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禽脑脊髓炎灭活油乳剂疫苗的研制 总被引:4,自引:0,他引:4
将AEV-VR株接种于6日龄SPF鸡胚卵黄囊,孵化至16日龄时迫,要集鸡胚毛尿囊膜,尿囊液,胚体称重,研磨,离心取上清液加入福尔马林灭活,以灭菌PBS稀释成1:1、1:10、1:20三种浓度,加入吐温-80制成水相,另以白油,司斑-80和硬质酸铝煮沸灭菌制成油相,搅拌混合制成不同浓度的灭活油乳剂疫苗,分别免疫2日龄SPF雏鸡,安全可靠。用AEV-VR、AEV-1143、AEV-NH937三株混合毒 相似文献
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将AEV-VR株接种于6日龄SPF鸡胚卵黄囊,孵化至16日龄时迫杀,采集鸡胚绒毛尿囊膜、尿囊液、胚体称重,研磨、离心取上清液加入福尔马林灭活,以灭菌PBS(pH7.2)稀释成1:1、1:10、1:20三种浓度,加入吐温-80制成水相,另以白油、司斑-80和硬质酸铝煮沸灭菌制成油相,搅拌混合制成不同浓度的灭活油乳剂疫苗,分别免疫2日龄SPF雏鸡,安全可靠.用AEV-VR、AEV-1143、AEV-NH937三株混合毒做攻毒试验证明1:1稀释的灭活苗效果最好,保护率可达100%.用AEV-VR,AEV-1143、AEV-NH937及以上三株混合毒同法制成1:1浓度的灭活油乳剂疫苗,分别免疫2日龄商品雏鸡后用其相应的毒株做攻毒试验,表明该疫苗是安全的,而且可使免疫鸡抵抗AEV的感染,具有良好的免疫效果. 相似文献
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为研究重组人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA及蛋白表达的影响,本研究采用组织块法体外培养和纯化出BMEC。以不同浓度(0、1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL)重组人TNF-α作用BMEC,分别于不同时间(12 h、24 h、48 h、72 h)采用实时荧光定量RT-PCR和western blot方法检测α-SMA mRNA相对表达量及其蛋白表达。结果显示,α-SMA mRNA相对表达量12 h TNF-α处理的各组及24 h,10 ng/mL处理组与对照组相比差异显著(p<0.05);随着TNF-α浓度的升高,α-SMA mRNA的相对表达量呈升高趋势;48 h和72 h处理组与对照组相比差异不显著。表明TNF-α对BMECα-SMA mRNA的表达有一定促进作用。然而,α-SMA的蛋白表达量却很低,只有24 h 10 ng/mL处理组检测到目的蛋白的表达。研究表明,外源性TNF-α能够促进BMECα-SMA mRNA和蛋白的表达。 相似文献
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定殖烟草根结线虫卵和雌虫机会真菌的多样性 总被引:1,自引:0,他引:1
机会真菌对根结线虫的生物防治具有巨大潜力。本研究于2010—2011年针对来源于中国7个省份的156份烟草根结线虫样本,分别分离根结线虫游离卵、卵块和雌虫上定殖的机会真菌。应用18S rDNA-ITS片段测序结果结合菌株的形态学观察和培养性状鉴定定殖游离卵、卵块和雌虫上的真菌。根据分离到菌株的培养性状、形态学和rDNA-ITS序列分析,对定殖于南方根结线虫或北方根结线虫的9 839个游离卵、408个卵块和284个雌虫的真菌菌株,明确鉴定出9属13个种,其中定殖根结线虫新记录种5个,即长梗木霉、芬芳镰刀菌、渐狭蜡蚧菌、虫草棒束孢和交枝顶孢。淡紫紫孢菌Purpureocillium lilacinum(原名:淡紫拟青霉)为优势种,分布广泛,在云南、安徽、湖北、贵州和山东省均被分离到。该菌在南方根结线虫和北方根结线虫的游离卵、卵块和雌虫平均分离率分别为0.49%、24.00%和16.90%,说明其地理和生态适应性广泛。不同地区来源的烟草根结线虫卵和雌虫上定殖的机会真菌种类存在明显差异。目前尚无渐狭蜡蚧菌和虫草棒束孢作为线虫病原物的报道,有待于进一步深入研究其对根结线虫的致病性。 相似文献
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毒株、苗龄及温度对烟草苗期接种TMV试验的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
病毒株系、苗龄、接种后培养条件是影响烟草病毒病发生发展的关键因素,为确保烟草接种TMV抗性鉴定和药效生测试验的准确性,在N基因烟草和普通烟草上接种TMV,采用病毒生物学、qRT-PCR和Western blot技术,研究病毒的分离纯化、株系、稀释限点、传导路径、病害症状,以及N基因抗TMV的温敏性。结果显示,TMV为U1株系,在K326上活体保存50~65 d,仍具有较强的致病力,稀释限点为105,接种物浓度以102稀释为宜。接种后TMV先由接种叶传导到主茎,向下至根、向上至心叶,然后是上部叶,最后传导至下部叶,12~16 d布满全株,21~28 d花叶畸形显著,病情调查宜在2~3周内。温度和苗龄影响N基因烟草对TMV的抗性反应,培养温度应在25℃~27℃,苗龄以6~7叶期为宜。 相似文献
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