猪传染性胃肠炎病毒基因工程研究进展   总被引：3，自引：0，他引：3  

王宪文  毕英佐  于康震  曹永长  王新卫 《上海畜牧兽医通讯》2004,(2):2-4

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)是猪的一种重要的传染病病毒，给养猪业造成巨大经济损失。近几年来，随着分子生物学技术的广泛应用．在TGEV的各个方面的研究都取得了长足进展．积累了丰富的资料。本文就来对TGEV的基因工程研究进展作一介绍。  相似文献   

堆型艾美球虫广东株3—1E基因的克隆与序列分析   总被引：2，自引：1，他引：2  

吴德铭于康震  毕英佐曹永长 马静云 《中国兽医科技》2005,35(7):533-536

根据GenBank中登录的堆型艾美球虫3—1E基因序列，设计了3条引物，以广东株堆型艾美球虫裂殖子总RNA为模板，利用反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)扩增获得了3—1E基因部分片段，将这一片段克隆至pGEM—TEasy载体中，经PCR、限制性内切酶分析和克隆片段的序列测定、比较，证实了克隆片段的可靠性。序列比较发现，所克隆的基因片段与Eimeria acervulina美国株(US)、E.acervulina QH株3—1E cDNA的核苷酸同源性分别为99．0％和99．2％，推导氨基酸的同源性分别为98．2％和97．6％。  相似文献   

以免疫活性串联片段FB为抗原检测FMDV抗体的间接ELISA方法     

马静云曹永长  谢青梅史泉城 毕英佐 《中国兽医科技》2005,35(8):605-610

将口蹄疫病毒免疫串联片段FB克隆至原核表达载体pBAD／TOPO中，得到重组质粒pBAD-FB，将此重组质粒转化到受体茵TOPIO中，以不同浓度的阿拉伯醛糖进行诱导，并在不同诱导时间进行采样，经处理后做SDS-PAGE、Western-blotting分析。结果发现以终浓度为0．02g／L的阿拉伯醛糖进行诱导，4h后表达量可达高峰，其大小约为26ku，扫描结果显示，FB融合蛋白的表达量占细菌总蛋白的28．9％，能与抗FMDV抗体发生特异性反应，融合蛋白以包涵体和可溶形式存在。将融合蛋白的可溶性组分用500g／L Ni-NTA树脂过柱纯化后作为包被抗原，成功地建立了检测血清中FMD抗体的间接ELISA方法。融合蛋白的最佳包被浓度是40μg／mL；标准阳性血清的最适稀释倍数为1：160；最佳封闭液为50g／L脱脂奶粉和PBS；最佳封闭时间为1h。用建立的ELISA方法对采集的118份样品进行检测，并与全病毒包被抗原ELISA、间接血凝诊断试剂盒和UBI VP1抗体检测ELISA试验盒的检测结果比较，证明所建立的方法具有良好的特异性、敏感性和可重复性。  相似文献   

谈谈“禽流感”     

毕英佐 《广东饲料》1998,(1):16-17

禽流感是一种家禽的病毒性传染病,能导致鸡的高死亡率。到目前为止,还没有证据表明禽流感病毒可以从鸡直接传给人。  相似文献   

临床健康猪群猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株存在情况调查与分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

王连想  孙彦伟  田云  孔令辰  查云峰  任裕其  马静云  毕英佐 《广东畜牧兽医科技》2008,33(5)

对华南地区152个规模场和102个个体养殖场/散养户临床健康猪群的2934份血清样品进行PRRSV变异株(NSP2 1594-1680 bp缺失)核酸检测,结果阳性49份,阳性率为1.67%。总计254个场(户)中18个PRRSV变异株核酸阳性,场(户)阳性率为7.09%。其中152个规模场中5个阳性,场阳性率为3.3%;102个个体养殖场/散养户中13个阳性,场(户)阳性率为12.8%。结果表明PRRSV变异株(NSP21594-1680 bp缺失)在华南地区各种类型猪场中都存在,其中在个体养殖场/散养户中存在的几率高于规模猪场。提取来源于1个规模场和2个个体养殖场3份阳性样品核酸进行PRRSV NSP2部分基因序列测定和分析,所获得的氨基酸序列与CH-1a、VR-2332等经典美洲型毒株相比,均在481位缺失1个氨基酸,在532-560位连续缺失29个氨基酸,与2006年以来国内分离的高致病性猪蓝耳病病毒JXA1、HUN4、HPDEBV等具有相同的缺失特性。鉴于PRRSV变异株(NSP2 1594-1680 bp缺失)在生产中已造成很大损失,各养殖生产场必须强化以有效免疫、消毒、生物安全措施为主的综合防控工作。  相似文献   

