排序方式： 共有67条查询结果，搜索用时 328 毫秒
21.
人表皮生长因子的基因克隆与原核表达 总被引：1，自引：1，他引：1
采用RT-PCR方法从人胎盘组织中扩增出hEGF基因,将其分别连入表达载体pGEX-4t-1(+)和pGEX-6p-1(+)质粒中,并转化入BL21-CodonplusTM中,解决了大肠杆菌密码子偏爱性问题,不需附加程序就可以编码稀有密码子的重组基因。SDS-PAGE结果证明,pGEX-4t-1(+)-hEGF和pGEX-6p-1(+)-hEGF分别在大肠杆菌BL21(DE3)-CodonplusTM-RP和BL21(DE3)-CodonplusTM-RIL中获得高效表达,目的蛋白占总菌体蛋白的30%左右。 相似文献
22.
动物细胞大规模培养技术研究进展 总被引：2，自引：0，他引：2
利用动物细胞大规模培养技术可生产多种生物制品,为提高细胞活力和细胞生长密度,采用有多种添加成分的无血清培养基培养细胞,选择既有利于细胞生长又可提高培养细胞密度的微载体和条件温和、易操作、气体交换速度快的生物反应器,在线监控细胞生存环境和生理活动,减少培养过程中培养基的抑制因素,从而给细胞提供更好的生存环境;另外通过向细胞中导入抗凋亡基因,可减缓细胞凋亡的发生,提高细胞活性和蛋白产量;此外,在动物细胞大规模培养过程中,利用多孔微载体能高效、大量地增殖细胞,具有良好的应用前景. 相似文献
23.
在人和小鼠等的 TGFβ2 基因序列基础上 ,选用 1对同源性引物 ,采用反转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)技术从山羊卵泡总 RNA中扩增出 2 73bp的 TGFβ2 c DNA片段 ,进行序列测定 ,由此 c DNA序列推出了相应的 TGFβ2 蛋白分子的氨基酸排列。比较了山羊与人、小鼠、大鼠的 TGFβ2 部分 c DNA核苷酸的同源性和氨基酸的相似性 ,核苷酸同源性分别为 91.9% ,87.5 %和 88.6 % ;氨基酸相似性分别为 97.8% ,96 .7%和 96 .7%。 相似文献
24.
比色法测pH与电位法比较相差约0。3pH单位。离子强度的影响是比色法测定pH值的一个重要因素。本文依据西北黄土中8种主要水溶性离子浓度数据,通过计算黄土中离子强度校正系数,以消除离子强度的影响。在分析方法上采用了甲酚红双色指示剂,由双波长数据线性回归求pH值。 相似文献
25.
采用细菌16SrDNA的PCR-RFLP技术,以西北地区土垫旱耕人为土为材料,模拟田间过量施肥水平,经室内恒温短期培养,研究了过量施肥下酰胺态氮、硝态氮和铵态氮对土壤细菌多样性的影响。结果显示：PCR-RFLP分析酰胺态氮（T1）、硝态氮（T2）和铵态氮（T3）过量施肥处理的细菌16SrDNA克隆文库,分别得到17、25和130个酶切分型,不施肥对照（CK1）和正常施肥对照（CK2）分别得到119和187个酶切分型,表明正常施肥处理的酶切分型最多,过量使用酰胺态氮和硝态氮减少了酶切类型,而过量施用铵态氮可以维持与不施肥对照相近的酶切类型数量。采用α多样性测度对试验结果进行分析统计表明,不同处理间土壤细菌的多样性指数（H＇、Ds）和物种丰富度指数（dM）a均为CK2〉T3〉CK1〉T2〉T1处理,表明合理施肥可显著增加土壤中细菌的多样性,而过量施用酰胺态氮则减少细菌的多样性,使用铵态氮处理可维持细菌多样性;除正常施肥对照（CK2）外,其余各处理都出现了优势菌种。通过对优势菌的16SrDNA序列比对发现,酰胺态氮处理都为未培养细菌,硝态氮处理和铵态氮处理的优势菌呈现了菌属多样性,前者包括变形菌门的假单胞菌属和寡养单胞菌属、芽单胞菌门的未培养芽单胞菌属和未培养土壤细菌,后者为未培养酸杆菌属、变形菌门寡养单胞菌属和厚壁菌门芽孢杆菌属,表明不同施肥方式改变了土壤细菌的群落结构。 相似文献
26.
