屠宰生猪体内猪链球菌2型带菌情况调查     

黄绍谦  俞伏松  方勤美  郭长铭  朱继昌  林天龙 《福建农业学报》2009,24(5):400-403

应用猪链球菌2型定型PCR方法,对从福建省3个屠宰场采集的临床健康的生猪鼻咽拭子样本共121份进行了检测,同时对阳性样本进行了细菌分离鉴定及毒力基因检测。结果显示：121份样本中有17份为阳性,检出率为14．0％（17／121）,其中福州地区检出率为10．9％（7／64）,宁德地区检出率为11．8％（4／34）,莆田地区检出率为26．1％（6／23）。3株分离菌cps2J基因PCR特异性扩增产物大小均为675bp,其核苷酸序列与Genebank中猪链球菌2型参考菌株的同源性高达98％～100％,毒力基因型为gdh^＋／cps2J^＋／mrp^＋／ef^-／sly^-／fbps^＋／orf2^＋。调查结果表明,福建省福州、宁德、莆田等地区生猪群中均存在猪链球菌2型携带者,所分离到的3个猪链球菌2型菌株其毒力基因型为新的基因型。  相似文献   

创伤弧菌外膜蛋白的分离及其抗原性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

田丁  林天龙  许斌福  龚晖 《福建农业学报》2008,23(4)

分别采用Sarkosyl和PMSF法分离、提取鳗源创伤弧菌FJ03-X2的外膜蛋白,并应用SDS-PAGE和Western-blotting分析比较两种方法提取的外膜蛋白的组分和抗原性。SDS-PAGE分析结果表明,Sarkosyl法分离的主要外膜蛋白分子量集中在14～66 kDa之间;而PMSF法分离的主要外膜蛋白分子量分布在14～92 kDa之间。在两种方法中,分子量38 kDa、36 kDa的外膜蛋白均为高丰度蛋白。两种方法提取的创伤弧菌外膜蛋白经SDS-PAGE后,用兔抗创伤弧菌FJ03-X2血清进行Western-blotting,结果显示,兔抗FJ03-X2高免血清能识别绝大多数外膜蛋白组分,说明FJ03-X2菌株的外膜蛋白具有良好的抗原性。其中,分子量分别为66kDa、47 kDa、44 kDa、38 kDa、36 kDa、34 kDa的外膜蛋白呈强阳性反应,是主要的免疫原组分。同时,经比较分析认为PMSF法提取创伤弧菌外膜蛋白的效果更好。  相似文献   

多抗技术对多种鱼类血清免疫球蛋白的研究     

王希龙  龚晖  林能锋  王凡  刘晓东  林天龙 《福建农业学报》2011,26(6):919-924

亲和层析纯化鳜鱼血清免疫球蛋白,制备针对鳜鱼血清免疫球蛋白的兔多克隆抗体,采集常见经济鱼类血清25种,利用优球蛋白法纯化血清,通过间接ELISA的方法筛选与兔抗鳜鱼Ig反应的鱼类血清,结合变性还原条件与非变性非还原条件下的蛋白印迹试验显示:制备的兔抗鳜鱼Ig识别鲈形目中鳜鱼、加州鲈鱼、卵形鲳鲹、尼罗罗非鱼、花鲈、红罗非...  相似文献   

欧洲鳗皮肤黏膜免疫球蛋白纯化及其结构组成分析     

林娟娟  杨金先  陈强  刘晓东  俞伏松  林天龙 《中国水产科学》2009,3(3)

应用亲和层析技术提纯欧洲鳗(Anguilla anguilla)黏膜免疫球蛋白(Ig),并在结构和抗原性上进行分析.柱层析结果表明,欧洲鳗黏膜Ig经亲和层析分离后出现1个锐形的蛋白峰,蛋白主要分布于收集物的第2-6管,蛋白峰和抗原活性峰重叠.凝胶电泳结果显示,在变性还原条件下,欧洲鳗黏膜Ig重、轻链分子量分别为68 kD和26 kD,还有1条分子量约为18 kD的蛋白带;在非变性非还原条件下,黏膜Ig只有1条蛋白带,分子量约为350 kD,略旱扩散拖带现象,这一结果提示自然条件下欧洲鳗黏膜Ig可能以二聚体形式存在;在变性非还原条件下,黏膜Ig有3条蛋白带,分子量约为350 kD、138 kD和135 kD,表明欧洲鳗黏膜Ig在SDS作用下可发生不同程度的解聚.Western-blotting试验证实,兔抗血清能识别欧洲鳗黏膜Ig的二聚体、解聚体、重链和81 kD、84 kD处的蛋白带,显示出黏膜Ig的抗原特异性.欧洲鳗黏膜Ig与血清Ig在结构和抗原性上的差异.为进一步探讨欧洲鳗是否存在相对独立的黏膜免疫系统奠定了基础.  相似文献   

