柑桔黄龙病的常规PCR及荧光定量PCR检测   总被引：21，自引：0，他引：21  

胡浩  殷幼平  张利平  赵云  夏玉先  王中康  覃健 《中国农业科学》2006,39(12):2491-2497

【目的】为柑桔黄龙病的早期诊断和寄主体内病原菌的动态监测提供一种稳定、可靠的检验检疫技术。【方法】利用亚洲韧皮杆菌核糖体蛋白基因rplJ/rplL设计了2对PCR引物CQULA03F/CQULA03R、CQULA04F/CQULA04R和1条TaqMan探针CQULAP1，以此为基础建立了常规PCR和TaqMan探针法、SYBR Green I荧光染料法两种荧光定量PCR（共3种）反应体系；确定了3种体系各自的检测灵敏度、特异性和准确性，据此对3种体系进行了比较；从2004年7月到2005年5月还利用常规PCR和TaqMan探针荧光定量PCR体系完成了对柑桔黄龙病病原菌在寄主体内的周年变化的动态监测。【结果】两种荧光定量PCR方法的灵敏度比常规PCR高出至少2～3个数量级，而TaqMan探针法由于使用了杂交探针，其特异性尤其可靠，另外两种定量PCR较小的产物片段使得它们具有更好的稳定性，加上荧光定量PCR方法本身受污染可能性小、操作简便等固有优势，使得前者更适合于柑桔黄龙病的检测。【结论】本研究建立的2种荧光定量PCR方法可以为柑桔黄龙病的病害早期诊断以及柑桔黄龙病病原菌近缘种的甄别提供准确、灵敏、快速的检验检疫技术。  相似文献   

岷江干旱河谷辐射松人工林土壤微生物数量的季节动态     

殷国兰  李梅  吴宗兴  杜文东  林宏贵  黄泉  代英 《四川农业大学学报》2007,25(4):410-414

研究岷江干旱河谷不同造林时间辐射松(Pinus radiata D.Don)人工林土壤细菌(Bacteria)、放线菌(Actino-mycete)和真菌(Fungi)三类微生物数量的季节动态变化。结果表明:三大类土壤微生物区系中,细菌数量占优势,放线菌数量次之,真菌数量最少;三类微生物均有明显的季节变化,微生物数量秋季最高,夏季最少。茂县小庙山造林地土壤微生物总数最多,土壤肥力较其他林地高;理县薛城马山造林地的微生物总数最少,土壤肥力最低;总的来说,随着林龄的增加,辐射松人工林土壤肥力有增加的趋势。  相似文献   

云南省小麦条锈病发生流行原因及其治理对策初探     

吕建平  卢俊  何云松  李亚红  温三明  殷减清  尹明芬 《勤云标准版测试》2004,(3)

探讨和总结了近年来云南省小麦条锈病的发生情况,并对其流行原因进行了分析,认为气象条件和种植品种是影响发病的主要因素,同时提出了今后云南省小麦条锈病的治理对策。  相似文献   

耐盐碱解磷菌的筛选鉴定及对绿豆的促生作用     

周妍  王丽娜  张美珍  刘权  殷奎德 《西北农业学报》2022,(4):488-497

从大庆耐盐碱植物的根际土壤中分离得到100株解磷菌,对筛选得到的菌株解磷量进行测定,并结合其他促生特性检验,选出3株耐盐碱高效解磷菌.通过生理生化试验和16S rRNA鉴定出JC8、JC11和JP8这3株菌,分别为Pseudomonas sp.,Acinetobacter sp.和Microbacterium sp.;...  相似文献   

PCR、DIA与致病性测定法检测柑桔溃疡病菌的比较   总被引：3，自引：0，他引：3  

王中康  夏玉先  孙宪昀  周常勇  殷幼平 《中国农业科学》2004,37(11):1728-1732

 依据柑桔溃疡病菌全基因组序列的独有保守区域设计筛选出的特异性引物对JYF5/JYR5，用于柑桔溃疡病菌的PCR检测，具有很好的检测特异性、灵敏度和稳定性。同时比较了PCR与DIA（斑点免疫结合技术）及传统的致病性测定法在检测灵敏度、稳定性及田间样品检出率等方面的差异。结果表明，PCR的检测灵敏度可达103～104 cfu·ml-1（每个反应体积约10个细菌），明显高于DIA（104～105 cfu·ml-1，每个样点约300个细菌）；PCR、DIA和致病性测定法检测田间显症样品的检出率均可达到100%，而检测柑桔无症样品的检出率依次降低。此外，通过排除PCR抑制物质和在PCR反应体系中加入终浓度为15%的甘油，有效地降低了检测中存在的假阴性。  相似文献   

