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61.
3个江西省地方猪种SLA-DQB基因外显子2多态性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
采用PCR-RFLP法对3个江西省地方猪种(乐平花猪、修水杭猪和万安花猪)的SLA-DQB基因外显子2的PCR产物进行多态性分析。结果表明:3个猪种SLA-DQB基因外显子2多态性非常丰富,通过限制性内切酶HaeⅢ和RsaⅠ酶切后,均分出3种RFLP带型,共有10种组合带型,其中修水杭猪仅检测到4种,乐平花猪和万安花猪中均检测到6种。2χ适合性检验表明,3个猪种SLA-DQB基因外显子2的2个酶切位点均达到了Hardy-Weinberg平衡状态。 相似文献
62.
文昌鸡GHR基因内含子2和5位点对文昌鸡繁殖性能的遗传效应研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用PCR-RFLP技术检测了文昌鸡GHR基因内含子2和5的多态性,并采用SPSS程序分析了GHR基因内含子2和5的多态性对文昌鸡繁殖性能的影响。结果表明:GHR基因内含子2等位基因C1、C2频率分别为0.06和0.94,内含子5等位基因D1和D2基因频率分别为0.19和0.81。GHR基因内含子2多态性与产蛋性状中的双黄蛋产量相关显著。经两两比较发现,GHR C1C1基因型个体比GHR C2C2基因型个体双黄蛋产量高0.70个(P<0.05),加性效应值为0.208。 相似文献
63.
64.
65.
发育至第19期和第28期的鸡胚性腺原始生殖细胞(PGCs)分离提纯后,在DMEM中添加冷冻保护剂DMSO(二甲基亚砜)、EG(乙二醇)、蔗糖进行超低温冷冻保存,比较冷冻保护剂在单独或联合使用条件下对PGCs的冷冻保护效果,复苏后台盼蓝染色测定细胞存活率,体外接种培养、传代。结果表明:(1)第19期PGCs冷冻保存中,10%EG+10%FBS+0.1mol/L。蔗糖条件下细胞存活率最高为(92.20±2.18)%,且与10%DMSO+10%FBS的存活率差异显著(P〈0.05),其余各冷冻保护液间存活率差异不显著;第28期PGCs冷冻保存中,5%DMsO+5%EG+10%FBS+0.1mol/L。蔗糖条件下细胞存活率最高为(92.41±2.82)%,但各冷冻保护液间存活率差异均不显著(P〉0.05)。(2)解冻后体外培养的PGCs,在饲养层和3种细胞因子(I。IF、SCF、bFGF)的共同作用下,可持续增殖,传至第3代的PGCs,PAS染色、AKP染色均呈阳性并保持完整的二倍体核型,仍处于未分化状态。 相似文献
66.
鸡原始生殖细胞迁移和聚集规律的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
研究表明 :鸡的原始生殖细胞 ( PGCs)起源于孵化前胚盘的明区 ,而后逐渐迁移至胚体的头前侧部的生殖新月区 ,并于孵化约 2 2 h时 ,大量聚集于此 ( 3 1~ 3 8个 )。随着鸡胚内、外血管的发育 ,PGCs则进入血管中 ,并顺着血管于孵化约 3 6h ( 1 0期 )时首次迁移到胚体上。孵化至 4 4~ 52 h ( 1 1~ 1 3期 )时聚集 (约 1 0 5个 )于胚体的心脏、大血管及头部间充质中。最后 ,PGCs于孵化 62 h( 1 7期 )时大量迁移至胚体后端生殖嵴处 ,迁移过程一直可持续到孵育第 4天。孵化 5d时 ,迁移入生殖嵴的 PGCs与生殖嵴一起共同组成了未分化的性腺 相似文献
67.
68.
原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)作为配子的原始祖细胞,参与胚胎生殖细胞的发育过程。类固醇激素通路中3β羟基类固醇脱氢酶2(3β-hydroxysteroid dehydrogenase 2,Hsd3β2)能促进细胞分化,但其对原始生殖细胞的形成具体调控机制还不得而知。本研究旨在通过构建类固醇激素合成过程中关键基因Hsd3β2的短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)干扰载体并研究其对鸡(Gallus gallus)胚胎干细胞分化为原始生殖细胞的影响。通过慢病毒包装Hsd3β2感染鸡胚胎干细胞并进行RNA干扰(RNA interference,RNAi)诱导,分别于2、4、6 d观察细胞形态变化并收集细胞样品,q RT-PCR检测Hsd3β2、生殖标记基因鸡Vasa基因同系物(chicken vasa homologue,Cvh)、鸡KIT原癌基因受体酪氨酸激酶(chicken KIT proto-oncogene receptor tyrosine kinase,C-kit)及甾类激素合成信号通路下游基因细胞色素P450亚酶(cytochrome P450 subenzyme,Cyp1a1)、葡萄糖醛酸转移酶1A1(UDP glucuronosyltransferase family 1member A1,Ugt1a1)和17β羟基类固醇脱氢酶7(17beta-hydroxysteroid dehydrogenase7,Hsd17b7)表达;流式细胞检测诱导产生类胚体阳性率;在鸡胚孵化过程中鸡胚注射慢病毒干扰载体,孵化4.5 d后收集生殖嵴,q RT-PCR检测Cvh、C-kit及下游基因Cyp1a1、Ugt1a1和Hsd17b7表达;流式细胞分析原始生殖细胞生成效率。本实验成功构建sh-Hsd3β2慢病毒载体,挽救实验表明过表达Hsd3β2能使sh RNA引起的基因表达下降回升;在体外诱导过程和鸡胚孵化过程中,q RT-PCR结果表明干扰Hsd3β2后,甾类激素合成信号通路中的下游基因的表达显著下调(P0.01);在RA诱导实验过程中,随诱导时间推进,类胚体数量逐渐增加。Hsd3β2抑制后,类胚体形成数量减少。Cvh、C-kit在诱导过程中上调表达,但Hsd3β2干扰后,其表达显著降低(P0.01),流式细胞分析表明干扰Hsd3β2后,诱导4d后产生类胚体阳性细胞(3.27±0.19)%显著低于对照组(7.39±0.09)%;体内实验结果表明干扰Hsd3β2后,Cvh、C-kit表达显著降低(P0.01),生殖细胞数量显著减少。本研究结果表明Hsd3β2能通过甾类激素合成信号通路促进原始生殖细胞的形成,为研究该通路对原始生殖细胞形成具体机制提供理论基础。 相似文献
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