猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆与原核表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

梁望旺  伍锐  杨克礼  刘泽文  熊忠良  段正赢  邓均华  唐文娟  余爱冬  徐涤平 《湖北农业科学》2009,48(5)

采用RT-PCR方法扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒临床分离株(HBKM2)的ORF5全基因,并进行了测序分析,根据0RF5的结构特点,进一步扩增了截去N端信号肽序列的ORF5(nsORF5),并将其克隆到pGEX-KG原核表达载体,构建了重组质粒pKG-ns5,经酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明,克隆的nsORF5基因与谷胱甘肽转移酶(GST)基因获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-nsGP5分子量约为43kD,并具有反应活性,这为进一步研究PRRSV GP5蛋白的功能及新型疫苗、血清学诊断方法的研制奠定了基础.  相似文献   

12种猪病血清学调查及病原学检测结果辨析   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐涤平  梁望旺  杨克礼  伍锐  熊忠良  刘泽文  段正赢 《湖北农业科学》2008,47(10)

在湖北省、湖南省、江西省及广西壮族自治区的30个猪场,采集了750份血样、150份病死猪的组织样品,进行了CSF等12种猪病的血清学调查和病原学检测.结果显示,12种疫病中,虽然某些疾病的免疫抗体阳性率较高,但存在不同程度的野毒和致病菌的感染,由于采取了免疫和药物预防措施,某些疾病得到了有效控制.对调查与检测结果进行了分析,并就如何加强这些疫病的防控提出了建议.  相似文献   

谈谈“网络神兽”羊驼的养殖前景     

熊忠良 《农家顾问》2015,(3):44-45

羊驼,别名美洲驼、无峰驼。原产于南美高原山区的秘鲁、阿根廷及智利等国,被称为秘鲁的国宝。羊驼为偶蹄目骆驼科成员,是一种长得既像羊又像骆驼的动物,因其"超萌"的外型,被广大网民称为"神兽"。现在世界上约有羊驼300万只左右,约有90%以上生活在南美洲的秘鲁及智利的高原上,其余主要分布在美国、澳洲和新西兰等国。羊驼也能适应我国的自然环境。2002年山西农业大学首先从澳大利亚引进南美羊驼,并驯养成功,开创我国羊驼养殖的新篇章。目前我国山西、新疆、  相似文献   

猪瘟等三种疫病的免疫试验     

段正赢  刘泽文  梁望旺  杨克礼  熊忠良  邓均华  郭锐  周丹娜  徐涤平  田永祥 《黑龙江畜牧兽医》2011,(19)

为了研究猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)及猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗免疫猪群前后的抗体水平及免疫干扰现象,试验取20日龄仔猪50头,分组后于不同日龄应用以上3种疫苗进行免疫,并检测猪群免疫前后的抗体水平;同时另取18头仔猪,以高致病性猪蓝耳病灭活疫苗免疫,作对照试验。结果表明:仔猪免疫CSF活疫苗的日龄有待进一步探讨,CSF抗体ELISA检测方法比IHA方法可靠;仔猪于20,304,0日龄时免疫PR gE基因缺失活疫苗,均不会对母源抗体造成干扰;PRRS灭活疫苗及高致病性猪蓝耳病灭活疫苗如何使用尚需探讨。  相似文献   

湖北省仔猪致病性大肠杆菌血清型鉴定   总被引：13，自引：1，他引：12  

王红琳  熊忠良  周绍凤  徐涤平  段正赢 《动物医学进展》2002,23(3):68-69

从湖北省27个猪场典型病例中采集了152份病料，分离并鉴定其中132份病料的病原为致病性大肠杆菌。通过22种主要致病性大肠埃希氏菌O抗原的血清型鉴定，132株致病性大肠杆菌中定型了120种，共有15种血清型，其中O107、O101、O93、O9、O139、O141和O157为优势血清型。O107、O93作为猪致病性大肠杆菌优势血清型在我国少见报道，尚有12株未能定型。  相似文献   

