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Cry1Ab/1Ac基因在转基因玉米中的表达研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究通过人工合成获得了密码子的优化Bt杀虫蛋白基因Cry1Ab/1Ac,并以草甘膦抗性基因epsps为标记基因,构建了高效表达载体pBAC174,并用基因枪法将表达载体pBAC174导入受体材料幼胚愈伤组织。对轰击后的愈伤组织进行筛选、分化和植株再生,获得40个草甘膦抗性的玉米再生植株。经PCR和Southern杂交检测表明,外源Cry1Ab/1Ac基因已经整合到玉米的基因组中。转基因植株叶片蛋白粗提物用BT-Cry1Ab/1Ac金标免疫检测试纸条检测,结果表明Bt基因在部分转基因植株后代获得了表达。本研究为进一步利用Cry1Ab/1Ac基因进行玉米抗虫育种奠定了基础。 相似文献
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利用微滴式数字PCR技术分析转基因玉米抗除草剂标记基因EPSP拷贝数 总被引:1,自引:0,他引:1
基于微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)平台,以转基因玉米为例,建立了转基因作物(Genetically modified crops,GM crops)外源基因拷贝数分析方法,对待测样品进行了快速鉴定,并从T_0转基因玉米株系中鉴定出多个单拷贝单株。对该方法与实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法在分析结果的准确性方面进行了比较,从试验数据可以看出,2种检测方法的结果比较一致,单拷贝检测结果高度一致;但是ddPCR试验操作更加简便,试验结果可重复性强,试验数据更加准确可靠。研究表明,ddPCR方法是一种更加便捷、快速和准确的外源基因拷贝数分析新方法,基于其在准确性和灵敏度方面的显著优势,将会在转基因作物的外源基因拷贝数分析中得到广泛的应用。 相似文献
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本试验旨在探究滩羊二毛期羊毛性状及其相关性,采集出生当天(初生期)及30~40日龄(二毛期)的滩羊样本各511个,其中公羊260只,母羊251只,分别测定初生期和二毛期羊毛的侧部毛长和侧部弯曲数;并分析了二毛期两型毛和绒毛的平均纤维直径(MFD)、平均纤维曲率(MFC)、毛纤维直径变异系数(CVFD)和毛纤维直径标准差(FDSD),对羊毛性状进行描述性统计及相关性分析。结果显示:初生期滩羊羊毛侧部弯曲数和初生期侧部毛长呈极显著中等正相关(r=0.410,P0.001);初生期侧部弯曲数和二毛期侧部弯曲数间存在极显著中等正相关(r=0.618,P0.001);两型毛FDSD与CVFD间呈极显著强正相关(r=0.796,P0.001),绒毛FDSD与CVFD间极显著强正相关(r=0.942,P0.001);两型毛MFD与FDSD呈极显著中等正相关(r=0.511,P0.001),绒毛MFD与FDSD呈极显著中等正相关(r=0.660,P0.001);绒毛MFD与CVFD呈极显著中等正相关(r=0.410,P0.001),两型毛MFD与CVFD呈显著弱负相关(r=―0.106,P0.05);绒毛MFD和MFC间呈极显著中等负相关(r=―0.497,P0.001),两型毛MFD和MFC间呈弱正相关,相关性不显著(r=0.011,P0.05)。本试验首次大规模检测了滩羊二毛期羊毛的性状指标,确定了各指标间的相关关系,为滩羊裘皮性状的选育提供数据支撑。 相似文献
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从培矮645/轮廽422组合选育的C470,谷粒长宽比3∶1,株叶形态偏籼,育性亲和性与米质为粳型,垩白率和垩白度可达国优一级,配组优势和品质能同步提高,可以作为IR24质型粳稻恢复系和优质亲本利用,其恢复谱窄,不耐寒等缺点正在改良中。 相似文献
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以不同粒色种子为材料,在湿自封袋,沙子、土壤和草碳土四种培养条件下研究它们的芽苗特征,结果表明:在湿自封袋里彩色籽粒生根发芽较好;三个自交系京24,京501和9-7在湿沙培养条件下发芽率最高、芽总长和胚根长最长,根数最多;不同粒色种子苗高、苗鲜重、茎叶鲜重、根鲜重和籽粒余物重有差异,A-37(12-5)株系籽粒余物重最小,吸收籽粒养分较多;土壤培养的的苗高最高,苗鲜重、茎叶鲜重、根鲜重最大,籽粒余物重最小。以上可知,湿沙适宜于种子发芽实验,幼苗主要利用籽粒养分,土壤中幼苗吸收籽粒和土壤养分,草碳土对幼苗生长有抑制作用。 相似文献
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以玉米为生物反应器,将猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)主要中和抗原表位(core neutralizing epitope, COE)基因导入玉米自交系,获得了高效表达PEDV\|COE的转基因玉米稳定株系。首先,根据玉米密码子的偏好性,设计合成优化的COE编码基因,构建了植物表达载体pBAC9036。然后,利用PDS1000/He基因枪转化玉米幼胚,经过愈伤组织诱导、分化再生培养,获得71株转化再生植株,进而通过田间草甘膦抗性筛选,获得2个T1代转基因玉米稳定株系。通过PCR、RT\|PCR、间接ELISA和Western blot等鉴定结果显示,COE基因已成功整合到玉米基因组并进行了转录和蛋白表达。并且种子中COE蛋白占可溶性总蛋白的0.122%和0.078%。最后,提取转基因玉米稳定株系的种子可溶性蛋白,与佐剂混合皮下注射免疫小鼠并取可溶性蛋白灌胃免疫小鼠,均可产生针对PEDV抗原的特异性抗体。获得的转基因玉米可有效表达COE蛋白,表达产物具有显著的免疫原性,为进一步研制PEDV\|COE转基因玉米疫苗奠定了基础。 相似文献
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