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猪舍细颗粒物促进猪原代肺泡巨噬细胞向M1极化 总被引：1，自引：1，他引：0
旨在研究猪舍细颗粒物（PM2.5）对猪原代肺泡巨噬细胞（PAMs）精氨酸代谢、炎症因子表达和极化标志物表达的影响。利用支气管肺泡灌洗方法,体外分离PAMs,细胞纯化后,利用Diff-quik染色和F4/80标记鉴定PAMs,并测定细胞活力。将纯化培养的PAMs分为对照组和PM2.5处理组（50 μg·mL-1）,继续培养4、8和12 h,测定细胞活力,收集细胞上清测定一氧化氮（NO）的含量,裂解PAMs测定精氨酸酶的活性,并采用RT-PCR检测PAMs炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-10以及M1、M2型巨噬细胞标志物CD80和CD206的表达水平。结果显示,通过支气管肺泡灌洗方法成功分离培养了PAMs,并发现PAMs的细胞活力随着培养时间的延长逐渐降低（P<0.05）。PM2.5处理PAMs,显著提高了细胞上清中NO含量（P<0.05）,显著降低了细胞精氨酸酶的活性（P<0.01）,并显著提高了细胞炎症因子IL-1β和TNF-α mRNA表达水平（P<0.01）,降低了IL-10 mRNA表达水平（P<0.05）。另外,PM2.5处理PAMs早期,显著提高了CD80 mRNA表达水平（P<0.01）,在后期显著降低CD206 mRNA表达水平（P<0.01）。综上表明,猪舍PM2.5促进了PAMs向M1表型极化,促进了炎症的发展。 相似文献
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Ca2+和茉莉酸对菠菜CBF表达的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
为探究钙离子、茉莉酸（Jasmonic acid,JA）对菠菜CBF转录因子表达的影响。以菠菜（Spinacia oleracea L.）为材料,对其进行低温(4℃)或JA处理、或用钙离子载体A23187预处理菠菜幼苗,利用Northern印迹技术检测各处理时CBF的表达情况。结果表明,低温和JA均可诱导菠菜中CBF基因的表达。推测低温可能首先导致细胞中JA含量升高,JA通过一定的机制诱导细胞质基质中游离钙离子浓度（[Ca2+]cyt）升高,然后Ca2＋可能通过CaM (Calmodulin)或CaM相关蛋白传递低温信号,从而诱导CBF的表达。 相似文献
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小型猪复合麻醉剂对小型猪部分心肺指标及血浆内皮素和降钙素基因相关肽含量的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
【目的】研究小型猪复合麻醉剂对小型猪血浆内皮素(endothelin, ET)和降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide, CGRP)含量及部分心肺指标的影响。【方法】14头实验用小型猪肌肉注射小型猪复合麻醉剂0.15 mL•kg-1,并在注药前及注药后5、10、30、45、60、80、100、120 min分别进行无创血压和心率(heart rate, HR)的监测并同步采取前腔静脉血样。采用放射性免疫分析法测定小型猪血浆中ET和CGRP的含量,并分析他们之间的相关性。【结果】无创血压、HR主要是在注药后5-10 min及80 min时变化明显(P＜0.01或P＜0.05)。ET与血压的变化趋势大致相似,且它们之间存在着一定的相关性(P＜0.05);CGRP与血压的变化趋势相反,呈一定的负相关性(P＜0.05)。【结论】ET和CGRP共同参与了小型猪复合麻醉剂引起的小型猪血流动力学变化过程,ET和CGRP的变化可能是小型猪复合麻醉及引起小型猪血压发生变化的主要原因之一。 相似文献
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在田间试验条件下,利用孔径为25 μm的尼龙网袋,评价了两种线虫品系(噬菌性异小杆线虫Heterorhabditis bacteriophora和小卷娥斯式线虫Steinernema carpocapsae)、两种施用方式(感染线虫的昆虫尸体和线虫悬液)、两种土层深度(5 cm和15 cm)以及不同取样时间(2013年12月8日、2014年2月18日以及2014年4月14日)对昆虫病原线虫越冬情况的影响.试验结果表明,S. carpocapsae 较H. bacteriophora的低温抗性强,施用后4个月,无论是虫尸剂还是线虫悬液处理,品系S. carpocapsae的存活率均高于H. bacteriophora.另外,各处理组在15 cm深度处的线虫数量均大于5 cm深度处.随着时间的延续,线虫悬液组线虫数量下降迅速.虫尸剂组在前两次取样时几乎未释放线虫,但在次年4月中旬取样时发现,S. carpocapsae虫尸剂有侵染期线虫释放,其释放的线虫数量与S. carpocapsae悬液处理无显著差异.可见,虫尸剂有助于昆虫病原线虫越冬,但与线虫品系有关,采用虫尸剂有助于高效利用昆虫病原线虫防治有害昆虫. 相似文献
