大豆球蛋白通过 p38丝裂原活化蛋白激酶/c﹣Jun氨基端激酶信号通路引起猪小肠上皮细胞损伤     

彭成璐  张瑜  舒迎霜  贺濛初  夏晓冬  冯士彬  李玉  王希春  李锦春  吴金节 《动物营养学报》2019,31(4)

通过体外培养猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),研究不同浓度大豆球蛋白(11S)对猪小肠上皮细胞的影响。试验分为6组:A、B、C、D、E、F组,其中A组为对照组,其余各组分别在培养液中添加1、5、10、5、5 mg/mL的11S,并且在E、F组分别添加1μmol/L的c-Jun氨基端激酶(JNK)和p38抑制剂。培养24 h后,用CCK-8法检测细胞存活率;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞一氧化氮(NO)、5-羟色胺(5-HT)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)含量;Western blot检测细胞磷酸化JNK(p-JNK)、磷酸化p38(p-p38)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达量;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞Bcl-2/Bcl-xL相关凋亡蛋白(Bad)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3) mRNA相对表达量。结果表明:1)与A组相比,C、D组细胞存活率极显著降低(P0.01); E、F组细胞存活率显著或极显著高于C组(P0.05或P0.01)。2)与A组相比,C、D组NO、5-HT、IL-6、IL-10含量均极显著增加(P0.01);与C组相比,E、F组NO、5-HT、IL-6、IL-10含量显著或极显著降低(P 0.05或P 0.01)。3)与A组相比,C、D组p-JNK、p-p38蛋白表达量显著或极显著增加(P 0. 05或P 0. 05),C、D组Bcl-2蛋白表达量极显著降低(P0.01);与C组相比,E、F组p-JNK、p-p38蛋白表达量显著或极显著降低(P0.05或P0.01),E、F组Bcl-2蛋白表达量显著或极显著增加(P0.05或P0.01)。4)与A组相比,B、C和D组Bcl-2/Bax极显著降低(P0.01),C、D组Bax/Bcl-xL、Bad和caspase-3 mRNA相对表达量显著或极显著增加(P0.05或P0.01);与C组相比,E、F组Bcl-2/Bax极显著增加(P0.01),E、F组Bax/Bcl-xL和caspase-3 mRNA相对表达量极显著降低(P 0.01),F组Bad mRNA相对表达量极显著降低(P0.01)。结果说明,11S通过p38 MAPK/JNK信号通路引起猪小肠上皮细胞损伤。  相似文献   

中药复方多糖对小鼠免疫功能的影响     

张自广  石念进  王希春  李锦春  吴金节 《畜牧与兽医》2012,44(2):81-85

本文旨在通过超声细胞粉碎法提取中药复方中的多糖,并研究其对小鼠免疫功能的影响。选取200只体重相近的小鼠随机分成5组,每组40只,分别灌服生理盐水,复方中药水煎剂和高、中、低3种浓度的中药复方多糖,0.3 mL/只,连续灌服7 d,于第8天处死,进行免疫器官指数、细胞免疫、体液免疫和单核巨噬细胞吞噬指标的测定。结果显示:与生理盐水组和复方水煎剂组相比,中等浓度的复方多糖组小鼠的胸腺指数、淋巴细胞转化、血清溶血素含量、白介素-2和巨噬细胞吞噬功能均显著提高(P<0.05)。结果表明:中等浓度的中药复方多糖有显著增强小鼠免疫功能的作用。  相似文献   

