创伤弧菌外膜蛋白免疫刺激复合物最小免疫剂量测定     

许斌福  龚晖  陈秀锦  田丁  陈强  陈永聪  林天龙 《福建农业学报》2012,(12):1280-1282

为探讨创伤弧菌Vibrio vulnifiticus外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)免疫刺激复合物(Immune stimulating Complexs,ISCOMs)的抗原性,制备创伤弧菌OMP-ISCOMs腹腔注射免疫欧洲鳗鲡Anguilla anguilla(平均规格为17g·尾-1),通过免疫血清学检测和攻毒保护试验,测定ISCOMs最小免疫剂量。结果表明,于免疫后第30d用FJ03-X2菌株攻毒,免疫组40、20、10、5μg·尾-1的免疫保护力分别为100%、87.5%、75%、50%;免疫血清效价分别为1∶6 400、1∶3 200、1∶800、1∶200。结果说明创伤弧菌外膜蛋白ISCOMs的最小免疫剂量为0.59μg.g-1水温(24±1)℃,并证实了创伤弧菌OMP-ISCOMs具强抗原性。  相似文献   

嗜水气单胞菌胞外产物的生物活性及主要蛋白型分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

董传甫  林天龙  龚晖  俞伏松  杨金先 《动物医学进展》2005,26(5):57-61

在血清学分型的基础上制备了23 株嗜水气单胞菌和1 株温和气单胞菌的胞外产物。分析这些菌株的溶血活性、蛋白酶解活性和细胞毒活性。结果表明,上述3 种生物学活性与菌株血清型间没有严格的对应关系。SDS PAGE分析显示,胞外产物的SDS PAGE图谱主要包括35 ku,45 ku,53 ku 3个主要蛋白质条带。有别于此前的多数报道,35 ku的蛋白质条带为多数菌株(22/24)所共有。根据凝胶上主要蛋白条带在不同菌株中的分布,可初步将其中的18 株细菌分为3 个胞外产物ECPs蛋白型,该ECPs蛋白型显示与血清型有一定的对应关系。经蛋白酶K消化处理的ECPs,银染可见脂多糖(LPSs)的典型O 糖侧链结构,显示脂多糖是组成粗制ECPs的重要组分之一。  相似文献   

猪源2型链球菌福建株CPS2J基因PCR检测及序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

俞伏松  郭长明  车勇良  林天龙  陈少莺 《中国农学通报》2009,25(17):10-14

设计并合成一对扩增2型猪链球菌CPS基因的特异性引物,以猪2型链球菌福建株DNA为模板,筛选最佳反应条件,建立检测CPS2J基因的PCR方法,并对PCR扩增产物进行序列测定和同源性比较分析。结果如下：应用该方法对猪2型链球菌福建株和标准阳性株进行扩增,均获得与预期大小一致的675bp特异性目的片段,而对8株非2型猪链球菌的扩增结果均呈阴性;敏感性测定最低可检出100cfu细菌量或50pg 细菌DNA;SS2PFJ06CPS2J 基因部分核苷酸及其推导的氨基酸序列与猪链球菌2型不同菌株的同源性分别达98.7%-100%和97.8%~100%。上述结果表明建立并优化的猪2型链球菌CPS2J基因的PCR检测方法敏感性好、特异性高,能用于2型猪链球菌的分子流行病学调查和快速检测; 序列分析表明猪2型链球菌福建株与国内外8株标准株之间同源性高、亲缘关系密切。  相似文献   

猪链球菌2型福建株的分离鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

俞伏松  车勇良  郭长明  江斌  陈少莺  林天龙 《福建农林大学学报(自然科学版)》2008,37(3):290-294

从临床表现为败血症的濒死病猪肝脏、肺脏、淋巴结中分离到一株链球菌,进行形态学、生化特性、小白鼠感染试验及PCR鉴定和CPS2 J序列测定.结果表明:该分离菌的形态、培养和生化特性基本符合链球菌的特点;人工感染试验显示,小白鼠腹腔接种0.2 mL分离菌培养物不发病,但接种1 mL能在48 h内致小白鼠死亡,并能从脏器中分离到接种菌;分离菌的PCR扩增产物与猪链球菌2型阳性参考菌株JA070109大小一致、长度为675 bp的特异性条带,其PCR产物的核苷酸序列与GeneBank上公布的猪链球菌2型不同菌株的同源性高达98%-100%.可见,该分离菌为猪链球菌2型,并首次证实福建存在猪链球菌2型.  相似文献   

小瓜虫疫苗研究进展及突破方向——访美小瓜虫研究机构思考     

潘厚军  林天龙  李安兴  赵飞  吴淑勤 《广东农业科学》2012,39(14):161-164,175

小瓜虫病是世界范围内严重危害淡水养殖鱼类的主要寄生虫病。美国农业部水生动物健康研究所、佐治亚大学兽医学院和康奈尔大学兽医学院3家研究机构在鱼类小瓜虫病及疫苗研究方面走在世界前列。为提升我国鱼类寄生虫研究水平,我们访问了此3家小瓜虫病研究机构,并与美国小瓜虫研究学者进行了交流。在总结了访美收获的基础上,介绍了小瓜虫的研究进展,并就我国小瓜虫疫苗研究需要的科研设施建设、突破的主攻方向及国内外合作提出了建议。  相似文献   