猪病混合感染对临床诊断的影响     

徐涤平  杨克礼  梁望旺  刘泽文  段正赢  熊忠良  伍锐 《安徽农业科学》2007,35(36):11847-11848

[目的]寻求科学的解决猪病的混合感染问题。[方法]分析近几年猪病的流行特点,归纳出几种常见的混合感染,探讨混合感染对临床诊断的影响,分析其科学原理。[结果]应采取综合防制,包括:搞好科学的免疫工作;从各方面减少病原微生物积累与传播,尽量减少应激因子,增强猪体抵抗力等。[结论]该文为解决猪病的混合感染提供了理论基础。  相似文献   

规模化猪场仔猪致病性大肠埃希菌分离株的药敏试验     

王红琳  熊忠良  廖永洪  段正赢  徐涤平  杨峻 《动物医学进展》2007,28(8):107-110

从湖北省3个规模化猪场45份典型仔猪黄、白痢病料中分离出大肠埃希菌.对其中40株经22种主要致病性大肠埃希菌O抗原定型血清鉴定,其中定型36株,4株未能定型,结果分属于9种血清型.用13种抗菌药物进行药敏试验,结果3个猪场分离的致病性大肠埃希菌对13种药物的敏感性各不相同.选择两种高度敏感药物,在3个相对应猪场进行临床治疗,疗效明显.  相似文献   

猪肺组织中分离的致病性大肠杆菌血清型鉴定   总被引：1，自引：1，他引：0  

王红琳  熊忠良  周绍凤  徐涤平  段正赢  刘泽文 《动物医学进展》2004,25(3):98-99

从湖北、湖南、河南、江西、广东等省 2 0个猪场的 1 1 4份肺组织病料中 ,分离获得 3 8株(占 3 3 .3 % )大肠杆菌 ,通过 2 2种主要致病性大肠埃希氏菌 O抗原定型血清鉴定 ,均确定为致病性大肠杆菌 O型菌 ,并分属于 1 6种血清型 ,其中 O14 7、O14 1、O157、O9为优势血清型 ,占 60 .5%(2 3 / 3 8)。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒HBKM2株ORF7基因的克隆、序列分析及原核表达     

梁望旺  熊忠良  刘泽文  杨克礼  伍锐  邓均华  段正赢  余爱冬  唐文娟  徐涤平 《安徽农业科学》2009,37(35):17406-17408

[目的]对猪繁殖与呼吸综合征病毒HBKM2毒株核蛋白编码基因ORF7进行研究,为进一步了解其编码蛋白的功能和研制新的血清学诊断方法奠定基础。[方法]采用RT—PCR方法扩增HBKM2株的DR胛基因,然后利用DNAStar软件包对克隆的序列进行序列分析,将ORF7基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX—KG上,构建重组表达质粒pKG—N。将重组质粒转化到大肠杆菌B121。并经IPTG诱导表达,最后利用Western-blot对表达蛋白的免疫反应活性进行鉴定。[结果]HBKM2毒株的0R刀基因长约372bp;序列分析表明与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的同源性达99％以上;SDS—PAGE表明克隆的0R几基因在大肠杆菌中获得了高效融合表达：Western-blot分析表明,重组蛋白GST—N能够与PRRSV高免猪血清发生特异性的免疫反应。[结论]成功地扩增了ORF7基因。且GST-N融合蛋白能在大肠杆菌中高效表达。  相似文献   

猪传染性胸膜肺炎病原学研究进展   总被引：4，自引：1，他引：3  

梁望旺  伍锐  杨克礼  熊忠良  刘泽文  徐涤平 《安徽农业科学》2008,36(13):5455-5457

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的,该病是一种呼吸道疾病,影响着全世界养猪业的发展。综述了猪传染性胸膜肺炎的病原学研究进展,为该病的诊断及研究高效的猪传染性胸膜肺炎疫苗提供理论依据。  相似文献