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将载体pCAMBIA2300-35s-OCS进行改造,增加了酶切位点Sac Ⅰ,之后,PCR扩增编码胆碱脱氢酶(CDH)的基因并用Sma Ⅰ和Xba Ⅰ将其与改造后的pCAMBIA2300-35s-OCS连接,得到单价植物表达栽体p2300-gz-betA.再通过Sal Ⅰ、Hind Ⅲ、Sac Ⅰ等酶切位点将编码甜菜碱醛脱氧酶(BADH)的基因及其启动子和终止序列连接到栽体p2300-gz-betA上,最终得到pCAMBIA2300-betA-BADH双价植物表达载体,并将其导入根癌农杆菌GV3101和LBA4404.betA和BADH是编码甜菜碱合成途径的两个关键酶的基因(CDH和BADH),也是近年来研究较多的耐盐基因,其双价植物表达栽体应用于遗传转化后,有望进一步提高转基因植物的耐盐性. 相似文献
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以红叶石楠(Photinia fraseri)的胚性愈伤组织为受体材料,利用基因枪法导入外源抗寒基因 rd29A,以期建立基因枪转化红叶石楠的技术体系。结果表明,基因枪转化红叶石楠的最佳组合条件为:胚性愈伤组织在诱导培养基 MS + 6-BA 2.0 mg ·L-1+ NAA 5.0 mg ·L-1+ 2,4-D 0.5 mg ·L-1+ 琼脂 5.0g ·L-1+ 蔗糖 20 g ·L-1里,用 0.3 mol ·L-1甘露醇处理 15 ~ 16 h;基因枪轰击时添加 12.5 mol ·L-1氯化钙50 μL+0.1 mol ·L-1亚精胺 50 μL,每枪含金粉 300 μg + 质粒 DNA3.0 μg,轰击距离 9 cm,轰击压力 1 100psi,轰击次数 1 次。经多次筛选获得了 6 株转基因植株,转化植株经 PCR 检测和 Southern 分析,证实了rd29A 已经整合到红叶石楠基因组中。 相似文献
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尾穗苋凝集素(Amaranthus caudatusagglutin in,ACA)是一种存在于尾穗苋种子中的贮藏蛋白,属苋菜凝集素家族,对同翅目害虫如蚜虫、褐飞虱、叶蝉等有明显的致死作用。植物表达载体pCAMB IA2300-35S-OCS带有35S启动子及终止序列、卡那霉素(Kan)抗性基因NPTⅡ。载体pGEMT-ACA含有ACA基因,通过PCR扩增出ACA基因。把植物表达载体pCAMB IA2300-35S-OCS和扩增后的ACA基因用KpnⅠ和SalⅠ双酶切后经连接酶连接,得到植物表达载体pCAMB IA2300-ACA。将该载体分别导入农杆菌GV3101和LBA4404进行保存。 相似文献
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基于荧光SSR标记的白杨派种质资源遗传多样性研究 总被引:1,自引:1,他引:0
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不同Fe处理对油松幼苗叶绿素的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
为探讨不同供铁水平对油松幼苗叶绿素含量的响应规律,采用砂培方法设置了7种供铁浓度(0、30、60、75、90、120、150μmol.L-1),对生长在不同供铁水平下油松(Pinus tabulaeformisCarr.)2年生幼苗针叶4~9月份的叶绿素及活性铁含量进行了测定。结果显示,CK、60、90、120、150μmol.L-1供铁处理的叶绿素及活性铁含量在4~9月份呈先升后降的趋势,8月份达到峰值;0μmol.L-1和30μmol.L-1供铁处理在4~9月份均呈单峰曲线,6月份达到高峰。不同处理间各指标的大小都存在很大的差异,且变化趋势存在一致性,均表现为90μmol.L-1CK120μmol.L-160μmol.L-1150μmol.L-130μmol.L-10μmol.L-1。结果证实供铁过量或供铁不足都引起叶绿素及活性铁含量的降低。 相似文献
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对山东省费县大青山林场8年生刺槐新品种多彩青山、紫艳青山、壮美青山、绿满青山和鲁刺10(CK)的生物量和单株枝干含热量进行测定和试验分析,选择高生物量、高热值的刺槐新品种进行能源林栽培经营。研究结果表明:5个刺槐品种枝干干质量在58.40~132.89 kg,从大到小排序为壮美青山、多彩青山、绿满青山、紫艳青山、CK; 5个刺槐品种单株枝干含热量在1 066.71~2 481.86 MJ; 5个刺槐品种各器官干质量热值中,树叶的单位干质量热值最高,树干次之,树皮的最低。综合生物量和热值分析,对刺槐进行能源林经营的品种选择是有效的,壮美青山和多彩青山选做能源林刺槐品种栽培最为理想。 相似文献