利用RAPD和微卫星标记对协优杂交稻及其亲本进行区别与鉴定   总被引：14，自引：2，他引：12  

李莉  杨剑波  汪秀峰  向太和  吴家道 《中国水稻科学》2000,14(4):203-207

选用400个随机寡核苷酸和40个荧光标记的微卫星引物对,对我国主栽的协优杂交稻组合及其亲本进行多态性分析。RAPD分析显示,400个随机寡核苷酸引物中,有364个能够在供试基因型材料中扩增出肉眼可见的DNA条带,其中28个显示扩增的多态性,这中间9个引物产生的13条多态性条带具有清晰、易分辨的特点,可以在供试的水稻组合与亲本之间,以及杂交组合之间进行区别和鉴定。微卫星分析指出,40对荧光标记引物中,13对引物产生的31条标记带,能够在供试基因型材料中显示稳定的多态性,且杂种表现为双亲的互补型。与RAPD相比,微卫星分析具有多态性强、精确性高和重复性好的特点。  相似文献   

一种叶片直接用作PCR扩增的新方法及其应用   总被引：21，自引：3，他引：18  

汪秀峰  杨剑波  向太和  李莉  倪大虎 《中国水稻科学》2002,16(1):67-70

以水稻为模式植物研究了利用碱处理叶片直接用作PCR扩增的模板,并应用于水稻品种种性和纯度鉴定以及分子标记辅助田间育种材料的选择中。该方法具有快速、简便、结果可信度高,重复性好,对待测植株的损伤小等特点,它无需高速冷冻离心机及相应的提取DNA的试剂,故试验成本低,检测所需的时间短。尤其是群体较大时,此种方法更是显得经济有效,利用此种方法在1 d内可检测300份样品。  相似文献   

转基因耐除草剂大豆A2704-12定性PCR检测方法研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

马卉  汪秀峰  李莉  陆徐忠  倪大虎  杨剑波 《分子植物育种》2011,9(3):376-380

本研究建立了转基因耐除草剂大豆A2704-12定性PCR检测方法.根据A2704-12转化体外源插入片段5'端与大豆基因组连接区序列设计特异性引物,以大豆内源基因Lectin为内标,从A2704-12转化体中特异性扩增出239 by大小的特异性目的片段.同时对该方法特异性和灵敏度进行测试,结果显示:该方法能检测出A27...  相似文献   

利用RAPD技术检测杂交稻种子纯度(Ⅰ)──汕优63与其三系DNA扩增产物的区别     

杨剑波  李莉  汪秀峰  向太和  吴家道  孔令传  刘华开  张亚兵 《安徽农业科学》1996,(3)

本文应用30个引物对我省主栽水稻组合汕优63其及相应的不育系、恢复系、保持系的基因组进行了随机扩增多态性分析。从中筛选出6个引物能够在杂种和双亲之一中形成明显的多态性差异。  相似文献   

转玉米pepc基因的杂交水稻亲本的选育   总被引：27，自引：0，他引：27  

王德正  焦德茂  吴爽  李霞  李莉  迟伟  王守海  李成荃  罗彦长  汪秀峰 《中国农业科学》2002,35(10):1165-1170

 对转玉米 pepc基因水稻进行观察研究 ,发现玉米 pepc基因不仅在水稻中高水平表达而且能稳定遗传。转基因水稻的PEPC活性比非转基因对照提高 10倍以上 ,其单株有效穗、穗总粒数、千粒重和单株产量等主要经济性状指标分别比原始亲本Kitaake提高 14 .9%、5 .7%、1.3%和 13.9%。 1998年以来 ,利用转 pepc基因水稻与杂交稻亲本杂交 ,经 5年 7代选育得出以下结果 :(1)玉米 pepc基因在新遗传背景下仍能高水平表达并能稳定遗传 ;(2 )F1的PEPC活性介于双亲之间 ,其饱和光合速率提高 5 0 % ,与双亲的差异达显著水平 ,利用高光效基因提高水稻杂种优势具有可行性 ;(3)PEPC活性与饱和光合速率呈极显著正相关 (r =0 .6 4 70 ) ,可将水稻叶片中的PEPC活性作为鉴定高光效水稻的主要生理指标 ;(4)转育成 3个较稳定的高光效水稻株系 ;(5 )建立了潮霉素催芽初选、分子标记抽检、田间表型决选和生理生化指标定量鉴定的高光效水稻筛选技术体系  相似文献   

