虹鳟IgM重链恒定区的表达及兔抗血清的制备     

赵景壮  徐黎明  刘淼  曹永生  尹家胜  刘红柏  卢彤岩 《水产学报》2014,38(8):1175-1181

为了能够成功表达虹鳟IgM,本研究利用生物信息学软件对虹鳟IgM的亲水性及抗原性进行了分析,根据GenBank收录的虹鳟IgM重链恒定区,参照生物信息学分析结果,设计用于扩增截短的IgM基因的引物,以虹鳟头肾RNA提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增虹鳟截短的IgM重链恒定区部分基因片段,连接原核表达载体pET-27b,利用大肠杆菌Rosetta进行表达。SDS-PAGE及HPLC结果显示,纯化后截短的IgM大小约为47.7 ku,且纯度达到90%。利用其制备兔抗血清后ELISA分析结果显示,所制备的兔抗血清与本研究所表达的截短IgM蛋白的反应效价为1∶40 000,与虹鳟血清提取的全长IgM反应效价为1∶20 000并且呈现出抗原计量依赖性。研究表明,重组IgM蛋白与虹鳟血清中的天然IgM重链恒定区具有近似的结构,利用其所制备的兔抗血清能够与虹鳟鱼体中的天然IgM发生特异性反应。  相似文献   

重组虹鳟IFN-γ2的原核表达及抗IHNV活性分析     

曹永生  徐黎明  赵景壮  刘淼  张奇亚  卢彤岩 《水产学报》2016,40(10):1586-1594

为获得虹鳟IFN-γ2(rt IFN-γ2)抗传染性造血器官坏死病毒(IHNV)活性的相关数据,实验根据NCBI已发表序列设计引物,提取经植物血凝素刺激后的虹鳟头肾细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增471 bp的该基因完整开放阅读框。将该基因重组至原核表达载体p ET32a中,并转化大肠杆菌Rosetta,进行诱导表达,SDS-PAGE结果显示,目的蛋白以包涵体形式表达,大小约为38.4 ku。重组蛋白经复性、纯化后在CHSE-214细胞上进行抗IHNV活性分析,结果显示,rt IFN-γ2在CHSE-214细胞上抗IHNV活性为6.63×106U/mg。Real-time PCR结果显示,rt IFN-γ2免疫后,虹鳟头肾、脾、肝中IRF-1、IRF-2、IFN-I、IFN-γ和Mx表达水平均显著提高,总体而言免疫后2天机体抗病毒状态弱于免疫后1天。攻毒保护实验结果显示,免疫后1天进行IHNV攻击时,鱼死亡率为40%,而免疫后2天进行IHNV攻击时,鱼死亡率达到80%。研究表明,原核表达系统制备的重组虹鳟IFN-γ2不仅具有体外抗IHNV活性,更能激发虹鳟的抗病毒状态,从而为虹鳟抵抗IHNV感染提供一定的保护力。  相似文献   

怀头鲇体表溃烂症病原鉴定及致病性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

李绍戊  王荻  曹永生  刘红柏  卢彤岩 《水产学报》2018,42(9):1446-1453

为探讨黑龙江流域怀头鲇体表溃烂症的病因及防控措施,本研究采用常规方法从患病鱼的肝脏、脾脏和肾脏等部位分离病原菌,通过人工感染试验确定分离菌株的致病性,并对菌株的基本形态、理化特性、分子特征、毒力基因携带情况及耐药性等进行了系统研究。结果显示,从患病鱼体内分离得到3株病原菌,分别命名为NY-8、NY-9和NY-12;人工感染试验发现,NY-8和NY-9株对试验鱼有较强的致病力,NY-12株毒力较弱;3株细菌混合感染后,鱼体发病症状与临床自然发病症状一致,试验鱼死亡率高达到100%。综合理化特征和16S r RNA基因序列分析结果,确定NY-8、NY-9和NY-12株分别为气单胞菌属的维氏气单胞菌、杀鲑气单胞菌和嗜水气单胞菌。5种毒力基因在3株气单胞菌中的分布表现为两种基因型,h l y+/a e r+/a c t+/a l t+/G C A T+和h l y+/a e r-/act+/alt+/GCAT+,同时携带5种毒力基因的NY-8和NY-9分离株致病性显著高于NY-12株。3株细菌在耐药谱上有一定差异性,NY-8和NY-9株均对4种氟喹诺酮类药物敏感,对氨基糖苷类、呋喃类等药物耐药;NY-12株仅对左氧氟沙星和氟苯尼考等2种药物敏感。  相似文献   

中国二系杂交粳稻种质资源的评价     

杨忠义  苏艳  曹永生  刘晓利  奎丽梅  卢义宣 《西南农业学报》2008,21(5)

通过1973年以后二系法杂交稻特别是二系法杂交粳稻的研究选育和示范生产情况调研,重点对不育系、恢复系及其杂交稻组合的相关信息进行整合,并从选育、系谱、类型以及特征特性等方面进行了评价分析。此外,还对部分二系和三系杂交粳稻品种(组合)的主要特征特性进行对比,认为三系杂交稻和二系杂交稻正处于齐头并进发展的态势。其结果可供涉及杂交稻的各领域提供参考利用。  相似文献   

