双香豆素对猪繁殖与呼吸综合征病毒的体外抑制作用     

李倬伟  王方  王君君  陈祯涵  李焕荣  周双海  刘雪威 《畜牧兽医学报》2023,(3):1160-1168

为探究双香豆素(DIC)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)增殖的影响,本研究首先通过CCK-8法检测DIC对Marc-145细胞的细胞毒性,并计算其半数毒性浓度(CC₅₀);进而使用荧光定量PCR和Western blot检测DIC对PRRSV增殖水平的影响;通过不同给药方式处理细胞进一步探究DIC针对的PRRSV增殖阶段。结果表明,DIC对Marc-145细胞的细胞毒性CC₅₀为96.11μmol·L^-1,并在浓度为25μmol·L^-1时即表现出明显的抗PRRSV活性;DIC可以呈剂量依赖性地抑制不同时间和不同滴度的PRRSV增殖。DIC对PRRSV感染周期的吸附、入胞和释放阶段无影响,但是可明显抑制PRRSV的复制阶段。本研究证实DIC以较低浓度在Marc-145细胞中表现出明显的抗PRRSV活性,并主要针对PRRSV的复制阶段。本研究提示双香豆素具备开发成临床抗病毒药物或添加剂的潜力,为新的PRRSV抗病毒药物的研发提供理论依据。  相似文献   

基于网络药理与分子对接研究桑叶活性成分抗炎的作用机制     

武建文  范秋雨  李焕荣  王秀敏 《中国畜牧杂志》2023,(6):298-306

本文通过网络药理和分子对接方法,探索桑叶在禽类抗炎中的功效及其机制。利用网络药理学获取桑叶与家禽炎症的共同靶点,使用David数据库进行基因本体（GO）和KEGG分析确定桑叶的有效成分。利用分子对接技术对桑叶有效成分与关键靶点进行对接验证。结果表明：桑叶中具有抗炎活性的活性成分有12种,如槲皮素、β-谷甾醇、山奈酚、叶酸等;抗炎靶点共87个,包括核内转录因子基因（JUN）、白介素6基因（IL6）、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、酪氨酸蛋白激酶基因（SRC）、干扰素基因（IFNG）等,涉及MAPK信号通路、C型凝集素受体通路、Toll样受体信号通路等与禽类抗炎相关的信号通路。分子对接结果显示,桑叶中的有效成分槲皮素、β-谷甾醇、山奈酚等与受体蛋白IL-6、TNF-α等具有较强的结合能。由此可见,桑叶中多种有效成分通过多靶点、多通络协同作用于禽类炎症,体现了桑叶良好的抗炎效果,可为今后的研究提供一定的科学依据。  相似文献   

棉籽油浸提工艺的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

李焕荣  武运  张凤  朱正兰 《新疆农业大学学报》2008,31(3):51-53

以棉仁为原料,采用溶剂法提取棉籽油,以正己烷为浸提溶剂,通过单因素试验和正交试验研究了料液比、浸提时间、浸提温度等工艺参数对棉籽油提取率的影响,得出了棉籽油的最佳提取条件是:料液比为1:4.0,浸提温度60℃,浸提时间为180min.并对毛油中的游离棉酚含量进行了分析,游离棉酚均小于0.02%.  相似文献   

杏仁油提取工艺条件的研究   总被引：5，自引：4，他引：1  

李焕荣  古丽娜孜  李媛媛 《新疆农业科学》2008,45(4):712

浸出法制油粕中含残油少、粕的质量高、可做为提取蛋白质的优良原料.苦杏仁中脂肪含量为35;～50;,蛋白质含量高,油粕可以作为提取优质蛋白质的原料.试验以苦杏仁为原料,采用溶剂法提取杏仁油,通过对比无水乙醇、无水乙醚、正己烷3种溶剂的提取率,选择了正己烷为提取溶剂,采用单因素和正交试验研究了料液比、浸提时间、浸提温度、浸提次数等工艺参数对杏仁油提取率的影响,杏仁油的最佳提取条件为:料液比1∶3.5,浸提温度60 ℃,浸提时间80 min,浸提2次.  相似文献   