欧洲鳗黏膜免疫球蛋白单克隆抗体的制备及其特性分析     

杨金先  陈强  林娟娟  朱春华  刘晓东  林天龙 《中国水产科学》2008,15(3):511-515

应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了8个分泌抗欧洲鳗（Anguilla anguilla）黏膜免疫球蛋白的单克隆抗体细胞株,并对这些单克隆抗体的特性进行了分析。结果显示,8株单抗中IgM有2株,IgG,和IgG2。各有3株;所有单抗均与欧洲鳗黏膜免疫球蛋白呈ELISA反应阳性,腹水抗体滴度为在10^4～10^6之间。进一步实验证实,这些单抗与供试的10种水产动物常见病原菌均无交叉反应;其中3株单抗与欧洲鳗血清IgM有不同程度的交叉反应;4株单抗与黏膜免疫球蛋白有交叉反应,其中2株单抗交叉反应较弱。以上结果提示,欧洲鳗黏膜免疫球蛋白和血清IgM之间既有各自独特的抗原决定簇,又有共同抗原位点,证实欧洲鳗黏膜抗体在抗原性方面有别于血清IgM。成功制备的这8株单抗可用于鳗黏膜免疫球蛋白的检测及其结构和功能分析,为欧洲鳗黏膜免疫的进一步研究提供工具。[中国水产科学,2008,15（3）：511-515]  相似文献   

鳗鲡拟指环虫的免疫原性     

刘晓东  李敏  朱春华  陈强  林天龙 《中国水产科学》2007,14(4):654-658

拟指环虫病是严重危害养殖鳗鲡(Anguilla sp.)的寄生虫病,为了寻求更为安全有效的免疫防治方法,对鳗鲡拟指环虫(Pseudodactylogyrus spp.)的结构蛋白及其免疫原性进行分析。以鳗鲡拟指环虫全虫蛋白为抗原,制备了鼠和鳗鲡抗拟指环虫免疫血清,ELISA检测效价分别为1∶51 200和1∶3 200。SDS-PAGE分析表明,虫体含有16 kD、21 kD、29 kD、37 kD、43.5 kD6、8 kD和110 kD等主要结构蛋白,其中29 kD的多肽为高丰度蛋白;Western blot证实免疫鳗和康复鳗血清均能识别25 kD、43.5 kD6、2 kD、81 kD等虫体蛋白。间接荧光抗体试验显示,个别虫体在头部、尾部有明显的荧光染色,大多数虫体中部两侧,特别是卵黄腺丰富区域,呈较强的荧光染色。  相似文献   

鸡传染性喉气管炎病毒单克隆抗体的特性和应用     

李怡英  程由铨  林天龙  庄向生  黄宁  吴平 《福建畜牧兽医》1994,(Z1)

应用鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）作免疫原建立８株分泌抗ＩＬＴＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株。这８个ＭｃＡｂ均具有ＦＡ特性、没有中和病毒能力，它们分别属于ｌｇＧ２ａ、ｌｇＧ３和ｌｇＭ。应用异硫氰酸荧光素（ＦＩＴＣ）标记ＭｃＡｂ，建立直接荧光抗体试验（ＤＦＡ），检测ＩＬＴＶ抗原与分离病毒，其符合率为９２．８％。ＤＦＡ具有准确、快速、方便等特点。  相似文献   

顶果木嫩枝扦插育苗试验     

马跃  刘志龙  谌红辉  林天龙 《林业科技开发》2012,26(6):111-112

以顶果木半年生优势苗作为采穗母株,研究了嫩枝扦插育苗技术。结果表明:截干高度对母株产穗量影响显著,最适宜截干高度为20～30cm;生根促进剂浓度对插穗生根影响显著,采用GGR的适宜浓度为800～1 000mg/kg;扦插时间同样影响插穗生根,一年中适宜的扦插时间为3—7月。  相似文献   

猪伪狂犬病病毒囊膜蛋白免疫刺激复合物的制备   总被引：1，自引：1，他引：0  

陈少莺  胡奇林  俞伏松  程晓霞  林天龙  李怡英  程由铨 《动物医学进展》2002,23(3):64-65

以非离子去污剂Mega-10裂解病毒囊膜蛋白，与新型佐剂ISCOM基质作用，应用离心和透析相结合的方法制备了猪伪狂犬病病毒囊膜蛋白免疫刺激复合物（PRV－ISCOMs）。PRV－ISCOMs经磷钨酸负染后电镜观察见到囊膜蛋白分布在ISCOM颗粒表面，形成直径30－40nm的笼格状结构，同时将PRV－ISCOMs在－20℃冻融5次后经电镜观察仍见到典型的笼格状结构，与国外报道的形态一致，本结果证实我们成功地制备了具有良好稳定性的PRV－IS－COMs。  相似文献   

番鸭细小病毒和鹅细小病毒二联弱毒细胞苗的研究     

陈少莺胡奇林  程晚霞李怡英程由铨  林天龙 《兽医大学学报》2003,23(3):226-228

应用适应于番鸭胚成纤维细胞(MDEFC)上繁殖，并产生细胞病变的鹅细小病毒(GPV)弱毒疫苗株与番鸭细小病毒(MPV)弱毒疫苗，按适当比例混合，试制了MPV—GPV二联弱毒细胞苗，并测定了各项免疫指标。结果显示：试制出的二联苗对1日龄雏番鸭具有良好的安全性和遗传稳定性；免疫后5d和7d攻击GPV强毒，保护率分别为75％和100％，同时免疫后7d血清中MPV—胶乳凝集抑制(LPAI)抗体效价均大于2^1，21—28d抗体达高峰，有效免疫期超过60d。疫苗于-20℃保存期大于12个月。上述结果表明，二联弱毒细胞苗安全有效。  相似文献