''''小×胡8号杨''''组织培养中的褐化控制研究     

朱学静  金华  殷鸣放  马树森  丁丽娜  赵允鹏  姜国斌 《辽宁林业科技》2007,(4)

以‘小×胡8号杨’叶片为试验材料,探讨叶片预处理、无机盐浓度、不同温度和光强、抗氧化剂与吸附剂等对褐化控制的有效性。结果表明:经过5℃、12h预处理能减轻外植体褐化现象;使用1/2MS培养基较MS培养基褐化程度减轻;低温暗处理和常温暗处理都能一定程度上减轻褐化;抗氧化剂和吸附剂对褐化作用较明显,其中PVP效果较好,VC次之,Na2S2O3最差;6-BA和IBA浓度变化对褐化现象基本没有影响。  相似文献   

辽东山区落叶松人工纯林诱导复层林更新试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

殷鸣放  刘大卫  杨森  吴建军  王洪林 《林业科技开发》2008,22(3):14-17

对辽宁东部山区落叶松人工纯林进行不同行状间伐试验,并在采伐迹地进行云杉幼树更新试验,试验结果发现:落叶松纯林经过行状间伐,草本层生物多样性显著增加,林地土壤持水力增强,增幅为4.4%～16.7%.不同更新行数试验的云杉幼树年均高生长量、冠幅生长量、地径生长量、总生物量大小变化明显,伐2行栽1行型与全光对比分别减少了27.4%、12.7%、21.7%、4.1%,而伐3栽2型分别增加了3.6%、0.8%、4.3%、15.8%.伐后保留带落叶松的生长得到了促进,2 a后落叶松的胸径、单株材积都比同龄落叶松纯林大,伐2栽1型与伐3栽2型增幅分别为2.7%～8%、4.6%～16.7%;高生长变化不明显.  相似文献   

城市近郊林土壤种子库研究     

张博  高尚军  殷鸣放  金宁  张岩  管宁 《辽宁林业科技》2009,(3)

对沈阳、抚顺两城市交接的近郊林区不同林分类型土壤种子库进行研究.结果表明:不同林分类型土壤种子库均具有较好的储量和活力,其储量大小顺序为:乔木林地＞灌木林地＞宜林荒地,土壤种子库物种多样性指数大小顺序为:灌木林地＞乔木林地＞宜林荒地,种子种类以乡土树种为主;数量化分析表明坡位对乔木林地及灌木林地中土壤种子库储量和活力影响较大,而植被覆盖度对宜林荒地中土壤种子库储量和活力影响较大.  相似文献   

城郊优质油菜高效栽培技术   总被引：1，自引：0，他引：1  

殷少华  熊迎  夏起昕 《湖北农业科学》2010,49(10)

优质油菜高效栽培即"一菜两用"技术,是指利用双低优质油菜品种,其菜薹作蔬菜食用,然后通过再生分枝开花结实的特点,在基本不影响油菜子产量的前提下,实现油菜"一种双收",大幅度提高油菜生产效益的一项技术。该技术特别适合于城郊或交通便捷的地区推广,可较好地将优质油菜生产与农业增效、农民增收结合起来,延长和壮大优质油菜产业链条,增加农民收入。  相似文献   

普通野生稻杂交后代抗白叶枯病鉴定筛选   总被引：1，自引：0，他引：1  

殷富有  李维蛟  郭怡卿  张敦宇  黄兴奇  程在全 《江西农业学报》2010,22(8)

为了从野生稻中发掘优异的水稻白叶枯病抗性材料,拓宽栽培稻抗白叶枯病遗传基础,达到控制水稻白叶枯病的目的,对合系35与元江普通野生稻远缘杂交后代不同世代的不同株系材料分年度进行了抗白叶枯病能力的鉴定和分析,并调查了后代材料对水稻白叶枯病的抗病能力,获得了一批高抗和中抗材料,为今后定位高抗白叶枯病基因以及水稻抗病育种提供了依据。  相似文献