一起猪流行性腹泻病毒和猪链球菌混合感染引发仔猪拉稀病例的诊断及分析     

刘磊  卢冰霞  赵硕  秦毅斌  段群棚  周英宁  蒋冬福  赵武 《养猪》2020,(1):115-117

为确诊广西一存栏1000头母猪的某规模养猪场2耀3日龄仔猪临床持续表现严重拉稀症状的病因,研究对拉稀仔猪进行了临床诊断和实验室诊断。对拉稀仔猪的发病情况调查,临床症状和病理变化观察,实验室细菌分离培养及鉴定,进行PCR/RT-PCR方法检测可能引起仔猪腹泻的常见疫病病毒(如猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型和猪圆环病毒3型)以及常见肠道腹泻病毒(流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒和猪丁型冠状病毒)。结果在2窝拉稀仔猪肠系膜淋巴结中均分离到猪链球菌2型(S.s2),同时在拉稀仔猪肠道中均检测到猪流行性腹泻病毒(PEDV),而其它病原检测均为阴性,表明S.s2和PEDV混合感染可能是引起本次仔猪拉稀病例的主要原因。  相似文献   

猪丁型冠状病毒CH/GX/1468B/2017的分离鉴定及全基因组序列分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

秦毅斌  何苹萍  卢冰霞  何颖  梁家幸  刘磊  段群棚  韦嫔媛  李斌  陈忠伟  周英宁  苏乾莲  蒋冬福  卢敬专  赵武 《中国畜牧兽医》2019,46(7):1907-1916

本研究于广西某猪场采集疑似感染猪丁型冠状病毒（porcine deltacoronavirus，PDCoV）的腹泻仔猪小肠及其内容物进行病毒分离，并通过细胞病变（CPE）、RT-PCR、间接免疫荧光（IFA）和全基因序列测定分析对分离的病毒进行鉴定。结果显示，试验成功分离到1株PDCoV，命名为CH/GX/1468B/2017（简称PDCoV 1468B）。该毒株可稳定有效地在LLC-PK细胞生长增殖，并引起典型CPE；该毒株已在LLC-PK细胞连续传代15代，病毒滴度随着传代次数的增加逐渐提高并稳定在10^8.10TCID₅₀/mL以上。该毒株全基因组序列长25 399 nt；与23个GenBank中登录的参考毒株的全基因组序列比对显示，核苷酸同源性为97.2%~99.4%，其中PDCoV 1468B分离毒株与Vietnam/Binh21/2015株同源性最高，为99.4%。全基因组系统进化分析显示，PDCoV 1468B分离毒株属于Ⅱ群，与东南亚国家PDCoV毒株亲缘关系密切，处于同一进化分支。综上所述，本研究成功分离出PDCoV 1468B株并进行了全基因序列分析，为进一步开展PDCoV致病性等生物学特性研究及疫苗研制奠定了基础，同时可为PDCoV的遗传进化提供数据支持。  相似文献   

猪流行性腹泻病毒变异株CH/GX/750A/2015在Vero细胞上转瓶培养条件的优化试验     

卢冰霞  陶明华  赵硕  秦毅斌  刘磊  陈忠伟  何颖  段群棚  梁家幸  周英宁  李斌  蒋冬福  杨思仪  赵武 《中国畜牧兽医》2020,47(5):1506-1513

本研究旨在确定猪流行性腹泻病毒（PEDV）变异株CH/GX/750A/2015株在Vero细胞上转瓶培养的最佳条件，为大规模生产高效PEDV变异株疫苗提供技术支撑。试验以10 L转瓶培养病毒，对接毒时细胞维持液中胰酶浓度（0、2、4、6、8和10 μg/mL）、细胞密度（40%、60%、80%、100%、200%）、接毒剂量（MOI分别为1、0.1、0.01和0.001）、吸附时间（0、30、60、90、120、240 min）、收毒时间（接毒后12、24、36、48、60、72 h）、维持培养温度（35、36、37和38 ℃）和转瓶转速（6、8、10、12、14、16 r/h）7个条件进行优化。结果显示，PEDV CH/GX/750A/2015株在10 L转瓶中的最佳培养条件为：细胞刚铺满单层时接毒，接毒量为MOI=0.01，维持液（无血清DMEM培养液）中胰酶质量浓度为6 μg/mL，不需吸附，维持培养温度为37 ℃，12 r/h 旋转培养48 h后收获病毒液可获得较高效价的病毒液，效价可稳定达到10^6.50 TCID₅₀/0.1 mL。本试验为 PEDV 变异株大量培养提供了参考，为变异株疫苗研发奠定了基础。  相似文献   

近期多起急性型猪巴氏杆菌病例的诊断及病原检测分析     

段群棚  周英宁  梁家幸  卢敬专  蒋冬福  秦毅斌  闭炳芬  卢冰霞  何颖  陈忠伟  赵武 《广西畜牧兽医》2016,(4):179-182

正猪巴氏杆菌病(Swine Pasteurellosis)又称猪出血性败血症,俗称猪肺疫、猪出败、锁喉风,是由巴氏杆菌(Pasteuurella)引起的一种畜禽共患传染病。猪巴氏杆菌病以中小猪多发,以高热、咽喉红肿、呼吸困难为主要临床症状,以败血症病变及纤维素性肺炎为主要剖检特征。按发病病程,猪巴氏杆菌病可分为最急性型、急性型和慢性型,临床上以急性型为主要发病类型~([1])。猪巴氏杆菌病是危害养猪  相似文献   

