犏牛L-PGDS基因克隆及其在各组织和睾丸不同发育阶段的表达研究     

穆松银  熊显荣  马鸿程  海卓  李键 《中国畜牧兽医》2020,47(12):3985-3992

本研究旨在克隆犏牛前列腺素D合成酶（prostagland D synthase,L-PGDS）基因序列,并检测其在不同组织及不同发育时期睾丸中的表达水平,从而为深入研究L-PGDS基因在犏牛睾丸发育过程中的作用机制提供依据。采集成年健康犏牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大肠、小肠、胃、大脑及不同发育时期犏牛睾丸组织：胎牛期（5~6月）、幼年期（1~2岁）、青春期（2.5~4岁）、老年期（7~9岁）,Trizol法提取各组织总RNA,利用RT-PCR技术扩增、克隆L-PGDS基因序列并利用相关生物学软件进行分析,利用实时荧光定量PCR检测犏牛各组织及4个不同发育阶段睾丸中L-PGDS基因mRNA的表达水平。结果显示,L-PGDS基因序列全长624 bp,包括完整的开放阅读框576 bp,编码191个氨基酸。同源性比对发现,犏牛与黄牛和绵羊的同源性最高,分别为99.28%和94.0%。系统进化树分析结果显示,犏牛与黄牛亲缘关系最近,其次是绵羊、马。L-PGDS蛋白为不稳定疏水蛋白,分子质量为21.229 ku,分子式为C₉₅₃H₁₄₇₁N₂₅₁O₂₈₁S₉,等电点为6.43,不稳定指数为47.25,不含跨膜区及信号肽,蛋白质二级结构预测显示α-螺旋、无规则卷曲、延伸链分别占25.65%、53.40%和20.94%。实时荧光定量PCR检测结果显示,L-PGDS基因在犏牛睾丸组织中特异性高表达,极显著高于其他组织（P<0.01）;随着年龄增长L-PGDS基因mRNA在犏牛睾丸中呈先上升后下降趋势,其中在青春期相对表达量最高,极显著高于其他时期（P<0.01）。本研究结果为深入探究L-PGDS基因在犏牛睾丸发育过程中的作用机制提供了基础资料。  相似文献   

波尔山羊超数排卵研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

李键  张红  马保华  邓小东  王波 《西南农业学报》2002,15(4):92-95

1999～2001年,分别在龙泉成都波尔山羊种羊场、邛峡四川波尔山羊种羊场分场、阳平四川波尔山羊种羊场、都江堰波尔山羊种羊场进行了波尔山羊超数排卵研究.对100只供体用FSH-PG法进行了超排处理,回收胚胎1867枚,平均18.67±8.50枚,其中可用胚1584枚,平均15.84±7.70枚.研究结果表明 (1)用30%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)溶液稀释后一次注射总剂量与用生理盐水稀释FSH递减法多次注射,平均每只获可用胚分别为19.0±11.1枚、22±1.00枚;(2)使用国产和进口激素FSH,平均每只获可用胚分别为15.94±8.33枚、15.15±5.03枚;(3)春秋两季超排,平均每只获可用胚分别为19.4±12.14枚、14.85±9.17枚;(4)波尔山羊体况好的,其超排效果好于体况较差的,平均每只获可用胚分别为16.80±8.75枚、13.32±6.53枚;(5)2～3胎母羊的超排效果好于经产4～5胎、育成羊和一胎羊,平均每只获可用胚分别为18.43±8.21枚、14.17±6.34枚、13.33±2.52枚、13.33±2.52枚.以上结果经统计分析,差异不显著.  相似文献   

农作物秸秆综合利用的进展   总被引：27，自引：0，他引：27  

刘丽香  吴承祯  洪伟  李键  蔡冰玲  林淑伟 《亚热带农业研究》2006,2(1):75-80

介绍了秸秆综合利用的最新进展,包括秸秆在还田、饲料转化、能源化及工业上的应用四方面的研究和应用现状,从分析中找出了秸秆综合利用中存在的主要问题及加快其利用的措施。  相似文献   

波尔山羊胚胎冷冻和移植试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

李键  马保华  张红  邓小东  曹冶  周洪群  李红 《西南农业学报》2003,16(4):116-118

用含1．5M乙二醇,0．1M蔗糖、20％NCS(V／V)的PBS液,或含1．5M乙二醇,20％NCS的PBS为冷冻保护液,将42枚A级胚胎(致密桑葚胚16枚,早期囊胚26枚)一并移入冷冻保护液,并进行快速冷冻,在降温至-36℃时将胚胎投入液氮保存。解冻时,胚胎细管先在室温(20～22℃)空气中停留15s后进入水浴快速解冻,解冻后一步除去保护剂,移入含20％NCS的PBS液中保存,手术移植入受体子宫角内。结果表明,解冻后形态质量完好的A级冻胚达88,1％(37／42),移植受体妊娠率达42,9％,说明本试验采用的胚胎冷冻-解冻程序,能有效地进行波尔山羊致密桑葚胚和囊胚的冷冻保存。  相似文献   

