酶法制备大豆蛋白成骨活性肽   总被引：1，自引：0，他引：1  

李宇  汪芳  翁泽斌  宋海昭  沈新春 《中国农业科学》2021,54(13):2885-2894

【目的】探究从大豆分离蛋白双酶分步酶解产物中分离促成骨细胞增殖肽的工艺,为大豆产品的开发提供参考。【方法】以促成骨细胞增殖活性作为测定指标,选用木瓜蛋白酶酶解大豆分离蛋白（SPI）,采用MTT法检测不同浓度的木瓜蛋白酶酶解产物对成骨细胞的促增殖活性。采用pH-Stat法检测水解时间为1、2、3、4、5和6 h的木瓜蛋白酶酶解产物的水解度,并检测相应水解时间的酶解产物对成骨细胞的促增殖活性。然后分别采用截留分子量为30 kD和10 kD两种超滤膜对活性较高的酶解产物进行超滤,并测定各超滤组分对成骨细胞的促增殖活性。再将具有较高促成骨细胞增殖活性的超滤组分分别在0.5、1、1.5、2和2.5 h进行碱性蛋白酶酶解,并检测相应水解时间的酶解产物对成骨细胞的促增殖活性。然后选用交联葡聚糖（Sephadex G-15）对具有较高促成骨细胞增殖活性的酶解产物进行分离,并检测各分离组分对成骨细胞的促增殖活性。最后,对各分离组分进行氨基酸分析,并采用质谱（ESI-TOF MS/MS）对最高促成骨细胞增殖活性的分离组分进行结构鉴定,并筛选出具有较强促成骨细胞增殖的大豆活性肽。【结果】在浓度为200 μg·mL ^-1时,木瓜蛋白酶酶解物对成骨细胞的促增殖活性随着酶解时间的增加逐渐增强,当酶解时间为5 h时达到最高促增殖活性（（118.24±2.73）%）。木瓜蛋白酶酶解产物经超滤分离、碱性蛋白酶酶解和凝胶过滤色谱分离后,对各分离组分进行氨基酸分析并筛选得到对成骨细胞具有最强增殖活性的组分F3,该组分的成骨细胞增殖率为（125.80±2.94）%,且F3中丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸等疏水性氨基酸以及芳香族氨基酸和必需氨基酸的含量明显高于其他组分。进一步通过质谱鉴定出F3主要由10个肽段组成。其中,DAMDGWFRL、GQTPLFPR、ADFYNPK、KDWYDIK的疏水性氨基酸、芳香族氨基酸以及必需氨基酸占比较高。对上述4个肽段进行活性测定,发现GQTPLFPR的促成骨细胞增殖活性最强,在浓度为100 μmol·L^-1时,其成骨细胞增殖率为（129.11±3.12）%。【结论】采用双酶分步酶解结合超滤和凝胶过滤色谱等蛋白分离纯化技术,从大豆分离蛋白中分离纯化出了具有较强促成骨细胞增殖活性的多肽,为促成骨细胞增殖活性肽的制备和应用提供了技术参考。  相似文献   

庄浪县蚕豆全膜垄播栽培技术要点   总被引：5，自引：4，他引：1  

李宇 《甘肃农业科技》2016,(10):80-81

从选地整地、选用良种、种子处理、重施基肥、起垄覆膜、播种、田间管理、病虫害防治、收获贮藏等方面总结了庄浪县高寒阴湿区蚕豆全膜通用模式高产栽培技术要点。  相似文献   

三种肥料增效剂复配对樱桃番茄生长和品质的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

任毛飞  王吉庆  李宇  周燕  杨丽 《北方园艺》2016,(19):192-195

以"金玲珑"番茄品种为试材,研究了复硝酚钠、DA-6、α-萘乙酸钠3种肥料增效剂复配后结合水肥一体化对连栋温室樱桃番茄生长和果实品质的影响。结果表明:3种肥料增效剂复配结合水肥一体施用,各处理与对照相比,均能促进樱桃番茄的株高,尤其是在生长前期,其中8mg·L~(-1)复硝酚钠+4mg·L~(-1)α-萘乙酸钠的处理对株高促进作用最明显,5mg·L~(-1) DA-6+8mg·L~(-1)复硝酚钠的处理次之。8mg·L~(-1)复硝酚钠+4mg·L~(-1)α-萘乙酸钠的处理对樱桃番茄的基部茎粗有明显促进作用,对樱桃番茄坐果数、坐果率、单果质量的影响差异性较小,对产量没有影响。各处理对樱桃番茄的维生素C含量有明显的增加,其中5mg·L~(-1)DA-6+4mg·L~(-1)α-萘乙酸钠,5mg·L~(-1)DA-6+8mg·L~(-1)复硝酚钠,8mg·L~(-1)复硝酚钠+4mg·L~(-1)α-萘乙酸钠相比较对照分别提高35%、119%、139%。  相似文献   

鸡大肠杆菌病的诊治     

李宇 《畜禽业》2011,(8)

<正>1发病情况2010年5月10日,某养鸡户购入蛋鸡雏2000只,次日出现脐炎,死亡率7%,用环丙沙星治疗得以控制。在30日龄后又开始发病,怕冷,食欲不振,每天死亡10～20只,用环丙沙星治疗效  相似文献   