7S β-伴大豆球蛋白通过NF-κB信号通路引起IPEC-J2细胞的炎性反应     

彭成璐  张瑜  丁雪东  李玉  冯士彬  王希春  李锦春  吴金节 《畜牧兽医学报》2019,(4):870-878

采用细胞体外培养技术,研究不同浓度7Sβ-伴大豆球蛋白对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)的影响。试验分为A、B、C、D、E、F 6组,其中A为对照组,其余各组中分别添加1、5、10、5、5 mg·mL^-1的β-伴大豆球蛋白,并且在E和F组分别添加1μmol·L^-1 NF-κB(PDTC)和iNOS(L-NAME)抑制剂。用CCK-8法检测各组细胞存活率,用ELISA法检测细胞NO、DAO、5-HT、IL-6和IL-10含量,用Western blot法检测细胞p-NF-κB p65、iNOS、COX-2的蛋白表达量,用qPCR法检测细胞NF-κB p65、IKKβ、iNOS、IKKα、COX-2 mRNA的相对转录量。结果显示:β-伴大豆球蛋白降低IPEC-J2细胞存活率,添加PDTC和L-NAME增高IPEC-J2细胞存活率,促进NO、DAO、5-HT和IL-6的分泌,并降低IL-10的分泌,同时增加p-NF-κB p65、iNOS、COX-2的蛋白表达量及NF-κB p65、IKKβ、iNOS、IKKα、COX-2 mRNA的相对转录量,添加PDTC和L-NAME后抑制了β-伴大豆球蛋白的作用。结果表明,β-伴大豆球蛋白引起IPEC-J2细胞损伤,随浓度增大损伤增加,PDTC和L-NAME可以降低β-伴大豆球蛋白对细胞的作用。  相似文献   

养鸡业饲养模式与动物福利现状的调查     

陈凤芹  孙道明  李锦春  岳志霞 《中国家禽》2007,29(22):38-40

本文对合肥市周边大杨镇、双墩乡和肥西南岗地区养鸡业的养鸡模式和动物福利现状进行调查,希望通过对比各种养鸡模式的优缺点,寻求一种既符合当地实际情况又能改善动物福利的养鸡模式.……  相似文献   

肉鸡肺动脉内皮细胞的体外培养和鉴定     

潘家强  孙卫东  李锦春  谭勋  王金勇  王小龙 《中国兽医学报》2007,27(1):70-73

分别采用组织贴块法和胶原酶消化法培养肉鸡肺动脉内皮细胞,并对其进行传代。采用形态学和凝血因子相关抗原免疫组化染色法对所培养的细胞进行鉴定。结果表明,2种方法均能够获取原代肉鸡肺动脉内皮细胞,采用贴块法培养2周左右可获得单层生长的细胞,而采用胶原酶消化法3~5d即可获得单层生长的细胞。原代肉鸡肺动脉内皮细胞在体外可传5~6代。倒置显微镜和HE染色观察培养细胞的形态符合血管内皮细胞的特征,因子抗原免疫组化染色结果呈阳性进一步证明培养的细胞是肺动脉内皮细胞。  相似文献   

肉仔鸡肾型传染性支气管炎的诊治研究     

周庆新  李锦春  雷彬 《现代畜牧兽医》2007,(8):33-34

鸡传染性支气管炎是由传染性支气管炎病毒（IBV）引起的危害养鸡业的重要传染病之一。该病的特点是病情复杂，血清型众多，又具有高度传染性，鸡群同时感染不同毒株或使用弱毒疫苗发生基因重组而不断变异，使IBV侵害鸡体的靶器官也发生了变化。IgnjatovicJ等用澳大利亚分离的25株IBV人工感染SPF鸡，比较了其致病性，发现12株肾致病型IBV，10株呼吸型IBV，3株混合致病型IBV，侵害肺、肾。为有效防制本病，我们对其病原进行了分离与鉴定。  相似文献   

11S通过NF-κB信号通路引起猪小肠上皮细胞损伤     

彭成璐  张瑜  丁雪东  李玉  冯士彬  王希春  李锦春  吴金节 《浙江农业学报》2019,31(3):384

通过体外培养猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),研究大豆球蛋白(11S)对猪小肠上皮细胞的影响。将IPEC-J2细胞分为6组[A(对照组)、B、C、D、E和F],各组中分别添加0、1、5、10、5、5 mg·mL^-1的11S,并且在E组和F组分别添加1 μmol·L^-1吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)和1 μmol·mL^-1 Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)。分别于8、16、24 h,用CCK-8法检测细胞存活率,用ELISA法检测细胞一氧化氮(NO)、二胺氧化酶(DAO)、5-羟色胺(5-HT)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)含量,用western blot法检测细胞p-NF-κB p65、iNOS、COX-2的蛋白表达量,用qPCR法检测细胞NF-κB p65、IKKβ、iNOS、IKKα、COX-2 mRNA的相对表达量。结果表明:11S可以降低猪小肠上皮细胞存活率,添加PDTC和L-NAME可以提高小肠上皮细胞存活率;11S可促进NO、DAO、5-HT和IL-6的分泌,降低IL-10的分泌,增加p-NF-κB p65、iNOS、COX-2的蛋白表达量及NF-κB p65、IKKβ、iNOS、IKKα、COX-2 mRNA的相对表达量,添加PDTC和L-NAME可抑制11S的作用。综上,11S可引起猪小肠上皮细胞损伤,随着11S浓度的增大,损伤程度增加,PDTC和L-NAME可以降低11S对细胞的损伤。  相似文献   