广西牛群戊型肝炎病毒感染情况调查     

李斌  苏乾莲  赵武  秦毅斌  梁家幸  何颖  梁保忠  严子斌  覃勇  韦建华  段群棚  许力匆 《中国动物检疫》2011,28(10):46-48

为了解广西牛群中戊型肝炎(HE)的感染状况,应用反转录—套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)对采自广西8个市牛群的粪、肝样品进行了戊型肝炎病毒(HEV)RNA检测。结果从广西6个市牛粪样品中检出HEV阳性率为19.13%(35/183),从4个市牛肝样品中检出HEV的阳性率为20%(5/25),8个市牛粪、牛肝样品中HEV的总阳性率为19.23%(40/208)。表明广西受检牛群中存在HEV感染,应重视牛HE这一新发人畜共患传染病的防控。  相似文献   

2017—2019年广西玉林市牛羊口蹄疫和小反刍兽疫血清抗体检测     

黄宇  何文娜  陈忠伟  张艺杰  甘甲忠  卢冰霞  段群棚  赵武  甘一波  段振华  何颖 《中国动物检疫》2021,38(2):13-19

为了解广西玉林市牛羊口蹄疫(FMD)和小反刍兽疫(PPR)免疫情况,2017—2019年采用酶联免疫吸附试验(ELISA),对从玉林市7个县(市、区)234个种畜场、规模养殖场和散养户采集2244份羊血清和922份牛血清样本进行O型、A型和亚洲I型FMD以及PPR免疫抗体检测,并比较不同年份、不同地区的免疫抗体水平.结...  相似文献   

广西猪牛羊鸡戊型肝炎血清流行病学调查分析     

刘艳玲  赖莉敏  廖凤  苏乾莲  李斌  熊敏芬  陈晖月  段群棚  秦毅斌  梁家幸  农扬  赵武 《南方农业学报》2012,43(1):103-106

[目的]全面掌握了解广西各地猪、牛、羊、鸡戊型肝炎(HE)的感染状况及其流行特点.[方法]采用双抗原夹心ELISA检测来自广西各地猪(850份)、牛(392份)、羊(428份)、鸡(352份)共2022份血清中的抗HEV抗体,并比较不同地区、不同动物间抗HEV抗体阳性率的差异.[结果]4种主要畜禽的血清总抗HEV抗体阳性率为44.76%(905/2022),其阳性率大小排序为:猪(77.53%)>牛(27.81%)>羊(21.03%)>鸡(13.35%);不同地区的畜禽血清抗HEV抗体阳性率都是以猪群的最高,均在59.00%以上.而从不同地区的4种畜禽血清总抗HEV抗体阳性率来看,以南宁市的最高(61.94%)、河池市的最低(30.93%).[结论]广西的猪、牛、羊、鸡群中均存在HEV感染,且猪在传播HEV方面起主导作用.  相似文献   

有效控制猪流行性腹泻变异株暴发疫情典型案例分析     

段群棚  秦毅斌  卢冰霞  周英宁  蒋冬福  闭炳芬  卢敬专  陈忠伟  梁家幸  李斌  苏乾莲  何颖  赵武 《广西畜牧兽医》2017,33(3)

正猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种急性高度接触性肠道性传染病~([1])。PEDV主要是通过破坏猪肠道上皮绒毛细胞而导致感染猪出现呕吐、水样腹泻、脱水等特征症状,主要造成7日龄以内的哺乳仔猪高  相似文献   

鸽Ⅰ型禽副粘病毒病的诊断     

卢敬专  周英宁  赵武  蒋冬福  段群棚  卢冰霞  闵炳芬  陈忠伟  梁家幸 《广西畜牧兽医》2017,33(1)

从病死鸽肝、脾及脑组织混合悬液接种SPF鸡胚分离到1毒株,经HA试验和HI试验、动物攻毒试验、RT-PCR检测,确诊为鸽Ⅰ型副粘病毒。分离株经胸肌注射途径人工感染40d龄非免疫乳鸽和3月龄非免疫鸡,乳鸽发病后出现与自然发病鸽相同的症状和病变;试验鸡未呈现出临床病症和死亡,但却能引起体液免疫应答反应。  相似文献   

猪丁型冠状病毒N基因原核表达及多克隆抗体制备     

刘磊  何颖  陈忠伟  赵武  段群棚  赵硕  梁家幸  周英宁  全琛宇  许心婷  陈婷婷  许艺兰  李斌  蒋冬福  卢敬专  秦毅斌  卢冰霞 《畜牧与兽医》2023,(2):67-72

旨在研究猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus, PDCoV)N蛋白的抗原性，为下一步诊断试剂盒的研发提供依据。试验通过RT-PCR的方法扩增PDCoV CH/GX/1468B/2017株完整的N基因并构建原核表达质粒pET32a-N,将pET32a-N转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中，经诱导表达获得重组N蛋白，纯化后经Western blot方法检测其反应原性，免疫昆明小鼠制备重组N蛋白多克隆抗体并进行效价测定(间接ELISA法)和特异性验证(间接免疫荧光法)。结果显示：重组N蛋白在IPTG终浓度为1.0 mmol/L,37℃诱导表达6 h的条件下可获得最高表达量，该重组蛋白主要以可溶性蛋白的形式表达；Western blot结果显示，纯化后的重组N蛋白可以和PDCoV阳性猪血清发生特异性结合，具有良好的反应原性。制备的多克隆抗体的效价可达1∶64 000,间接免疫荧光法结果表明其能特异性识别和结合PDCoV,说明重组N蛋白具有较好免疫原性。提示：PDCoV N蛋白抗原性好，可作为诊断试剂盒的候选抗原。  相似文献