策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库   总被引：1，自引：0，他引：1  

赵桂媛  魏志刚  刘关君  张凯旋  刘桂丰  杨传平 《北京林业大学学报》2010,32(1):52-56

为了研究小黑杨木材形成过程中的关键基因,以2年生小黑杨茎形成层组织为试验材料提取RNA,采用SMART (RNA 转录过程中的5′末端转换机制) 技术合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成双链cDNA。利用SfiⅠ限制性酶酶切后将其连接到质粒载体pDNR-LIB上,采用电穿孔法将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,构建全长cDNA文库。文库质量鉴定表明:原始文库滴度为2.18×106 pfu/mL,扩增后的文库滴度为5.46×109 pfu/mL,重组率为96%。插入片段长度在0.5～2.0 kb之间,平均长度为1.12 kb,表明构建的小黑杨茎形成层cDNA文库较为理想。   相似文献   

4种百里香属植物种皮微形态比较   总被引：1，自引：0，他引：1  

王玲  张秀珍  仲轶  马喜娟  杨传平 《东北林业大学学报》2010,38(4)

以黑龙江省野生地被百里香属植物东北百里香(Thymus mandschuricus Ronn.)、显脉百里香(Thymus nervulosus Klok.)、兴凯百里香(Thymus przewalskii Nakai)、兴安百里香(Thymus dahuricus Serg.)4个种为研究对象,对种子微形态进行了比较研究。结果表明:百里香属植物种子表面微形态在种的水平上具有一定的分类学意义,同一类群进行分类时应选择同一面;种皮初级雕纹都是无方向性的,兴凯百里香种皮腹面为网纹纹饰,东北百里香的为嚼烂状纹饰,负网纹纹饰的显脉百里香网眼形状为近不规则四边形或不规则五边形,兴安百里香网眼形状为近圆形,种间差异明显。本结果可为百里香属的植物分类提供依据。  相似文献   

白桦SRAP反应体系的建立与优化     

张晓蕾  张凯旋  杨传平  曲冠证  刘桂丰  魏志刚 《东北林业大学学报》2010,38(9)

以白桦(Betula platyphlla Suk)基因组DNA为模板,利用趋势面设计对白桦SRAP-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物P)在3个水平上进行优化试验,筛选出各反应因素的最佳水平,建立了白桦SRAP-PCR反应的最佳体系。该反应体系为20μL:0.21g/LDNA,1.5μL;25mmol/LMg2+,1.4μL;5U/μLTaq酶,0.25μL;2.5mmol/L,2μL;10μm/L引物,0.35μL。PCR反应程序为:94℃预变性5min,94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min,5个循环;94℃变性1min,50℃复性1min,72℃延伸1min,30个循环,72℃延伸7min。  相似文献   

柽柳dir基因的克隆及序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

高彩球  刘桂丰  王玉成  姜静  杨传平  董京祥 《北京林业大学学报》2006,(Z2)

在柽柳cDNA文库测序中获得了dir基因的全长cDNA序列,去除PolyA后,该基因全长为724bp,其中5′非翻译区26bp,3′非翻译区143bp,开放阅读框(ORF)长555bp,编码184个氨基酸.基因编码蛋白的分子量为19·69kD,理论等电点为6·96·疏水性分析表明,蛋白的前41个氨基酸为亲水性的.dir基因编码的蛋白质参与木质素的形成,与植物体的病菌防御有关.该基因的Genbank登录号为DQ462418(基因)和ABE73781(蛋白).  相似文献   

白桦花芽RNA的快速提取   总被引：12，自引：1，他引：12  

杨传平  姜静  那冬辰  魏志刚 《东北林业大学学报》2002,30(3):1-4

酚类化合物、多糖、蛋白质和未知次级代谢产物，是影响白桦（BetuLa pLatyphyLLa)花芽组织RNA提取的几个主要干扰因素。笔者在以往草本植物DNA和微生物RNA提取方法基础上，提出了提取白桦雄花芽组织RNA的3种方法。  相似文献   

