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试验旨在制备原核表达鹅源新城疫病毒(NDV)JS/5/05/Go株M蛋白的多克隆抗体并进行鉴定。以鹅源NDV总RNA为模板,RT-PCR扩增M基因,亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET32a-M,转化E.coli BL21(DE3)菌株进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检测表达产物;用KCl染色切胶纯化法纯化重组蛋白;采用切胶免疫小鼠的方法制备M蛋白多克隆抗体,抗体效价用间接ELISA检测,特异性用Western blot和间接免疫荧光法鉴定。结果表明,在大肠杆菌中成功表达了分子量约为55 000的重组蛋白,用切胶纯化法获得了纯度较高的重组蛋白;ELISA法检测抗体效价可达1∶102 400,Western blot和间接免疫荧光试验结果表明制备的多克隆抗体能够特异性识别纯化的M蛋白及NDV自身表达的M蛋白。 相似文献
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新城疫病毒M蛋白细胞核定位的机制与功能研究进展 总被引：1，自引：1，他引：0
新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）M蛋白一种非糖基化膜相关蛋白,主要位于病毒囊膜内表面,构成了病毒囊膜和核衣壳连接的支架。研究表明,M蛋白是一种细胞核-细胞质穿梭蛋白。在NDV感染早期,M蛋白可通过自身携带的核定位信号进入细胞核。根据已报道的相关RNA病毒M蛋白功能的研究结果,推测NDV M蛋白早期的细胞核定位有利于细胞质中病毒基因组的复制和转录,并且可能会抑制细胞基因的转录和蛋白质合成。目前,国内外对M蛋白的研究主要集中在M蛋白与NDV毒力和复制的关系以及以M蛋白为核心的病毒样颗粒形成机制和利用方面,而对M蛋白细胞核定位的机制和功能研究相对较少。鉴于M蛋白细胞核定位在NDV复制和致病过程中的重要作用,本文主要从NDV M蛋白的细胞定位特征、M蛋白细胞核定位的分子机制和功能方面进行阐述,以期为NDV M蛋白细胞核定位的功能及其作用机制研究提供理论参考。 相似文献
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猪源新城疫病毒研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
新城疫病毒是一种变异及进化速度很快的病原,随着世界范围内新城疫病毒的4次大流行和疫苗的广泛、大量重复使用,新城疫病毒的宿主范围随之明显扩大,现已向哺乳动物——猪跨进.对猪源新城疫病毒病原学、引发的临床症状、实验室诊断方法及其毒力和基因变异等方面进行综述,并对猪源新城疫病毒发生的可能原因进行了分析. 相似文献
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以郑州旅游职业学院餐饮企业管理专业为例,简要介绍了项目教学法的基本原理,并对项目教学法与传统教学方法进行了对比.同时,结合实践教学中积累的经验,以实例展示项目教学法在餐饮企业管理专业教学中的应用. 相似文献
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以中草药怀牛膝的2个品种核桃纹和风筝棵为材料,研究了NaCl胁迫对怀牛膝种子萌发、幼根生长以及K、Ca、Fe元素含量的影响。研究发现,高浓度NaCl对怀牛膝种子发芽率和根长有明显的影响,与对照相比,NaCl处理的怀牛膝种子发芽率极低,且根生长缓慢,没有形成侧根。通过原子吸收光谱法检测,发现风筝棵和核桃纹中均含有K、Ca、Fe元素,核桃纹中K、Ca的含量高于风筝棵中的,而风筝棵中的Fe含量明显高于核桃纹中的。62.5 mmol/L NaCl处理使怀牛膝中K、Ca、Fe元素含量都降低。但是,NaCl胁迫对核桃纹品种的影响大于对风筝棵的影响。以上研究结果表明,NaCl胁迫对怀牛膝2个品种核桃纹和风筝棵的发芽率、幼根生长以及K、Ca、Fe等元素含量都有不同程度的影响。 相似文献
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１９８９年１１月在北京召开的“面向２１世纪教育国际研讨会”上，正式提出了“创业教育”这个新概念、新名词。其内涵是以开发和提高青少年创业精神和创业能力，使之成为具有开创性的社会主义建设者和接班人。林业院校对学生加强“创业教育”，就是要培养学生创业和开拓进取精神，提高他们的创业能力和竞争力，使之在就业竞争中始终处于有利地位。“创业教育”和“素质教育”的目标是一致的。国务院李岚清副总理指出：“素质教育的根本目的是使教育面向全体学生，全面提高学生的基本素质，促进学生在德、智、体和美育等方面全面发展，注重… 相似文献
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为了研究香×苏F2代杂交猪的杂交性能,试验随机选取6月龄的香×苏F2代杂交猪15头,以纯种苏太猪和纯种从江香猪为对照,进行屠宰性状、肉质性能及脏器系数的测定。结果表明:香×苏F2代杂交猪屠宰性状与从江香猪差异极显著(P0. 01),优于从江香猪而劣于苏太猪;香×苏F2代杂交猪肌肉失水率、肌内脂肪含量与从江香猪、苏太猪差异极显著(P0. 01);香×苏F2代杂交猪肝脏、脾脏和肾脏系数与从江香猪和苏太猪均差异显著(P0. 05)。说明香×苏F2代杂交猪既发挥了苏太猪生长速度快、瘦肉率高的特性,又基本上保持了从江香猪的优良肉质特性。 相似文献
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为制备鼠抗鸡膜联蛋白A2(ANXA2)多克隆抗体,检测ANXA2蛋白在鸡不同组织中的表达情况,先构建鸡ANXA2基因的重组原核表达载体pET-32a-ANXA2,将其转化入大肠埃希菌中进行诱导表达;采用切胶纯化和切胶免疫小鼠的方法制备鸡ANXA2多克隆抗体,然后利用该抗体检测ANXA2蛋白在4周龄SPF鸡不同组织中的表达情况.结果表明:鸡ANXA2重组蛋白His-ANXA2在IPTG终浓度为0.1 mmol·L-1、诱导时间为5 h的条件下表达量高.通过切胶纯化和切胶免疫方法获得了具有较高效价和特异性的鸡ANXA2蛋白鼠多克隆抗体.组织表达检测结果显示,ANXA2蛋白在鸡法氏囊、胸腺、十二指肠、肾脏、脑、腿肌和心脏中有表达,而在肝脏、脾脏、肺脏、腺胃和胰腺中未检测到表达.这一研究获得的鼠抗鸡ANXA2蛋白多克隆抗体为后续研究鸡相关病毒的复制和致病机制奠定了基础. 相似文献