基于INTERNET的水稻基因数据库信息系统   总被引：8，自引：3，他引：5  

鄂志国  庄杰云  曹永生  钱前  王磊 《中国水稻科学》2006,20(6):670-672

水稻基因数据库系统是在建的国家作物科学数据共享中心的一个重要模块,也是国家水稻数据中心的一个重要子系统。功能上,该子系统提供了有关水稻基因各方面的数据信息,包括基因序列、基因产物、基因功能、参考文献等;系统设计上,基于ASP.NET的程序骨架使得系统在网络上运行时更快捷、更安全、更易维护。用户可通过因特网（http://gene.ricedata.cn/）对数据库进行检索操作。  相似文献   

云南作物资源特征特性及生态地理分布研究Ⅳ.云南地方稻种资源的加工品质   总被引：1，自引：2，他引：1  

杨忠义  曹永生  苏艳  刘家富  李华惠  卢义宣  刘晓莉 《西南农业学报》2006,19(4):585-590

稻种的加工品质在稻米生产和市场流通中十分重要,在分析研究了云南地方稻种资源的营养和外观品质的基础上,继续分析研究加工品质的生态地理分布。从总的趋势看,初步摸清了加工品质包括糙米率和精米率的生态地理分布习性,在云南省亚热带及滇中籼粳交错区、滇南单双季稻区,不仅糙米率和精米率高的资源出现频率多,而且糙米率和精米率相对比较略高于云南的其它地区,但针对加工品质不同的成分和特性还有着各自的分布侧重区域等,其结果可为优异资源挖掘和利用、优质稻育种研究、生产和稻米流通等领域提供参考依据。  相似文献   

云南作物资源特征特性及生态地理分布研究Ⅴ.云南地方稻种资源的蒸煮和食用品质     

杨忠义  卢义宣  苏艳  曹永生  刘家富  刘晓利  辜琼瑶 《西南农业学报》2006,19(5):811-822

以云南"立体气候"类型并结合云南省的5个稻作分区,应用GIS等技术分析研究了云南地方稻种资源蒸煮和食用品质的生态地理分布.初步摸清了蒸煮和食用品质包括总淀粉、直链淀粉、糊化温度和胶稠度的生态地理分布习性,初步分析认为总淀粉、直链淀粉、支链淀粉、糊化温度和胶稠度的总趋势是主要分布在云南的亚热带地区,以及滇南单双季籼稻区、南部边缘水陆稻区、滇中一季粳籼稻区,但针对蒸煮和食用品质的不同成分和特性有着各自的分布侧重区域等,其分析结果可为挖掘和利用优异资源,优质稻育种研究、生产等领域提供参考依据.  相似文献   

中国小豆种质资源核心样品的初步建立   总被引：17，自引：0，他引：17  

王述民  曹永生  胡家蓬 《华北农学报》2002,17(1):35-40

基于地理区划、农艺性状鉴定和营养品质分析资料，通过离差平方和法聚类，采用系统取样和随机取样相结合，从3946份小豆种质资源中选取408份种质作为核心样品，并经多样性指数和数值性状的t测验以及核心种质与全部种质的性状极值、标准差和变异系数的比较，初步证明已构建的核心样品具有良好的代表性。  相似文献   

基于规划预测的焦庙镇水环境承载力评价     

曹永生  刘菲菲  许颖  郭鑫  赵燕燕 《安徽农业科学》2013,41(8):3614-3615

选用承载率评价法,基于焦庙镇环境规划,结合研究区相关统计数据,评价焦庙镇水环境承载力。结果表明,焦庙镇水环境有一定污染,2008、2015、2020年水环境承载力指数分别为0.361 1、0.694 4和0.902 8,均有一定富余,但富载不多,有超载的危险,远期规划应注意水环境保护。  相似文献   

云南作物资源特征特性及生态地理分布研究V．云南地方稻种资源的蒸煮和食用品质     

杨忠义卢义宣  苏艳曹永生  刘家富刘晓利 辜琼瑶 《西南农业学报》2006,19(5):811-822

以云南“立体气候”类型并结合云南省的5个稻作分区,应用GIS等技术分析研究了云南地方稻种资源蒸煮和食用品质的生态地理分布。初步摸清了蒸煮和食用品质包括总淀粉、直链淀粉、糊化温度和胶稠度的生态地理分布习性,初步分析认为总淀粉、直链淀粉、支链淀粉、糊化温度和胶稠度的总趋势是主要分布在云南的亚热带地区,以及滇南单双季籼稻区、南部边缘水陆稻区、滇中一季粳籼稻区,但针对蒸煮和食用品质的不同成分和特性有着各自的分布侧重区域等,其分析结果可为挖掘和利用优异资源,优质稻育种研究、生产等领域提供参考依据。  相似文献