P＜0.05),并显著低于对照组卵母细胞体外成熟率(73.9%,P＜0.05).仅直接冷冻后卵母细胞获得了7.8%的体外受精卵裂胚,也显著低于对照组的53.3%(P＜0.05).在此基础上,随机挑选胞质均匀、形态正常的新鲜卵母细胞和直接冷冻-解冻后卵母细胞制备透射电镜样本,观察结果表明,冷冻后卵母细胞内脂滴仅见均质状,而未见不均质脂滴.说明脂滴的变化可能是影响卵母细胞发育能力的原因之一.  相似文献   

加快推动精液冷冻保存技术在大型猪育种企业中应用   总被引：1，自引：1，他引：0  

张树山  韩雪峻  姜红菊  戴建军  吴彩凤  孙玲伟  张德福 《猪业科学》2018,(10):112-113

基于猪冷冻精液已开始步入商业化生产进程,该文分析了猪精液冷冻保存技术在国内大型猪育种企业中应用的重要性和必要性。目的在于促进猪精液冷冻保存技术带动养猪业发展实现革命性的飞跃。  相似文献   

ISSR分析崇明白山羊的遗传多样性及亲缘关系     

陈晓  戴建军  李垚  吴彩凤  张树山  孙玲伟  张德福  李丽 《上海农业学报》2020,36(1)

为查明崇明白山羊群体的遗传多样性水平和亲源关系,应用ISSR分子标记技术,使用12条多态性较好的ISSR引物对206只崇明白山羊进行PCR扩增。结果表明:总计扩增出181条谱带,平均每条引物扩增产生15.08条,其中含有多态性条带163条;经统计分析,崇明白山羊呈现出丰富的多样性,检测到的观测等位基因数(Na)为1.900 6±0.300 1,有效等位基因数(Ne)为1.477 8±0.365 6,Nei's基因多样度(h)为0.278 5±0.184 9,多态位点百分率(PPB)为90.06%,Shannon's信息指数(I)为0.418 6±0.251 0,群体总基因多样性(Ht)为0.279 7±0.034 0,群体内基因多样性(Hs)为0.226 7±0.025 8,遗传分化值(Gst)为0.189 4,崇明白山羊的遗传变异81.06%来源于种群内部。崇明白山羊的基因流(Nm)为2.1397,说明崇明白山羊群体间存在一定的基因流。UPGMA聚类分析显示:样本相似系数为0.519 3-0.989 0,206个个体可分为11个群体,个体间虽然呈现差异,但具有较好的同质性。  相似文献