利用气相色谱法测定了陕西省4种土壤中中性糖的组成。单糖测定采用糖醇乙酸酯衍生化方法,色谱固定相选用3％OV-225/Chromosorb。对100μg/mL的糖标准混合液分析的标准差(SD)在±1.748～±4.200之间。土样经过溴仿-乙醇重液(d=2.00)处理,去除了未分解和半分解状态的植物残体。通过H_2SO_4水解,分别测定了鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖的含量。土壤水解液中添加葡萄糖标准液后的回收率在98.6％～104％之间。对硼酸盐和铁的干扰也作了讨论。 相似文献
27.
水分胁迫下磷对玉米叶片光合色素的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
采用水培实验，以ＰＥＧ进行水分胁迫（－０．５ＭＰａ），测定了有磷和缺磷情况下玉米苗期叶片中叶绿素、类胡萝卜素及原叶绿素酸酯随不同胁迫周期的变化。结果表明，水分胁迫时磷能使叶绿素ａ和类胡萝卜素降解减慢，表现为Ｃｈｌａ／ｂ值增大及Ｃｈｌｔ／Ｃａｒｏ值随胁迫周期延长而呈Ｖ．型曲线变化。干旱缺磷能造成原叶绿素酸酯相对积累，是导致Ｃｈｌａ下降的重要因素。水分胁迫下叶绿素ａ，ｂ和Ｃａｒｏ及Ｐｃｈｌ含量均呈下降趋势，而交替变换水处理能减缓光合色素的分解 相似文献
28.
为了得到具有生物学活性的人表皮生长因子(hEGF),将含有人表皮生长因子基因的原核表达载体pGEX-4t-1(+)-hEGF转化入BL21-CodonPlusTM-RP表达宿主菌进行大量表达,SDS-PAGE分析表明,融合蛋白主要以包涵体的形式存在。收集包涵体,用氧化复性的方法,加入还原型的谷胱甘肽进行复性,之后通过GlutathioneSepharoseTM4B纯化柱,分离纯化得到复性的融合蛋白。以兔抗人EGF单克隆抗体为一抗,进行Western blotting鉴定,证明分离纯化得到的融合蛋白含有目的蛋白hEGF。最后对复性的融合蛋白进行了活性分析,表明该融合蛋白具有良好的hEGF生物学活性。 相似文献
29.
人胰岛素样生长因子Ⅱ基因的克隆与表达 总被引：1，自引：0，他引：1
采用RT-PCR方法成功地从人胎盘组织扩增出hIGF- 基因。将其连入表达载体pET30a(+)质粒中,SDS-PAGE结果证明,pET30a(+)-hIGF- 在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,目的蛋白占总菌体蛋白35%左右。 相似文献
30.
ATP硫酸化酶(ATP sulfurylase,ATPS,EC 2.7.7.4)广泛存在于动物、植物、微生物中,可催化ATP和 SO42-生成APS和PPi,也可以催化此过程的逆反应.用Genbank公布的的油菜ATPS全长序列与甘蓝、拟南芥以及洋葱的序列进行比对,得到一段保守性比较强的序列.采用RT-PCR方法从油菜'秦优8号'的叶片获得880 bp长的cDNA片段,命名为RATPS_8.序列分析和比对结果表明:RATPS_8与已报道的甘蓝、芥菜和油菜的基因同源性分别为95%、92%和91%,进化树聚类分析和预测氨基酸的BLAST结果证实,RATPS_8为油菜'秦优8号'ATP硫酸化酶的部分基因片段. 相似文献