猪传染性胃肠炎病毒S基因A抗原位点的克隆及原核表达载体的构建     

张春叶  沈红  张莉  李焕荣  路苹 《勤云标准版测试》2008,(7)

 【研究目的】对猪传染性胃肠炎病毒S基因A抗原位点进行克隆和原核表达载体的构建。【方法】参考GenBank上公布的TGEV S基因A抗原位点序列,应用Primer6.0设计一对含酶切位点的引物,用于RT-PCR扩增A抗原位点目的片段,将扩增产物连接于paesy-T克隆载体上构建克隆载体,用EcoR I和Xhol I对表达载体PET-32a（+）和重组质粒进行酶切,将酶切产物亚克隆至PET-32a（+）多克隆位点上,连接、转化至BL21(DE3),构建A位点的原核表达载体,并对阳性重组质粒进行酶切、PCR和测序鉴定。【结果】所扩增的目的片段的大小为534bp,与原核表达载体连接后,经核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明,该基因与其它猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性,说明成功地构建了TGEV S 基因A抗原位点的原核表达载体。【结论】TGEV S 基因A抗原位点原核表达载体的成功构建,填补了中国国内单独针对此位点进行研究的空白,也为TGEV诊断方法的建立提供良好的技术基础。  相似文献   

高低效价伪狂犬病疫苗免疫效果的比较     

方伟  杨倩  杨红杰  任国鑫  李焕荣  张永红  周双海 《猪业科学》2021,38(12):72-73

伪狂犬病是由伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）引起的一种危害养猪业的重要疫病，PRV-gE基因缺失疫苗接种是其有效预防措施，疫苗免疫虽能阻止临床发病，但难以完全阻止野毒感染。2010年以来，猪的伪狂犬病在国内出现了明显反弹，部分猪场的PRV野毒感染率明显上升，疫苗效价不足可能是其重要原因之一。现有多种猪伪狂犬病商品疫苗，不同商品疫苗标识的每头份剂量之间存在明显差异。鉴于疫苗免疫效果通常与其免疫剂量或效价相关，因此，比较效价差异明显的伪狂犬病疫苗的临床免疫效果无疑具有重要临床价值。  相似文献   

PCV2感染的IPEC-J2的IL-6/TGF-β/IL-12变化     

谷可伟  石凤阳  马岩  李焕荣 《兽医导刊》2020,(4):204-205

【目的】探讨猪圆环病毒2型(PCV2)感染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)后,IPEC-J2中病毒载量和部分炎性因子的变化。【方法】病毒感染IPEC-J2细胞,于不同时间收取样品,提取总DNA,用荧光定量PCR方法测定病毒载量变化;提取总RNA反转录,用荧光定量PCR方法测定IL-6、TGF-β1、IL-12的含量变化。【结果】病毒载量随时间持续增高,且在72h达到顶峰。IL-6在48h显示明显上调,24h下调;TGF-β1在12h和72h均明显上调;IL-12在不同时间点变化不大。【结论】PCV2可在IPEC-J2中增殖,上调IPEC-J2中IL-6和TGF-β1的表达。该结论为进一步研究PCV2的肠道免疫致病机制提供研究数据。  相似文献   

内皮源IL-8对PCV2感染猪血管内皮细胞迁移的影响     

何乐  邹战明  乔金增  周双海  李焕荣 《北京农学院学报》2015,30(3):40-43

本研究通过建立PIEC划痕创伤模型,设细胞对照组、接毒组、IL-8抗体处理细胞对照组和IL-8抗体处理接毒组,观察内皮细胞的迁移率,同时用ELISA检测细胞上清中内皮细胞生长因子VEGF、碱性成纤维细胞生长因子bFGF和NO的含量,以探索猪圆环病毒2型(PCV2)对猪血管内皮细胞迁移方面的影响因素。结果显示,接毒组细胞迁移率、上清中bFGF、VEGF含量显著高于对照组;抗体处理细胞对照组上清中bFGF、VEGF、NO含量显著低于细胞对照组;抗体处理对照组和抗体处理接毒组迁移率、上清中bFGF、VEGF、NO显著低于接毒组。以上结果表明,PCV2感染诱导分泌的IL-8可调控内皮细胞bFGF、VEGF、NO分泌而影响猪髋动脉内皮细胞的迁移。  相似文献   