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本试验以猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)为模型细胞,探讨T-2毒素诱导IPEC-J2炎性反应的影响及相关作用机制。通过四甲基偶氮唑盐(MTT)方法测定细胞活力,选择适宜的T-2毒素和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)浓度。试验分为4个组,分别为对照组、NAC组(4.0 mmol/L NAC)、T-2组(4.0 ng/mL T-2毒素)和T-2+NAC组(4.0 ng/mL T-2毒素+4.0 mmol/L NAC),处理12 h后测定各组IPEC-J2中丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性、活性氧(ROS)水平、细胞炎症相关基因和核转录因子-κB(NF-κB)的相对表达量。结果表明:1)与对照组相比,T-2组IPEC-J2中CAT、T-SOD活性极显著降低(P<0.01),IPEC-J2中MDA含量和ROS水平极显著升高(P<0.01)。与T-2组相比,T-2+NAC组IPEC-J2中CAT和T-SOD活性极显著升高(P<0.01),IPEC-J2中MDA含量和ROS水平显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。2)与对照组相比,T-2组IPEC-J2中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(P<0.05)、白细胞介素-6(IL-6)(P<0.01)、白细胞介素-10(IL-10)(P>0.05)的mRNA相对表达量升高。3)与对照组相比,T-2组IPEC-J2中NF-κB蛋白相对表达量极显著升高(P<0.01)。与T-2组相比,T-2+NAC组IPEC-J2中NF-κB蛋白相对表达量极显著降低(P<0.01)。由此可见,T-2毒素通过诱导IPEC-J2产生过量的ROS,促进炎症相关基因及NF-κB蛋白的表达,导致IPEC-J2发生炎性反应。 相似文献
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虾青素对氧化应激小鼠肝原代细胞的保护作用 总被引：1，自引：0，他引：1
试验旨在研究虾青素对过氧化氢(H_2O_2)诱导小鼠肝原代细胞产生氧化应激的影响。采用改进的原位二步灌流法提取ICR小鼠肝原代细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率、活细胞率的变化,生物化学法测定细胞中丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的活性变化;荧光定量PCR测定CAT、γ-GCS催化亚基(GCLC)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)mRNA相对表达量的变化,ELISA法检测细胞中Keap1、Nrf2蛋白的变化。结果表明:虾青素能够降低H_2O_2诱导小鼠肝原代细胞产生氧化应激的细胞凋亡率、MDA含量、Nrf2和Keap1 mRNA相对表达量(P<0.05),提升活细胞率、CAT和γ-GCS活性(P<0.05)、CAT和GCLC的mRNA相对表达量(P<0.05),抑制Nrf2蛋白及Keap1蛋白的表达(P<0.05)。虾青素能够促进相关抗氧化酶的活性,抑制Nrf2蛋白及Keap1蛋白表达进而抑制Keap1-Nrf2-ARE信号通路的激活。 相似文献
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番茄WRKY转录因子基因片段的克隆及序列分析 总被引：1，自引：1，他引：0
【研究目的】本研究以番茄苗为实验材料,克隆出番茄WRKY转录因子的一个基因片段并对其核酸序列进行分析。【方法】根据本课题组已经克隆出的番茄特异的WRKY基因片段和番茄EST序列设计特异引物,利用RT-PCR技术获得番茄WRKY转录因子的一个基因片段并连接到pMD19-T载体中,转化DH5α,,筛选阳性克隆,用双酶切分析法对其进行鉴定并进一步对核酸序列进行测序分析。【结果】结果表明,克隆获得的WRKY转录因子基因片段约为680bp,用GenBank中的Blastn程序分析表明,其与CaWRKY（AY789641.1）、WIZZ（wizz mRNA）（AB028022.1）的相似性分别为86％和84％。【结论】WRKY转录因子在番茄中受JA诱导,这为克隆番茄WRKY基因全长,进而为番茄抗病育种奠定基础。 相似文献