猪伪狂犬病零天免疫效果观察     

牛建强  毕英佐  蓝天  刘梦云  黄永彬  彭孝先  罗旭芳 《中国兽医杂志》2008,44(2):42-43

猪伪狂犬病（PR）是危害养猪业重大传染病之一。临床症状随日龄的不同而有很大的差别。初生仔猪可引起中枢神经紊乱、运动失调、麻痹等症状,妊娠母猪可致流产、死胎、木乃伊胎。成年猪多呈阴性感染,可出现呼吸道症状。西方发达国家在20世纪80～90年代相继制定和启动了该病的根除计划,其中基因缺失疫苗及其相应的鉴别诊断方法研制成功并投入使用,使免疫接种成为控制和净化本病最有效措施之一。本研究采用基因缺失疫苗对某伪狂犬病阳性场仔猪零时免疫,观察抗体消长规律及其在控制和净化伪狂犬病中的作用。  相似文献   

猪瘟的防控措施     

牛建强  蓝天  陈峰  毕英佐 《动物医学进展》2006,27(7):108-110

猪瘟是危害我国养猪业的最重要疾病之一。在猪瘟流行的国家,猪瘟弱毒C株疫苗仍是应用最广泛的猪瘟疫苗,许多国家在该疫苗的帮助下,成功清除了猪瘟。国内疫苗的免疫效果是肯定的,但近10年来,仔猪慢性猪瘟的发病率在不断增加,其原因是多方面的。文章仅就其国内流行毒株、C株疫苗的免疫机理、免疫程序、控制措施进行概述,为猪瘟防控提供参考。  相似文献   

禽流感与人类健康   总被引：5，自引：0，他引：5  

曹永长  毕英佐 《华南农业大学学报》2004,25(3):116-119

禽流感(avian influenza,AI)是由A型流感病毒(avian influenza virus)引起的一种禽类感染征或疾病综合症,高致病性禽流感(highly pathogenic avian influenza,HPAI)可引起禽类100％的死亡。由于抗原转变和抗原漂移,禽流感病毒是高度可变的。人禽流感是指高致病性禽流感病毒跨越物种界限,引起人类感染的一种新发传染病。目前,全球已发现H5N1、H7N7、H9N2等亚型禽流感病毒可感染人类。但目前还没有发现禽流感病毒具有在人群中相互传播的能力。对禽流感必须采用积极的预防策略。在加强监测的基础上,对家禽采用扑杀和免疫相结合的措施,可以有效地控制禽流感的流行。研制人类流感疫苗,是预防新的流感病毒株的流行的可靠保证。  相似文献   

传染性囊病病毒VP2蛋白诱导细胞凋亡的研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

吕英姿  曹永长  陈峰  毕英佐 《华南农业大学学报》2002,23(2):70-73

在体外分别构建了3种重组表达质粒，含传染性囊病病毒GZ911株VP2基因的pGVP2、含HK46株VP2基因的pHVP2以及含HK46株5‘-端序列（包括非编码区，VP5和VP2基因）的pHVP2 5用不同的重组质粒转染质代鸡胚成纤维细胞（CEF），在转染后0、14、38h，收集对照组和转染组细胞，用酶联免疫吸附试验检测CEF中降解DNA量，结果，在14和38h，各组细胞中测得的Dλ值均为转染pHVP2 5组最大，其次为转染pHVP2,pCVP2的组，并都大于其他对照组，表明2个IBDV毒株的VP2蛋白在CEF中表达后都能诱导CEF发生凋亡，但不同毒株的VP2蛋白诱导CEF凋亡的能力不则；VP5蛋白可增强VP2蛋白诱导CEF凋亡的作用。  相似文献   

H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的制备及鉴定     

谢青梅  徐维加  陈俊伟  王玲玲  马静云  毕英佐  曹永长 《华南农业大学学报》2007,28(4):117-118

用纯化的H5亚型禽流感病毒(AIV)抗原免疫Balb/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经筛选,获得9株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中4株能高效分泌血凝素(HA)蛋白特异性的单克隆抗体.特异性试验表明,IE6单克隆抗体仅与试验的H5病毒株反应,而不与新城疫病毒(NDV)、H9亚型AIV和产蛋下降综合症病毒(EDSV)反应.这9株单克隆抗体分别为IgG1、IgG2a、IgG2b、IgM亚类,κ轻链.  相似文献