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松褐天牛泛素基因的克隆及表达 总被引:1,自引:0,他引:1
设计一对简并引物,应用RT-PCR技术,从松褐天牛细胞中克隆泛素基因的编码区,GenBank登录号EU433567.序列分析表明:该编码区的长度为228 bp,编码76个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量为8.49 ku,理论等电点为5.83.同源性比较发现,松褐天牛泛素基因与其他10种昆虫泛素基因在氨基酸水平上具有94%~98%的相似性.基于核苷酸水平上的系统发育树显示松褐天牛与斜纹夜蛾、草地贪夜蛾遗传距离较近;通过同源建模获得了松褐天牛泛素基因编码蛋白的理论三维结构.将泛素基因与pET-32a(+)连接,构建原核表达载体pET-32a-ub,经IPTG诱导,松褐天牛泛素基因在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并经Western blotting分析验证该表达,为研究泛素在松褐天牛体内的功能奠定基础. 相似文献
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杨圆蚧、柳蛎蚧研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
杨圆蚧Quadraspididiotus gigas (Thiem et Gerneck)、柳蛎蚧Lepidosaphes salicina Borchsenius.隶属于同翅目Homoptera 盾蚧科Diaspididae,是杨树的重要害虫.两蚧在东北三省、内蒙古、山西、宁夏等省大量成灾,严重威胁杨树人工林速生丰产.20世纪60~90年代,北方各省份及大专院校相继立题研究,现将两蚧研究进展综述如下. 1 分布、寄主及危害 1.1 分布 国外:杨圆蚧广泛分布于前苏联、意大利、西班牙、南斯拉夫、荷兰、瑞士、东德、匈牙利、捷克、保加利亚、土尔其、阿尔及利亚等地.柳蛎蚧主要分布在前苏联、日本和朝鲜.国内:两蚧在黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、山西、陕西、甘肃、青海、宁夏、新疆、河北均有分布,柳蛎蚧在山东、云南亦有分布[1~7]. 相似文献
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“森林保护学”教学方法探析与实践 总被引:1,自引:0,他引:1
"森林保护学"或相似的课程是我国农林院校林学专业和森林资源保护与游憩专业的重要专业课程。该文结合教学实践,分别从教学内容的编排与调整、绪论教学的重点、课堂讨论的方式、多媒体和板书教学的关系、文献检索与阅读资料和实践教学的内容等方面对"森林保护学"课程的教学方法进行了讨论,并提出了"先提出问题,然后讨论问题、分析问题、解答问题,再提出问题和解决问题"的"教"与"学"循环互动的模式,为提高包括"森林保护学"在内的高等学校林学相关专业课程的教学质量提供了参考。 相似文献
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【目的】研究不同类型农药胁迫下松墨天牛核糖体蛋白基因表达的变化,为靶标防治松树重要害虫松墨天牛提供理论依据和参考。【方法】从构建的松墨天牛cDNA文库中获得表达序列标签(EST),用Blast程序从GenBank数据库中查找同源序列,克隆得到松墨天牛的一个核糖体蛋白基因;用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测11种农药胁迫下该基因的表达。【结果】从松墨天牛cDNA文库中获得1条EST序列与昆虫核糖体蛋白S15A(RPS15A)同源的基因,命名为MaRPS15A。MaRPS15AcDNA长504bp,含有5′、3′非编码区和长393bp的开放阅读框,编码130个氨基酸,预测的蛋白质分子质量为14.75ku,理论等电点为9.95。MaRPS15A与赤拟谷盗(Tribolium castaneum)核糖体蛋白RPS15A的相似性为98%,与其他昆虫核糖体蛋白RPS15A的相似性大于88%。除溴氰菊酯外,其他农药胁迫导致MaRPS15A相对表达量下降。【结论】成功克隆了松墨天牛核糖体蛋白基因MaRPS15A(GenBank登录号:KJ930032)。大多数农药抑制了MaRPS15A的表达,表明松墨天牛受到了不利影响。 相似文献
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转铁蛋白是一类非血红素结合铁的β1–球蛋白,广泛分布于脊椎动物和无脊椎动物体内。克隆了松墨天牛转铁蛋白基因(登录号:KU213914),命名为Ma Tf,其核苷酸序列全长为2 549 bp,包含一个2 178 bp的开放阅读框(ORF)和一个371 bp的带有加尾信号的3'非编码区(3'UTR)。采用生物信息学方法分析Ma Tf的编码蛋白,结果显示:松墨天牛转铁蛋白分子量约为80 ku,等电点为7.36,为稳定蛋白,有信号肽,不含跨膜结构域,有1个糖基化位点,有平均分布在整条肽链的43个磷酸化位点。二级结构多为随机卷曲,仅有21.52%α螺旋,24%β片层(延伸链)结构,能形成三段卷曲螺旋,为亲水性蛋白,N端和C端各有1个TR_FER结构域。 相似文献
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[目的]克隆松墨天牛(Monochamus alteratus)葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)基因cDNA序列,探究其分子特征,为深入研究松墨天牛GPI的分子功能打下基础.[方法]采用RACE技术克隆松墨天牛GP基因cDNA序列,并对该序列及其编码氨基酸序列进行生物信息学分析.[结果]克隆并鉴定松墨天牛GPI基因,命名为MaGPI(GenBank登录号:KU323592),该基因序列长1038bp,共编码279个氨基酸.同源比对分析发现,松墨天牛与赤拟谷盗(Tribolium castaneum)的同源性最高,达90%,而与其他昆虫的同源性在76%以上.系统发育进化树分析结果表明,松墨天牛与赤拟谷盗在同一分支,与家蚕(Bombyx mori)相隔最远.MaGPI为亲水蛋白,含有5个功能位点:活性位点、变构位点、活性部位盖子和两个多肽结合位点.[结论]明确了MaGPI的核苷酸序列及编码蛋白特征,为进一步研究MaGPI的分子功能提供依据. 相似文献
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【目的】测定同安钮夜蛾核型多角体病毒(OpdiNPV)pst I-G 片断的序列,了解OpdiNPV的遗传结构和与其它昆虫病毒的进化关系。【方法】用pstⅠ酶切病毒基因组,电泳分离并回收pst I-G片段,连接到PUC18,转化入E.coli DH 5α,挑取阳性菌落测序。【结果】该片段长度为5 056 bp,有4个ORF,分别编码ODV-E66的C末端(EU 623602),P87/VP80的C末端(EU 732665),ODV-Ec43(EU617337)和Ac108(EU 732666)。ac108基因和odv-ec43起始密码子上游都有1个晚期启动子结构域TAAG,odv-ec43 基因起始密码子上游有2个早期转录起始元件CAGT;由odv-ec43推导的蛋白有2个跨膜螺旋、3个N-糖基化位点、1个N端酰基化位点、7个PKC磷酸化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点和4个CKⅡ磷酸化位点;p87/vp80基因终止密码子下游有polyA信号。【结论】氨基酸序列同源分析和相似性分析显示Ac108、ODV-E66和 P87/VP80与其它昆虫病毒差异较大,ODV-Ec43的保守性较高。 相似文献
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1992-1993年,在黑龙江省大庆市对柳蛎蚧进行了野外观察和定期了取样观察,研究了柳蛎蚧的生物学特性,结果表明;柳蛎蚧1年发生一代,以卵虫在介壳内越冬,5月下旬开始孵化,成虫出现期为7月-9月,主要固定若虫和雌成虫危害。 相似文献