毒害艾美耳球虫早熟株对鸡免疫效果的评价     

马维彩  何学柏  孙英健  李本胜  张彩荣  芮国红  李焕荣  李秋明 《北京农学院学报》2022,37(1):91-96

[目的]探讨毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)早熟株对鸡的免疫效果,为获得安全有效的鸡球虫疫苗株提供试验参考依据.[方法]取4日龄健康、体质量50～70 g鸡随机分为4组,分别为对照组、盐酸氨丙啉添加组、一免组和二免组,每组50只鸡地面饲养,试验期81 d.对照组、免疫组(免疫组包括一免组和二免组)鸡饲喂基础日粮,盐酸氨丙啉添加组鸡按照药物说明全程基础日粮加盐酸氨丙啉拌服.一免组鸡4日龄一免,剂量1 000个/只毒害艾美耳球虫早熟株孢子化卵囊;二免组鸡53日龄二免,剂量200个/只毒害艾美耳球虫早熟株孢子化卵囊.鸡25日龄、53日龄、74日龄时从地面饲养的各组随机抽取6只鸡移到笼上饲养,同时设置红对照组(鸡不免疫不喂药仅攻毒).笼养鸡除对照组外,其他组鸡均攻毒,攻毒方法为逐只鸡经口接种毒害艾美耳球虫亲本株(10X104个孢子化卵囊/只).肉眼观察鸡临床症状,测定鸡平均相对体增质量、小肠病变记分、小肠病变记分减少率、存活率、卵囊减少率与抗球虫指数等指标.[结果]免疫鸡攻毒后,临床观察对照组鸡精神状态良好,未出现任何异常症状;免疫组与红对照组相比精神状态良好、血便减少.不同日龄鸡(25日龄、53日龄和74日龄)攻毒后第7天,盐酸氨丙啉添加组和免疫组鸡相对体增质量均明显低于对照组但极显著高于红对照组且二免组高于一免组.免疫组鸡小肠平均病变记分均低于红对照组,小肠病变记分减少率高于红对照组,其中二免组不同日龄攻毒后鸡小肠平均病变记分均低于一免组,且74日龄鸡攻毒后小肠病变记分减少率最高.红对照组不同日龄鸡卵囊数极显著高于盐酸氨丙啉添加组和免疫组,其中免疫组53日龄鸡和74日龄鸡攻毒后卵囊数均显著高于盐酸氨丙啉添加组,卵囊减少率低于盐酸氨丙啉添加组,且二免组74日 龄鸡攻毒后卵囊减少率高达90％.免疫组不同日龄鸡抗球虫指数极显著高于红对照组,二免组不同日龄鸡抗球虫指数均高于145且高于一免组,即二免组鸡抗球虫效果达到中效水平.[结论]毒害艾美耳球虫早熟株2次免疫对鸡具有良好的保护效果,且对鸡生长发育的影响较小.  相似文献   

嗜水气单胞菌胞外蛋白酶ECPase54的纯化及特性分析   总被引：31，自引：5，他引：31  

李焕荣  陈怀青 《南京农业大学学报》1996,19(3):88-94

嗜水气单胞菌（Ａｈ）Ｊ－１株的液体培养物上清在５６℃或与乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）或丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟（ＰＭＳＦ）作用，其胞外蛋白酶（ＥＣＰａｓｅ）的活力有不同程度的下降，将酪蛋白掺入丙烯酰胺聚合后，加Ａｈ－Ｊ－１上清作ＳＤＳ－ＰＡＧＥ３７℃原位消化，染色，显示上清中存在至少５种分子量不同的蛋白酶，ＡｈＪ－１株的培养上清经硫酸铵沉淀，ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２０  相似文献