三元杂交猪IL-18全基因的序列测定及分析     

曹素芳  李明  王岩  刘长斗  朱赞梅  唐桂芬  肖松云 《安徽农业科学》2009,37(6):2413-2415

[目的]为进一步研发新型抗病毒制剂和疫苗佐剂、有效控制猪重大传染病奠定基础。[方法]根据GenBank中猪白细胞介素-18基因（IL-18）序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR方法从河南三元杂交猪脾脏淋巴细胞中扩增猪IL-18基因,并进行克隆、序列测定和分析。[结果]猪IL-18基因全长为579 bp,编码192个氨基酸的无活性前体蛋白,但前体蛋白并不含典型的疏水信号肽,在第35位氨基酸残基处有1个潜在的白细胞介素1β转换酶（ICE）剪切位点,剪切后变为具有生物活性的猪IL-18成熟蛋白。序列分析结果表明,该试验获得的猪IL-18基因与已知猪IL-18基因序列同源性很高,均为96%以上,其推导的氨基酸同源性在98%以上。[结论]该研究成功构建了猪IL-18基因的重组真核表达载体并得到了具有生物活性的瞬时表达产物。  相似文献   

南方根结线虫二龄幼虫对不同类型盐离子的趋化反应   总被引：1，自引：0，他引：1  

孟丽  漆永红  刘玉霞  曹素芳  杜蕙  吕和平  李敏权 《植物保护》2014,40(2):85-89

为了明确南方根结线虫对不同类型盐离子的趋化性,在琼脂糖平板培养基上测试了南方根结线虫2龄幼虫对37种无机盐和11种有机盐的趋化反应。结果表明,Cl-和SCN-盐对南方根结线虫均有排斥作用;对南方根结线虫有排斥作用的NO-3盐为Ba(NO3)2、NH4NO3、Mn(NO3)2;H2PO-4或HPO2-4盐为KH2PO4、K2HPO4;CO2-3或HCO-3盐为 Na2CO3、K2CO3、(NH4)2CO3 和KHCO3;OH-盐为KOH和 NaOH;有机酸为C2H4O2、C3H6O3和C4H6O6。含有相同阳离子的不同盐对南方根结线虫的吸引或排斥作用不受影响。阴离子对南方根结线虫的排斥作用大小为SCN->NO-3>Cl->OH->CO2-3> H2PO-4>有机酸>SO2-4。只有KCl、Ba(NO3)2、NH4NO3、Mn(NO3)2、(NH4)2CO3、C2H4O2和 C4H6O6对线虫的趋化性随浓度的增加而增加,而其他被测试的41种盐浓度对线虫的趋化性没有显著影响。  相似文献   

一株湖北HP-PRRSV分离株nsp2基因遗传变异分析     

陈盛楠  陈奎蓉  赵雯娟  杨永磊  赵一苹  曹素芳 《郑州牧业工程高等专科学校学报》2018,(3)

为了解湖北地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的遗传变异情况和分子流行病学情况,从湖北地区某猪场采集疑似病料进行处理,接种Marc-145细胞,待细胞发生病变后收获病毒,提取病毒总RNA,应用RT-PCR法对PRRSV nsp2部分基因进行扩增,经序列测定,并与美洲株VR-2332、欧洲株Lelystad virus及国内各PRRSV分离株进行核苷酸及其推导的氨基酸进行同源性比较,并绘制系统进化树。结果表明,经RT-PCR扩增获得了PRRSV湖北分离株(命名为HDZZ1)的nsp2基因,核苷酸序列分析显示,获得的nsp2核苷酸与VR-2332的同源性为77. 7%,与Lelystad virus的同源性为44. 3%。其氨基酸与VR-2332的同源性为64. 58%,与Lelystad virus的同源性为13. 93%。证明所获得PRRSV仍为美洲型。与我国分离的高致病性PRRSV毒株07BJ、BJ0708、GD、GDYC、HEB1、Henan-1、HN-HW、HPBEDV、HUB1、HUN4、JXA1、SX-1、SX2009核苷酸同源性高达97. 3%~98. 8%,氨基酸同源性为96. 40%~98. 8%,氨基酸序列分析结果显示,Nsp2蛋白在222位和274-302位两处出现了30个氨基酸的不连续缺失,其Nsp2蛋白的抗原表位发生了改变。系统发生树结果表明,HDZZ1株与高致病性PRRSV毒株位于同一大分支中,与欧洲代表株(Lv)、美国NADC30株和国内NADC30-like HNjz15株处于不同分支中。由此断定,HDZZ1毒株为高致病性PRRSV毒株。  相似文献   

武威市黄瓜根结线虫病病原鉴定   总被引：3，自引：1，他引：2  

漆永红  吕和平  杜蕙  曹素芳  高赟 《甘肃农业科技》2009,(9):9-11

对甘肃省武威市黄瓜根结病病原线虫进行了分离鉴定,确定该市黄瓜根结病病原线虫为南方根结线虫(Meloidogyne incognita).  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因变异分析     

