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41.
为了解鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌的基因组差别,筛选鸡白痢沙门氏菌特有的序列,利用SSH对鸡白痢沙门氏菌C79-13（实验方）与鸡伤寒沙门氏菌Sg9（驱动方）基因组进行了比较。选择四碱基内切酶Rsa I将C79-13与Sg9基因组DNA酶切,酶切的C79-13基因组DNA分成两份,分别与接头1和接头2R连接,然后进行两轮杂交和两轮PCR ,得到消减混合物, 将其与PCR?2.1克隆载体连接,转化感受态E.coli DH5α建立消减文库。结果共获得400个阳性克隆;筛选240个克隆制备质粒进行PCR检测,均扩增出100～2000 bp大小的片段。差异DNA消减文库的构建为进一步筛选、克隆鸡白痢沙门氏菌特异的未知新基因、建立分子鉴别新体系奠定了基础。 相似文献
42.
大肠杆菌猪水肿毒素B亚单位基因的克隆与鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
根据已知大肠杆菌志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体Ｂ亚单位（ＳＬＴ－ＩＩｖＢ）基因序列,设计并合成３条２对引物,以大肠杆菌Ｏ１３８基因组为模板,通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）分别扩增出２０４ ｂｐ的基因序列及包含一段信号肽的２６１ ｂｐ基因序列。将这两段ＤＮＡ分别克隆进表达性载体质粒ＰＹＡ３３３４的ＥｃｏＲⅠ和ＢａｍＨⅠ位点之间,经地高辛标记探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和酶切分析鉴定,并对两条扩增片段进行序列 相似文献
43.
44.
45.
鸡沙门氏菌弱毒苗与微生态制剂联合应用的效果 总被引：4，自引：0，他引：4
将鸡沙门氏菌弱毒苗分别与2种不同的微生态制剂配合对AA肉鸡实施免疫。结果表明，弱毒苗单独应用组、联合应用1组和2组的免疫保护效率分别为75％、90％和90％，均与攻毒对照组（40％）存在显著差异（P＜0．05）；攻毒20d后所有存活鸡细菌分离结果显示，上述3个试验组细菌分离率分别为53．5％、55％和5．5％，也均与攻毒对照组（75％）存在显著性差异（P＜0．05）。由此认为，该弱毒苗与上述微生态制剂联合应用的效果明显，具有较好的应用前景。 相似文献
46.
47.
单克隆抗体技术自1975年问世以来,已广泛应用于生物医学科学的各个领域,获得一系列新认识、新理论和新方法,促进了有关学科的发展。而且在国际市场上,尤其以医学临床实践的单抗试剂已成为强大的产业,在农牧业方面,单抗盒已成为很多动物疫病等诊断和检疫的重要工具。 一、动物用单抗研究的概况:动物用单抗在全世界范围内蓬勃展开总体经历三大阶段,即单抗建株、鉴定;应用研究;产业化(研究)。同时,单抗技术本身也得到很大发展,特别是近年来单抗与分子生物 相似文献
48.
49.
沙门氏菌高分子量核ＤＮＡ的提取蔡学忠，焦新安，刘慧谋，张如宽，刘秀梵（江苏农学院动物医学系，扬州２２５００９）提取细菌核ＤＮＡ常用的方法有：一种是裂解细菌、用等密度线性梯度超速离心的方法，另一种是以ＣＴＡＢ去除细菌多糖和蛋白质，用酚、氯仿进行抽提。但... 相似文献
50.
单抗竞争ELISA检测猪沙门氏菌感染方法的建立与应用 总被引：5，自引：0，他引：5
以猪霍乱沙门氏菌作为包被抗原 ,利用沙门氏菌O7单克隆抗体酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪霍乱沙门氏菌抗体。经过研究确定抗原包被浓度为 2×1 0 8CFU/ml,血清检测稀释度为 1∶1 6,酶标抗体浓度为 1∶70 0 ,包被液为碳酸盐缓冲液 ( 0 .0 5MpH9.6)。应用单抗竞争ELISA和平板凝集试验 (PAT)同时对 5 0 6份血清进行猪霍乱抗体检测 ,PAT的检出率为 3 .60 % ,ELISA检出率为 5 .75 % ,两者符合率达 96.4%。试验结果表明 ,ELISA方法敏感性高 ,特异性强 ,稳定性和重复性好 ,操作简便。本方法的建立在猪群沙门氏菌感染的检疫、实验室诊断的标准化及流行病学调查方面具有应用价值。 相似文献