转基因油菜筛查检测策略研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

张丽  武玉花  吴刚  曹应龙  李均  卢长明 《中国油料作物学报》2012,34(1):74-81

根据收集到的国内外已商业化转基因油菜品种的基因元件信息,构建了油菜转基因检测分子特征矩阵,在分析基因元件使用频率的基础上,建立了转基因油菜的筛查检测策略。研究发现,利用P-CaMV35S、P-FMV35S和bar这三个元件组合,对现有转基因油菜品种的筛查检出率可达100%。将P-CaMV35S、P-FMV35S、bar、CP4-¬EPSPS、PAT和T-NOS组合,每个转化事件可检出至少两次,增加了检测的可靠性。同时,分析了不同转化事件中同名基因元件的序列差异,进一步验证了分子特征矩阵筛查方法的可行性。  相似文献   

能以植酸为唯一磷源生长的转基因甘蓝型油菜   总被引：5，自引：1，他引：4  

方小平  王转  陈茹梅  李均  范云六  罗莉霞  陈坤荣  任莉 《作物学报》2010,36(2):228-232

由于难溶性矿物磷酸盐和有机磷的大量存在,土壤总磷虽高,但多数土壤缺乏有效磷,这是世界范围内农业生产的主要限制因素之一。土壤中有机磷的存在形式主要是植酸,为了提高土壤有效磷供给,利用根癌农杆菌菌株LBA4404,通过两步再生方法将植物表达载体pBINPR-phyI中含有的带胞外分泌信号肽序列的植酸酶基因转入油菜品种中双6号中,并获得转基因油菜56株,转化效率0.16%~9.20%。分子检测和酶活性检验表明,植酸酶基因已导入中双6号,转基因植株能有效表达植酸酶基因并向根外分泌植酸酶,转基因植株能以植酸为唯一磷源正常生长,非转基因植株则不能。结果表明,转基因植株根系分泌大量高活性植酸酶有助于土壤中有机磷释放出有效磷供植物利用;利用基因工程技术提高植物对土壤闭蓄态有机磷利用效率的前景是可期待的。  相似文献   

育肥牛饲料添加剂的比较试验     

徐春城  金承范  李钟乐  李国范  李均 《延边大学农学学报》1995,(2)

本试验选用２０头平均体重２０３．０５ｋｇ，１４－１８月龄的利×延杂种一代末去势公牛。根据体重随机分为４组，每组５头，经６０天的试验，其结果：平均日增重试验组Ａ、Ｂ、Ｃ分别为１．２１６ｋｇ、１．００２ｋｇ、１．１４６ｋｇ，比对照组Ｄ的０．８９４ｋｇ分别提高３６．０２％、１２．０８％、２８．１９％，差异显著（Ｐ＜０．０５）。  相似文献   

和龙麦饭石在反刍动物上的试验研究     

金太镇  李钟乐  张敏  李均  薛双贵 《延边大学农学学报》1995,(4)

选用１６头黑白花育成母牛，随机分成试Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和对照组．试验组的基础日粮中分别添加和龙麦饭石１．５％、２．０％、２．５％，经７０天的饲养试验和７天的消化试验，结果表明：试验组日增重比对照组分别提高８．８６％、１７．２２％、１７．７２％，差异极显著（Ｐ＜０．０１）；粗蛋白质消化率提高５．８１％、８．６５％、８．５６％，差异显著（Ｐ＜０．０５）；粗纤维消化率分别提高２．１７％、７．０８％、６．９７％；差异显著（Ｐ＜０．０５）．选用４只延边半细毛羊，采用４×４拉丁方设计，测定瘤胃ＰＨ值、瘤胃ＮＨ３－Ｎ、ＶＦＡ及ＮＤＦ，ＡＤＦ的消失率，结果表明：和龙麦饭石有调节瘤胃酸碱度作用和吸咐瘤胃ＮＨ３－Ｎ的作用；试验组瘤胃内ＴＶＦＡ浓度分别比对照组提高７．８９％、１７．６７％％、１６．１７％，差异极显著（Ｐ＜０．０１）；Ｃ２／Ｃ３值提高１３．５１％、１９．８２％、１８．９２％，差异极显著（Ｐ＜０．０１），ＮＤＦ消失率提高３．６３％、７．３９％、６．３１％，差异极显著（Ｐ＜０．０１）；ＡＤＦ消失率提高７．０１％、１３．６３％、１１．３８％；差异极显著（Ｐ＜０．０１）．  相似文献   

猪TRIM56敲除细胞系的构建及在增殖PRRSV疫苗毒株中的应用     

张秀婷  吴香菊  齐静  丛晓燕  李均同  陈大全  姜宁朋  杜以军 《畜牧与兽医》2023,(11):117-123

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建1株猪TRIM56基因敲除的PAM-KNU细胞系，并探究其在增殖猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)疫苗毒株中的应用。根据猪TRIM56基因组外显子区域设计合成2对特定的向导RNA引物，将引物磷酸化、退火并连接至Px459M和EZ-Guide-XH载体构建敲除质粒Px459M-sTRIM56-KO;将敲除质粒转染PAM-KNU细胞，经嘌呤霉素筛选、有限稀释法筛选获得单克隆细胞并扩大培养；通过RT-PCR、测序及Western blot筛选鉴定，最终获得了敲除细胞系sTRIM56-KO-PAM-KNU;将PRRSV R98疫苗株感染野生型细胞及敲除细胞系，利用real-time RT-PCR、半数组织培养感染量(TCID₅₀)以及Western blot检测PRRSV增殖情况。结果显示，TRIM56敲除细胞系构建成功，该敲除细胞系中sTRIM56基因编码区第929～2 120位1 192个碱基缺失，未检测到sTRIM56...  相似文献