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21.
为建立番茄黑环病毒(Tomato black ring virus,TBRV)的液相芯片检测技术,对GenBank中的TBRV核苷酸序列进行分析,设计其特异性探针并用生物素标记。探针偶联荧光编码微球后与TBRV的RT-PCR产物进行杂交,用液相芯片检测仪检测荧光信号。结果表明:建立的方法具有良好的特异性,能够有效区分侵染马铃薯的TBRV、马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)、马铃薯A病毒(PVA)及番茄斑萎病毒(TSWV);检测灵敏度约为1pg/μL总RNA,与常规RT-PCR灵敏度相当。实际样品检测结果表明该方法可用于TBRV的日常检测。  相似文献   
22.
[目的]选育鲜食、加工兼用型南瓜新品种,为广西南瓜生产提供良种选择和技术支撑.[方法]以一品南瓜杂交种一代经过9代连续自交定向分离的自交系YP为母本、日本甜粟杂交绿白皮色南瓜材料经8代自交提纯的高世代自交系RT为父本进行配组杂交,并进行品种比较试验和生产试验示范.[结果]选育成的鲜食加工兼用南瓜“新品一号”,果实扁圆形,单瓜重1.00~2.00 kg,果皮墨绿色布有浅色小点,果肉橙黄色,果肉厚2.0~3.0 cm,含水量少,淀粉含量18.0%,总糖含量3.01%,口感粉甜带板栗风味;果肉硬韧,耐贮运;从播种至采收嫩瓜仅需65 d,老熟瓜需85 d,品种比较试验平均产量24564.0 kg/ha,生产试验平均产量22440.0~25299.0 kg/ha.[结论]“新品一号”南瓜产量和品质等综合性状突出,可作为鲜食、加工兼用型南瓜新品种在广西南瓜种植区作冬春季大田露地提早栽培推广品种.  相似文献   
23.
在分离克隆抗白叶枯病基因Xa23研究中获得大量转基因水稻材料。为了系统研究转Xa23基因水稻的抗病稳定性和遗传模式, 本文通过逐株进行抗白叶枯病接种鉴定、PCR和Southern blot分子检测, 对一批转Xa23基因水稻植株进行了T0代到T2代的跟踪分析。结果表明, Xa23基因的整合和表达, 使感病受体品种牡丹江8号获得抗病性。由于Xa23基因插入受体基因组的位点不同, 同是单拷贝插入的转基因T0代抗病植株, 其抗病程度有明显差异。T0代植株的抗病程度, 可以准确、稳定地遗传到T1代和T2代。单拷贝转基因植株分离群体的抗感植株分离比接近3∶1, 表明转Xa23基因遵循孟德尔单基因遗传模式。已获得2个纯合的单拷贝转基因抗病株系, 它们的抗病程度稍有差别, 将用于外源基因插入位置效应分析和杂交稻抗病育种。  相似文献   
24.
南方菜豆花叶病毒(south bean mosaic virus,SBMV)和烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus,TRSV)是我国重要的进境检疫性有害生物,两种病毒均为种传病毒,可随大豆种子实现远距离传播.本研究以这两种病毒的大豆病种子为试材,先用胶体金免疫层析试纸条(GICA)检测,将检测完病毒后的胶体金免疫层析试纸条上的T线和C线剪下,再用RT-PCR的方法将T线和C线上捕获的病毒直接进行扩增,这种将血清学与分子生物学相结合起来所建立的GICA-RT-PCR检测方法,省去了烦琐的总RNA提取的环节,简化了病毒检测的步骤,提高了检测的灵敏度.  相似文献   
25.
烟草环斑病毒无侵染性组分的分离   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用10%~40%的蔗糖梯度离心,将烟草环斑病毒无侵染性的病毒组分分开,获得了具抗原性但无侵染性的病毒外壳,可作为酶联免疫吸附试验中的阳性对照,避免了检疫危险性的病毒扩散到环境中。  相似文献   
26.
27.
选用显斑驳症状的兼云香、赤线金钩和叶片黄化的泉乡万圣和泉乡冲天等共4个品种的葡萄母株,龙茎脱毒获得的茎组培苗用生物学和血清学方法检测葡萄母株和组培苗的带毒情况。鉴定结果表明,兼云香母株(1A)带有葡萄B病毒,其组培苗未能脱去该病毒。赤线金钩母株(2A)带有番茄不孕病毒(TAV)和葡萄B病毒(CVB)复合侵染,其组培苗脱去了TAV病毒还带有CVB病毒。万乡泉圣母株(3A)和泉乡冲天母株(4A)带有菊花B病毒,其组培苗均脱去了此病毒,是真正的脱毒组培苗。  相似文献   
28.
利用血清学技术开发的酶联诊断试剂盒 ,由于快速灵敏 ,操作简便 ,可进行大量样品的检测 ,比较好地满足了生产上需要 ,具有广阔的应用前景。由于国内尚没有成熟的植物病毒诊断试剂盒供应者 ,缺乏可靠的产品 ,因而限制了植物病毒诊断在国内的应用和发展。一旦需要时 ,主要是依赖国外进口 ,由于价格昂贵 ,采购不便 ,不能及时供应 ,在国内推广尚有一定的困难。另外 ,国外有些试剂盒在技术上有一定的缺陷 ,造成一些假阳性反应的出现 ,其中在阳性对照和阴性对照处理上不很成熟 ,对于危险性病毒的阳性对照处理不当 ,还易造成危险性病毒的扩散 ,而阴…  相似文献   
29.
使用柠檬酸三钠还原法制备25nm粒径的胶体金颗粒,在pH7.6,蛋白用量13μg/mL条件下,制备形成稳定胶体金蛋白复合物;使用微定量喷头在硝酸纤维素膜上喷好病毒检测线和质控线,组装制成免疫层析检测试纸条。结果表明经过条件优化后制备的南瓜花叶病毒试纸条特异性好,可在10min内检测出结果,且对南瓜花叶病毒阳性材料的检测灵敏度可达到稀释104倍。  相似文献   
30.
半巢式-RT-Realtime PCR检测李痘病毒   总被引:1,自引:0,他引:1  
李痘病毒(Plum pox virus,PPV)是我国重要的植物检疫性有害生物。本研究根据PPV中CP基因(coat protein gene)的保守序列,设计了3条PCR引物和1条TaqMan探针,建立了半巢式-RT-RealtimePCR检测PPV的方法。该方法有机地结合了巢式PCR和实时荧光PCR技术;3条引物形成的2套PCR体系相互验证,有效提高了结果的准确性;荧光探针有效提高了检测的灵敏度。实验结果表明,本方法准确、灵敏、简便、快速,检出低限可达37fg/μL植物总RNA。  相似文献   
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