白桦不同种源种子形态特征及发芽率   总被引：18，自引：10，他引：18  

刘桂丰  杨传平  刘关君  杨瑞华  孔红娃 《东北林业大学学报》1999,27(4):1-4

对白桦１６个种源的种子研究表明：各地种子大小,质量及发芽率存在极显著差异;种子大小及质量与经纬度呈极显著的负相关,即从东北到西南种子越来越,也越来越重;种子发芽率与经度呈极显著的负相关,即从东到西发芽率越来越高。根据各种源地理气候因子聚类结果。初步划分为５个种源区。即大兴安岭种源区;小兴安岭种源区;完达山,张广才岭种源区;长白山、千山种源区;六盘山祁连山种源区。  相似文献   

二色补血草凝集素（Lectin）序列分析及表达   总被引：2，自引：0，他引：2  

齐晓天  王玉成  杨传平  曾丽萍 《东北林业大学学报》2008,36(11)

从二色补血草cDNA文库中分离出一个凝集素(Lectin)基因全长cDNA序列.该基因全长977 bp.其中:5′非翻译区(UTR)103 bp,3′非翻译区(UTR)208 bp,开放阅读框(ORF)全长663 bp,编码由221个氨基酸组成的蛋白质,该蛋白的相对分子质量为25 kD,理论等电点为8.82.利用实时定量RT-PCT方法进一步研究了二色补血草在植物病原菌(尖孢镰刀菌)侵染条件下不同时间点该基因的表达情况.结果表明,在尖孢镰刀菌胁迫处理的条件下,能诱导Lectin基因在二色补血草的根、叶中表达,说明该基因与植物抗病相关.  相似文献   

羊草乙醛脱氢酶（ALDH）基因片段的克隆及表达分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

李新玲  杨传平  徐香玲 《中国农学通报》2007,23(6):115-115

[研究目的]克隆羊草的乙醛脱氢酶ALDH基因片段,研究该基因在不同条件下的表达情况。[方法]采用RT-PCR技术克隆羊草的ALDH基因片段,并对其核苷酸和氨基酸序列进行分析,采用Real Time RT-PCR 方法研究该基因的表达。[结果]获得了羊草的ALDH基因片段,长度为675 bp,编码225aa。核苷酸序列比较表明,与水稻ALDH1a序列(AB037421)同源性为86%,与玉米RF2C（AF348413）同源性为85%。BLASTp分析,该序列与水稻、玉米、拟南芥的乙醛脱氢酶一致性分别高达87%、86%、60%,含有醛脱氢酶基因家族的保守结构域。Real Time RT-PCR数据表明,在诱导条件下该基因的表达量呈先升高后降低的趋势。总体上来说,该基因对盐的响应要高于干旱和冷冻。[结论]本研究成功获得了羊草ALDH基因片段,并研究了该基因的表达情况,为进一步克隆羊草ALDH全长基因奠定了基础。  相似文献   

NaCl胁迫下盐松不同种源种子的发芽特性   总被引：1，自引：0，他引：1  

魏志刚  高玉池  杨传平  刘桂丰  王军  刘关君 《种子》2009,28(8)

研究从国外引进的盐松种子的耐盐发芽特性,用0%、0.25%、0.5%、0.75%、1%和1.25%6种不同浓度的NaCl溶液对9个种源盐松种子进行处理,同时以国内樟子松种子作对照进行发芽试验.结果表明:随着NaCl浓度的增大,各种源种子的发芽率、发芽势和发芽指数均呈下降趋势,初始萌发时间和平均发芽时间呈上升趋势.不同种源种子的萌发对NaCl胁迫的反应不同,引种盐松种子的耐盐能力优于国内樟子松.聚类分析表明:耐盐能力最好的种源是754、N 8和17245.  相似文献   

大豆疫霉根腐病研究进展   总被引：5，自引：0，他引：5  

张淑珍  丁广文  李文滨  杨传平  林世锋  徐鹏飞  宁海龙  张大勇  姜振峰  武小霞 《中国油料作物学报》2004,26(2):102-107

从大豆疫霉根腐病病害起源、病菌分离技术、生理小种的鉴定、病害的流行、抗性遗传、抗源筛选、抗性机制、病害防治等方面,综述了国内外该病的研究进展.  相似文献