一株牛蛙源虹彩病毒的分离及鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘晓东  杨金先  龚晖  朱春华  林天龙 《中国动物传染病学报》2012,(1):16-21

用鲤鱼表皮瘤细胞系(epithelioma papulosum cyprini cell line,EPC)从福建省某美洲牛蛙养殖场分离到一株病毒FJ049。感染病毒的EPC呈现细胞圆缩、颗粒增多、脱落等特征性病变。间接免疫荧光检测结果表明,感染FJ049的EPC细胞与虹彩病毒单克隆抗体反应并出现特异性的胞浆荧光。采用PCR对虹彩病毒主衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因保守区域进行扩增,扩增出531 bp的特异性基因片段。MCP基因同源性和遗传进化分析结果表明分离株FJ049与沼泽绿牛蛙虹彩病毒RGV9808的核苷酸同源性最高,为99.8%,属于虹彩病毒科蛙病毒属。  相似文献   

欧鳗源嗜水气单胞菌β-溶血素基因序列分析   总被引：3，自引：1，他引：3  

龚晖  林天龙  杨金先  刘晓东  陈红燕  许斌福 《福建农业学报》2003,18(1):29-33

对克隆的欧鳗源嗜水气单胞菌β一溶血素基因AHL316HEM进行序列和结构分析表明，AHL316HEM基因读码框架全长为1482bp，编码长度为493个氨基酸的蛋白，分子量为54．2kD，等电点为5．625，读码框架内有一个EcoRI酶切位点。AHL316HEM从起始位点至第23个氨基酸残基形成一明显疏水区，可能构成信号肽，其抗原位点大部分都在亲水区，不具穿膜性。同源性分析表明，AHL316HEM基因编码的氨基酸序列与已报道的嗜水气单胞菌溶血素基因(accessionNo．BAA83088)的同源率为98％，与斑点气单胞菌溶血素基因(accessionNo．U40711)、温和气单胞菌溶血素基因(accessionNo．AF443393)的同源串分别为84％和72％，与霍乱弧菌溶血素基因(accessionNo．AF540655)、副溶血弧菌溶血素基因(accessionNo．VIBTRH2A)、金黄葡萄球菌β—溶血素基因(accessionNo．S72497)的同源性分别为7％、5％和4％。这一结果提示，气单胞菌属内各菌种的溶血素基因可能有共同的起源。  相似文献   

欧鳗嗜水气单胞菌的分离、鉴定和特性分析   总被引：19，自引：0，他引：19  

林天龙  陈日升  董传甫  俞伏松  杨金先  陈红燕  陈振海 《福建农业学报》2001,16(4):35-40

2000年夏季福建地区许多鳗场养殖的欧洲鳗暴发以脱粘、败血为主要症状的疫病，从不同来源的濒死鳗鱼体内分离到4株细菌。细菌的形态学、生化分析和补充试验结果符合嗜水气单胞菌的各项指标，PCR检测4株分离菌均扩增出特异性的气溶素基因（aerA)209bp片段及胆酶基因（Lip)760bp片段，进一步证实这些分离菌为嗜水气单胞菌并存在毒力基因。人工造病实验结果表明，分离株M00081205①的菌体纯培养物和胞外产物对昆明小白鼠和欧洲鳗分别具有中等和高度的致病力，初步证实嗜水气单胞菌是欧鳗夏季爆发性疫病的病原之一。  相似文献   

网箱养殖大黄鱼"白肝病"防治初探   总被引：1，自引：0，他引：1  

林能锋  许斌福  龚晖  董传甫  林天龙 《福建畜牧兽医》2001,23(2):14-15

2000年4至9月，宁德地区网箱养殖大黄鱼出现大面积，大规模死亡，其主要症状为肝脏严重失血，肝组织受损，呈黄白色，并伴有烂鳃等症状，根据临床表现、检查诊断、，并结合治疗效果。本文将该病初步命名为“白肝病”现结合该病的防治，及对其产生的可能原因作初步探讨。  相似文献   

福建省欧洲鳗寄生虫病调查初报   总被引：7，自引：0，他引：7  

俞伏松  林天龙  龚晖  杨金先  陈强  许斌福  陈振海 《福建农业科技》2000,(1):18-19

１９９６年１０月至１９９９年８月对福建６８个欧鳗养殖场进行了欧鳗寄生虫病初步调查,结果表明：欧鳗寄生虫病流行范围广,周期长,共查出１３种寄生虫为原虫８种,蠕虫５种,其中车轮虫,两极虫,小瓜虫和拟指环虫危害最为严重,阳性检出率分别高达７８％、７６％、５７．１％和３３．５％。  相似文献