分子标记辅助培育水稻抗白叶枯病和稻瘟病三基因聚合系   总被引：6，自引：2，他引：4  

倪大虎  易成新  李莉  汪秀峰  张毅  赵开军  王春连  章琦  王文相  杨剑波 《作物学报》2008,34(1):100-105

水稻的白叶枯病和稻瘟病是水稻的两大主要病害, 通过分子标记辅助选择与传统的杂交、自交相结合的方法, 将抗稻瘟病的Pi9(t)基因和抗白叶枯病的Xa21及Xa23基因聚合到同一株系中, 经多代大田或/和温室接菌鉴定、室内标记选择和田间农艺性状的筛选, 获得了4个三基因聚合且农艺性状优良的株系L17~L20。用不同国家和地区的20个稻瘟病小种、中国流行的7个白叶枯病菌系C1~C7以及安徽省流行的白叶枯病菌系进行大田或/和温室抗病性鉴定, 结果显示, 株系L17~L20对20个稻瘟病小种均表现出抗性, 抗性水平与Pi9(t)基因的供体亲本75-1-127相当, 抗谱相同; 对白叶枯病的抗性和抗谱与Xa23基因相似, 不论在苗期还是在成株期均抗白叶枯病。与Xa21、Xa23基因的供体亲本M12和CBB23相比, 成株期的抗性水平有所增强。利用多重PCR技术, 在同一PCR反应中可同时选择Pi9(t)和Xa21基因, 提高了PCR选择效率。  相似文献   

转Xa21基因不育系皖21A的白叶枯病抗性与利用   总被引：5，自引：1，他引：4  

倪大虎  杨剑波  吴家道  李莉  易成新  许传万  汪秀峰  贾士荣  张世平 《中国水稻科学》2004,18(6):494-498

利用基因枪转化法将Xa21基因导入80-4B（BT型不育系80-4A的保持系）,选育出纯合稳定的株系皖21B。以80-4A与皖21B连续回交转育,育成了高抗白叶枯病的不育系皖21A,对皖21A和皖21B的不同世代材料进行PCR分析和田间白叶枯病菌抗性试验,表明Xa21基因稳定遗传且抗性稳定。皖21A与恢复系R18、HP121、U160配制杂交组合具有良好的抗病性和产量潜力。  相似文献   

农杆菌介导水稻幼胚转化体系的建立     

张毅  汪秀峰  李莉  倪大虎  陈亚琳 《安徽农业科学》2004,32(4):637-639

利用根癌农杆菌介导的转化方法对 3个粳稻品种的幼胚进行转化。在对影响根癌农杆菌转化水稻效率的多种因素进行比较研究后 ,优化转化条件 ,改进技术 ,建立了农杆菌介导的水稻幼胚转化体系。利用该体系 ,水稻品种秀水 11号的幼胚经预培养 4～ 7d得到的愈伤组织 ,用农杆菌EHA10 5 /pCAMBIA13 0 1感染后 ,筛选出潮霉素抗性愈伤组织并获得转化植株 ,潮霉素抗性愈伤组织获得率为 70 .76%。GUS染色及转基因植株总DNA的PCR检测结果表明 ,T -DNA上的外源基因已整合进了转基因水稻基因组中。  相似文献   

一种叶片直接作用PCR扩增的新方法及其应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

汪秀峰  杨剑波等 《中国水稻科学》2002,16(1):67-70

以水稻为模式植物研究了利用碱处理叶片直接用作PCR扩增的模板，并应用于水稻品种种性和纯度鉴定以及分子标记辅助田间育种材料的选择中。该方法具有快速、简便、结果可信度高，重复性好，对待测植株的损伤小等特点，它无需高速冷冻离心机及相应的提取DNA的试剂，故试验成本低，检测所需的时间短。尤其是群体较大时，此种方法更是显得经济有效，利用此种方法在1d内可检测300份样品。  相似文献   

温室大棚蔬菜病虫害绿色防控技术     

汪秀峰 《河南农业》2017,(16)

<正>绿色防控是一种新的病虫害防治理念,其主要目的是为了减少化学农药的使用量,确保蔬菜中不存在化学农药,或化学农药残留不超标,使蔬菜的内在质量得以提高。大棚蔬菜病虫害发生的主要条件是温度、湿度、菌源、虫源、品种抗病性及栽培措施等,大棚蔬菜的生态控制就是通过农业的、物理的、生物的等生态因素的调控,达到减少化学农药用量,消除污染残留,从而使人们食用更安全,使病虫得到控制的目的。一、茄果类及瓜类灰霉病、  相似文献