曹素芳  王岩  肖松云  唐桂芬 《郑州牧业工程高等专科学校学报》2009,29(1):1-3

采用RT—PCR方法对疑似PRRS阳性病料进行克隆和测序获得了0RF7基因片段。序列分析结果表明获得的0RF7基因序列不存在缺失现象。与美洲型代表毒株VR-2332的核苷酸序列的同源性为91．3％,氨基酸同源性为92．6％;与我国最早的PRRSV分离株CH—la相比,核苷酸同源性为93．5％,氨基酸同源性为92．6％;与我国高致病性PRRSV毒株SD—ZQ的核苷酸同源性最高为98．1％,氨基酸只有两个不同,同源性为98．3％;与本省的Hn-1／06毒株的核苷酸同源性为97．3％,氨基酸同源性为97．5％;与2004年分离的FJ-2株与ORF7基因的核苷酸差异稍大为85．4％,氨基酸同源性为88．6％;与欧洲型分离株LV株和N-34株0RF7基因的核苷酸差异很大,同源性仅为41．1％和40％,氨基酸同源性为47．1％和47．6％。表明所获得序列的流行毒株属于美洲型,但其毒力已发生了变异。  相似文献   

靶向PRRSV核衣壳蛋白N基因的siRNA表达载体的构建及鉴定     

曹素芳  李明  王岩  朱赞梅  刘长斗  唐桂芬  肖松云 《农业科学与技术》2009,10(4):171-174

1材料与方法 1．1材料限制性核酸内切酶HindIII、BamHI、PvuII、SspI、质粒抽提试剂盒、EcoT14 DNAMarker购自TakaRa公司。T4DNA连接酶购于promega公司。大肠杆菌DH5α菌株由该实验室保存。siRNA表达载体pSilencer 4．1-CMV Nero质粒购自Ambion公司。  相似文献   

甘肃省梨树主要病虫害调查初报          下载免费PDF全文

李红旭  曹素芳  赵明新  王玮  曹刚 《寒旱农业科学》2018,(10):37-41

为了明确甘肃省梨树病虫害种类、危害部位、地理分布和危害程度,2011 — 2014年对全省不同地区梨园定点、定期进行了系统调查。结果表明,甘肃省梨主产区危害梨树的病害共11种,真菌、细菌和生理性病害的比例为10∶0∶1,以真菌性病害为主。危害部位有枝干、叶片、果实和新梢。偏重发生的病害主要有白粉病、腐烂病、黑斑病、锈病和黄化病。除白粉病和腐烂病在全省6个产区均发生外,其他病害在各产区分布不均匀,发生地区各有差异。虫害共调查到6目16科20种,危害部位有叶片、果实、新梢和枝条。属偏重发生的虫害主要有梨小食心虫、梨木虱、梨茎蜂和大青叶蝉。除梨小食心虫、梨茎蜂、梨木虱和苹果全爪螨4种在全省6个产区均发生外,其他虫害在各产区分布有差异。  相似文献   

梨小食心虫在甘肃的发生规律及其综合防控技术   总被引：1，自引：1，他引：0  

李红旭  曹素芳  刘小勇  赵明新  王玮 《甘肃农业科技》2017,(7):93-94

总结了梨小食心虫在甘肃的主要为害状及发生规律,并从预测预报、农业防治、物理防治、化学防治及生物防治等方面提出了梨小食心虫综合防控技术。  相似文献   

微生物菌剂浓度对梨树废弃枝条堆肥化处理的影响          下载免费PDF全文

曹刚  李红旭  赵明新  毕淑海  曹素芳  王玮 《寒旱农业科学》2017,(12):43-46

研究了不同菌剂接种浓度下,梨树废弃枝条堆制成的有机肥的腐熟程度和养分状况,结果表明,接种菌剂处理可以延长高温期时间,提高堆体温度,且与菌剂浓度成正比,堆体全氮、磷、钾、钙含量显著提高,有效的提升了堆肥产物的腐熟程度和营养成分。接种菌剂浓度为0.20%～0.30%时处理效果最佳。  相似文献   

两株高致病性PRRSV河南分离株ORF5基因克隆及遗传变异分析   总被引：3，自引：1，他引：2  

曹素芳  李明  王岩  刘长斗  朱赞梅  唐桂芬  肖松云 《河南农业科学》2009,(7)

从河南信阳和新乡两地区猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征病料中分离出能引起Marc145细胞病变的病毒,命名为HN1和HN2。采用RT-PCR方法从分离的2株PRRSV中均分别扩增出ORF5基因,并将其克隆、测序。用DNAStar软件分析所测序列,并与北美洲型VR-2332株及国内分离株进行核苷酸和推导的氨基酸同源性比较,绘制系统进化树,结果表明,ORF 5核苷酸与北美洲型的同源性为81.2%～99.1%,与欧洲型Lv株的同源性分别为35.9%和35.3%,推导氨基酸与北美洲型的同源性为84.5%～99.5%,与欧洲型Lv株的同源性分别为46.0%和45.5%。证明新分离到的PRRSV毒株仍属北美洲型。与国内分离的高致病性PRRSV毒株JXA1、HUB1、JX0612、GDZC1、ZQ、SX-1、HB1、HEB1、Hnyz核苷酸同源性达96.5%～99.1%,氨基酸同源性为96.0%～99.5%。分析结果表明,所获得的2个毒株GP5蛋白氨基酸序列中的抗原表位已经发生变异。  相似文献