苹果桉组织培养技术探讨     

刘辉  陈家龙  李宇  叶朝军  朱祝军 《浙江农业科学》2011,(6):1286-1288

以苹果桉为试材,研究了外植体灭菌方法,探讨了基本培养基种类和激素组合对苹果桉茎段腋芽诱导、增殖及生根的影响。结果表明,用于组织培养的外植体以采用0.1%HgCl2溶液灭菌10 min,诱导腋芽萌发采用MS＋0.5 mg.L-1的6-BA和0.1 mg.L-1NAA组合,增殖培养若添加6-BA浓度以1.0 mg.L-1为宜,添加1.0 mg.L-1NAA时,小苗可快速生根,且不会产生愈伤组织。  相似文献   

对兔沙门氏菌病诊治技术的思考     

李宇 《新农村(黑龙江)》2011,(15)

文章结合实际论述了兔沙门氏菌病的病原传播规律,症状特点,剖检变化,实验室诊断和防治的基本知识,给出了早期如何加强预防的相关方案,对临床常用效果明显的药物进行了特别介绍和阐述,对其它地区养兔场、户治疗该病具有较好的参考价值.  相似文献   

中国男篮在二十五届亚锦赛中的表现对篮球教学的启示     

宛宪峰  刘新刚  李宇 《山东农业教育》2010,(1):41-42

对中国男篮在二十五届亚锦赛中的表现进行总结，剖析存在的问题，并有针对性地提出在篮球教学方面的建议。  相似文献   

典型农牧区现代农业发展思路研究——以内蒙古包头市土默特右旗为例          下载免费PDF全文

程昊  董锁成  李宇  李世峰 《农学学报》2015,5(7):126-131

中国农业正处于由传统农业向现代农业转变的关键时期。发展现代农业,是解决"三农"问题的根本出路。农牧交错区是环境变化敏感、生态环境脆弱的区域,也是国家农业发展和治理的重点区域。内蒙古自治区土默特右旗(简称土右旗)是典型的农牧地区。通过对土右旗基础现状的分析,总结现代农业发展的优势、劣势、机遇、挑战,研究现代农业发展的核心战略问题,提出土右旗现代农业发展思路,进而归纳出农牧区现代农业发展的整体思路,为中国农牧地区的可持续发展提供理论借鉴。  相似文献   

水稻叶部一种植物线虫的形态和分子鉴定     

夏艳辉  胡瑶君  孙梦茹  郝鹏辉  毕亚宁  李宇  李洪连  王珂 《河南农业大学学报》2022,(3):420-428

【目的】旨在明确河南省开封市祥符区部分水稻长势弱,叶尖表现灰白干枯、扭曲干尖等症状的病因,为进一步研究水稻上该病害的发生危害规律和防治提供科学依据。【方法】通过改良贝尔曼漏斗法和直接浸泡法分离采集水稻地上部的线虫,挑取单条雌虫在胡萝卜愈伤组织上进行单雌扩繁,采用形态学和分子生物学相结合的方法对纯化培养的水稻线虫KF-1群体进行了种类鉴定。【结果】形态学结果表明待鉴定线虫与水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi Christie, 1942)的形态特征较一致。rDNA的ITS和28S rRNA基因中D2-D3区序列比对结果表明,待鉴定线虫与GenBank中水稻干尖线虫序列具有高度相似性,最高分别达到100%和98.98%。基于rDNA-ITS和28S D2-D3区序列构建的系统进化树结果与已知鉴定结果相一致,待鉴定线虫与其他水稻干尖种群位于同一高度支持的分支。【结论】通过形态和分子鉴定,确定了造成河南开封市祥符区部分水稻叶尖干枯的病原为水稻干尖线虫,这是河南东部地区首次发现该线虫的发生危害,应采取相应措施避免该线虫病害的进一步扩散蔓延。  相似文献   

豫北夏玉米根际2种根腐线虫的形态和分子鉴定     

胡瑶君  徐菲菲  任航  夏艳辉  赵子尧  李宇  李洪连  袁虹霞  王珂 《中国农业大学学报》2022,27(7):26-34

为明确采集于豫北地区鹤壁市和焦作市玉米根际土壤样品中根腐线虫的种类,采用改良的贝尔曼漏斗法分离土壤样品中的根腐线虫,通过光学显微镜进行形态鉴定,并基于rDNA 28S D2-D3区和rDNA-ITS区的序列对采集的根腐线虫进行分子鉴定。形态学与分子鉴定的结果均表明:来源于鹤壁市的HB-1种群为斯克里布纳短体线虫(Pratylenchus scribneri),来源于焦作市的JZ-257种群为落选短体线虫(P. neglectus)。基于rDNA 28S D2-D3区和rDNA-ITS区序列构建的系统进化树结果表明:供试2种短体线虫分别与GenBank数据库中其它斯克里布纳短体线虫和落选短体线虫处于同一高度支持的分支。本研究结果为玉米根腐线虫病害的识别与防控提供了科学依据。  相似文献