不同条件下蔗糖溶液对隐孢子虫卵囊分离纯化效果的比较     

刘维  李锦春  李培英  徐前明  李志明 《安徽农业科学》2010,38(31):17713-17714

[目的]探索以蔗糖溶液作为介质分离纯化隐孢子虫卵囊的最佳条件。[方法]以隐孢子虫感染阳性奶牛粪样为材料,设计5个蔗糖浓度、3个离心时间和3个离心速度进行隐孢子虫卵裳的分离纯化。[结果]蔗糖浓度为1：2．0和1：2．5时,分离出的卵囊总数极显著大于其他3组（P〈0．01）,其中1：2．5组卵囊平均数最大;不同离心时间分离出的卵囊总数在数量上差异均不显著（P〉0．05）,其中离心20min时卵囊平均数最大;不同离心速度分离出的卵囊总数的比较表明,3000r／min得到的卵囊数量最多。[结论]蔗糖浓度为1：2．5、离心速度为3000r／min、离心时间为20min是隐孢子虫卵囊分离纯化的最佳条件。  相似文献   

早期限饲对肉鸡血浆NO水平、红细胞比容和心脏指数的影响     

黄有才  潘家强  唐兆新  李锦春  谭勋  王小龙 《畜牧与兽医》2007,39(12):4-7

试验测定了常温和低温下限饲肉鸡和非限饲肉鸡体内一氧化氮(NO)含量、红细胞比容(PCV)和心脏指数的变化,以探讨早期限饲降低肉鸡肺动脉高压综合征(PHS)发病率的机理。试验结果显示低温下肉鸡的PCV值、心脏指数和PHS的发病率显著升高,NO水平在低温早期显著降低,然而随着低温时间的延长,低温处理组肉鸡的血浆NO水平反而代偿性升高。早期限饲显著降低了肉鸡生长早期的红细胞压积值,并显著降低了42日龄心脏指数和PHS的发病率。限饲鸡在限饲期间血浆NO水平显著降低,但其他阶段与非限饲鸡差异不显著。这提示早期限饲能够缓解肉鸡肺动脉高压和右心肥大的产生,其机理可能与NO和PCV改变所致的血流动力学变化有关。  相似文献   

间歇光照对肉鸡肺动脉高压综合征发病率及肺血管重构的影响   总被引：1，自引：1，他引：1  

李锦春  潘家强  谭勋  孙卫东  王金勇  黄国庆  王小龙 《中国农业科学》2006,39(7):1480-1486

【目的】观察在低温环境下间歇光照对肉鸡肺动脉高压综合征PHS的防治效果及其对肉鸡肺血管重构的影响；【方法】320羽肉鸡随机分为4组：常温对照组（NC）常规控温，24h连续光照；低温对照组（LC）、低温间歇光照1组和低温间歇光照2组采用低温诱发PHS，并从9d起分别实施24 L﹕0D的连续光照和21L﹕3D、19L﹕5D的间歇光照(IL)制度，30d后都为连续光照。记录PHS发病数、体重和耗料量，并分别于14、23、30、37和44 d从各组随机抽取10羽肉鸡采血和扑杀，测定肺动脉的管壁面积与管总面积之比（WA/TA）、平均中膜厚度（mMTPA）等指标；【结果】环境低温使PHS发病率升高，反映血管重构指标的WA/TA和mMTPA值也显著升高，而间歇光照能够有效地降低寒冷诱发的PHS发病率和上述各项值。限制光照期间IL组肉鸡体重低于LC组，但最终体重和料重比与LC组间差异不显著；【结论】在肉鸡生长早期实施间歇光照制度能够有效降低低温诱发的PHS发病率，抑制肺小动脉重构可能是其重要机理之一。  相似文献