梅花山自然保护区拟赤杨的空间分布格局   总被引：5，自引：1，他引：5  

蔡冰玲  范海兰  宋萍  洪滔  林淑伟  刘丽香  李键  唐佳栋 《亚热带农业研究》2007,3(1):44-47

根据6块总面积为2300m2样地的实地调查资料,采用C、I、Iδ、Ca和M*/x5种聚集度指标以及Iwao方程对梅花山保护区拟赤杨种群的空间分布格局进行了系统研究,并比较其在不同取样尺度下的变化情况。结果表明,拟赤杨的空间分布均呈聚集分布,且在25m2取样单元上聚集密度较大,这可能是拟赤杨种群在天然条件下更新的适合面积。同时,还根据Iwao的M与x的回归方程,计算拟赤杨在不同密度和允许误差下的理论抽样面积。本研究调查获得拟赤杨的种群密度为每25m25-11株,按理论抽样面积计算至少应抽取84个25m2样方,而本研究取样样方数达92个,说明本研究测定拟赤杨为聚集分布是可信的,取样数量能达到精度要求。  相似文献   

波尔山羊人工授精率影响因素研究     

叶健强  李红  李键  张红  曹冶  赵素君  周洪群 《西南农业学报》2007,20(1):147-150

对波尔山羊精液不同的常温稀释液配方、稀释倍数、不同输精量的受胎效果和不同季节的射精量变化等影响因素进行了研究,结果表明:稀释液配方C在48h精子活力保存为0.34,在52h活力仍然达到0.3级以上;稀释比例上在1∶4~1∶19范围内,其情期受精效果较好,受精率为87.36%~89.88%;精液按1∶9倍比例稀释后,输精量在0.15~0.05mL时,对受胎效果影响不大;同时,季节和采精时间间隔对射精量影响研究表明:波尔山羊公羊1次射精量约为0.68mL,季节变化和采精时间间隔在1、2、3、4 d范围内对射精量的影响不显著(P>0.05)。  相似文献   

雷公藤栽培及利用研究综述   总被引：18，自引：6，他引：18  

洪伟  李键  吴承祯  洪滔  范海兰  唐佳栋  陈灿 《福建林学院学报》2007,27(1):92-96

中药雷公藤(Tripterygium wilfordiiHook.f.)在医药和生物农药领域有着广泛的应用。对中药雷公藤的植物学特性和生长习性进行简述,报道雷公藤在化学成分、药理临床应用、药用栽培以及生物农药开发等方面的国内研究进展,综述雷公藤在良种繁育、栽培技术及采收等方面的现状,并对雷公藤利用前景进行了展望。  相似文献   

泰宁雷公藤根系分布规律   总被引：8，自引：3，他引：8  

洪伟  唐佳栋  吴承祯  范海兰  李键  陈灿 《福建林学院学报》2007,27(2):97-100

对泰宁县3种雷公藤林分的雷公藤根系含水率和生物量进行研究。结果表明,3年生林分比5年生林分的根系含水率低;野生林分根系生物量远小于人工林林分,前者总根量仅达到430.019 kg.hm-2,而后两者则分别达到1073.070和1937.669 kg.hm-2;不同类型林分的根系生物量在各径级中分配的共同规律:粗根>中根>细根,根系生物量的垂直分布随着土壤深度的增加而逐渐下降,在0-10 cm的土层中,根生物量所占比例最大,达总量的40%以上,随后逐层减少;在30-40 cm的土层中,根量所占比例已经很小了,而>40 cm的土层,几乎没有根系,根量绝大部分集中在前3层(0-30 cm)。  相似文献   

波尔山羊胚胎移植奶山羊应用技术研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

李键  张红  马保华  邓小东  王波 《西南农业学报》2002,15(3):94-97

1999～2000年,在成都波尔山羊种羊场进行了波尔山羊胚胎移植奶山羊应用技术研究.对12只供体用FSH减量法进行超排处理,回收胚胎257枚,平均21.4±11.1枚,其中可用胚206枚,平均17.2±8.33枚.将170枚可用胚移植给同期发情的78只雅安奶山羊受体,其中2只在妊娠2个月后流产,49只受体羊妊娠到期产下纯种波尔山羊羔88只,移植受体妊娠率65.4%(51/78),产羔受体比率62.8%(49/78),胚胎成羔率51.8%(88/170).平均每只波尔山羊供体通过胚胎移植增加纯种后代7.33只.其中RB52号波尔山羊获16枚胚胎,移植给8只奶山羊(双胚),全部妊娠,产下13只纯种波尔山羊,胚胎成羔率达81.3%.结果表明,波尔山羊胚胎移植奶山羊能获得较高的妊娠率和胚胎成羔率,已可从研究阶段发展到产业化应用.  相似文献   

浅析影响贫困地区农村劳动力转移的原因及对策     

李键  吉文丽  王海霞 《新疆农业科技》2003,(5):5-5

一、影响贫困地区劳动力转移的原因 1、劳动力素质低下 农村劳动力素质的高低与农村剩余劳动力的转移程度密切相关.新疆大多数贫困县的农村从业人员,小学及以下程度的劳动力占70%以上,从业人员中90%以上又集中在种植业.尤其是一些素质相对较高的劳动力率先转移出去后,剩余劳动力的素质更低,难以向非农产业转移,这是剩余劳动力转移的内在制约因素.  相似文献