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以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板，PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5’末端保守区基因片段(OMPc)，酶切及核苷酸序列分析鉴定后，与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接，构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc，转入大肠杆菌B121中，以IPTG进行诱导，SDS-PAGE电泳分析发现，转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34kD，与实际预测相符，命名为GST-OMPc。GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测。结果表明：纯化蛋白GST-OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应。OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础。 相似文献
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猪白介素18成熟肽基因在真核细胞中的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
为了获得有活性的猪白介素18(IL-18),本实验是将猪白介素18的成熟肽基因片段连接到真核表达载体上,用脂质体转染的方法将真核阳性质粒转染仓鼠肾细胞BHK21,经过G418抗性筛选,利用SDS-PAGE电泳分析表明表达的猪IL-18成熟肽在转染后的细胞上清中,同时收取转染后的细胞提取总RNA并除掉其中的DNA后通过RT-PCR方法扩增出500bp左右的DNA务带,证明已经得到可以稳定传代培养的能分泌猪IL-18蛋白的细胞系. 相似文献
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牛结核病体外免疫诊断技术 总被引：1，自引：1，他引：0
牛分支杆菌感染的主要特征是引起 细胞免疫反应。现在牛结核病的诊断试验是 以T细胞反应机制为基础的。低敏感性的结 核血清学试验是不值得提倡的,血清学试验 最好作为细胞学试验的补充而不是替代。最 近,发现了牛结核γ干扰素试验是一种快速 的(24h)惟一使用全血的体外试验,该方法 在澳大利亚应用,结果表明,比传统的结核菌 素法诊断牛结核更敏感。假阳性反应的难题 归因于所使用的抗原制品间的交叉反应特 性,设动物对牛PPD和禽PPD的γ干扰素反 应作对照可解决假阳性的问题。虽然牛结核 特异性蛋白已确认并被分类,这些特异性蛋 白可能在血清学或细胞学诊断试验中使用, 但是它们可能因牛对牛分支杆菌感染的免疫 反应的遗传多样性而受到限制。 相似文献
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腐蹄病(Footrot)是由坏死梭杆菌(Fusobacterium necrophorum,F.necrophorum)和节瘤拟杆菌(Baeteroides nodosu,B.nodosus)协同感染引起反刍动物趾间皮肤及深层软组织的一种高度接触性传染病,以动物蹄部组织的化脓坏死性分解、腐败恶臭和角质形成受到破坏为主要特征。腐蹄病自1960年Adams首次报道以来,该病在美国、比利时、荷兰、日 相似文献
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为了验证采用切向流超滤的方法浓缩蓝耳病疫苗半成品对提高其效价的效果,我们作了多次浓缩试验,并于每次试验之后进行TCID50检测。选取其中4次试验的样品灭活乳化成苗,进行仔猪的免疫试验,于免疫后21日采血分离血清做ELISA检测。从动物试验的检测结果来看,浓缩后的仔猪阳性率高于浓缩前,证明以超滤的方法提高蓝耳病疫苗半成品的效价是可行的。 相似文献
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