猪流行性腹泻病毒RT-PCR鉴别诊断方法的建立     

吴玉璐  程群  虞凌雪  侯怡轩  王康  刘光清  童光志  周艳君 《中国农业科学》2013,46(20):4370-4377

【目的】 利用RT-PCR技术建立一种在临床上便于区分猪流行性腹泻病毒（PEDV）自然感染与疫苗免疫毒株的方法。【方法】根据GenBank公布的PEDV ORF3基因序列,在其存在基因缺失区两端的保守区域设计特异性引物,对近两年采集的仔猪腹泻样品进行检测,分析流行毒株的ORF3基因,选择部分阳性样品利用鉴定引物进行RT-PCR扩增,优化其反应体系、Tm值等条件,进行鉴别诊断方法的特异性、敏感性试验,并对大量临床样品进行检测验证。【结果】从新发仔猪腹泻临床样品中克隆获得了11株PEDV的ORF3基因,序列分析显示新分离的9株ORF3基因不存在缺失,属于自然感染野毒,其与疫苗株的核苷酸同源性为95.8%—97.1%。建立的鉴别诊断方法可以特异性扩增PEDV的ORF3基因,其中获得的PEDV自然感染毒株基因片段大小约300 bp ,而弱毒疫苗株则为250 bp左右;该鉴别诊断方法与其他猪源病毒无交叉扩增,其敏感性可达到100TCID50/0.1mL,对仔猪腹泻临床样品检测结果显示,PEDV自然感染的阳性率为65.4%。【结论】 初步建立了基于PEDV ORF3基因的RT-PCR鉴别诊断方法,该方法可以用于区分自然感染的野毒和弱毒疫苗免疫毒株,为PEDV的疫情诊断和流行病学监测提供了一种特异、快速的检测方法。  相似文献   

大片段DNA遗传转化的研究进展     

石玉  蒋世翠  张美萍  孙春玉  王康宇  王义 《北方园艺》2013,(15)

DNA克隆技术是分子生物学研究中一项重要的技术手段.随着分子生物学技术的发展及植物基因组计划的进行,产生了既能够克隆大片段DNA又能够将候选基因利用农杆菌介导法进行遗传转化试验的载体.现对大片段克隆栽体的发展及大片段DNA遗传转化的影响因素进行综述,并对大片段DNA遗传转化的发展作了展望.  相似文献   

人参发状根的相关研究进展     

陆明海  张美萍  李俐  王康宇  赵明珠  林彦萍  孙春玉  王义 《分子植物育种》2018,(11)

人参发状根具有生长速度快、激素自养、皂苷含量高等特点,是大规模生产人参皂苷的有效途径。本综述在发根农杆菌转化机理、诱导体系建立、发状根鉴定研究的基础上对Ri质粒作用机理、影响诱导率的因素、人参发状根的形态及分子鉴定进行了重点分析,并对今后急需研究的几个方向进行了展望,以期为人参发状根的有效开发和合理利用提供参考。  相似文献   

植物对非生物胁迫的响应机制研究     

刘燕敏  周海燕  王康  闫洪朗  徐建平  吴俊平  魏小云  何林池 《安徽农业科学》2018,46(16)

从激素、渗透调节物质、活性氧清除系统和蛋白质4个方面综述了植物应对非生物胁迫的机制,并展望了植物应对非生物胁迫今后的研究方向,为提高植物的抗逆性研究提供了理论依据。  相似文献   

江浙沪地区甜瓜品种果实性状遗传多样性分析          下载免费PDF全文

闫洪朗  王康  何林池  魏小云 《南方农业学报》2018,49(10):2001-2006

[目的]分析江浙沪地区种植的65个甜瓜品种果实性状的遗传多样性,为甜瓜优质新品种的选育与推广提供参考依据.[方法]对江浙沪地区种植的65个甜瓜品种的5个质量性状和10个数量性状进行测定,并进行相关性分析、主成分分析及遗传多样性评价.[结果]甜瓜品种的单果鲜重、果实纵径、果形指数、果肉厚度、果腔纵径和可溶性固形物含量边心差等6个性状的变异系数较大,分别为52.33%、37.63%、51.80%、33.09%、42.84%和39.48%;15个性状的平均遗传多样性指数为1.64,其中果皮底色和果肉颜色两个质量性状与单果鲜重、果腔纵径、果腔横径、果肉厚度、果实纵径、果实横径、边缘可溶性固形物含量、中心可溶性固形物含量及可溶性固形物含量边心差等9个数量性状的遗传多样性指数均大于1.50,表明65个甜瓜品种果实性状上具有丰富的遗传多样性.相关性分析结果表明,甜瓜品种果实多个性状间呈极显著相关(P<0.01).利用主成分分析可将所有品种划分为厚皮甜瓜和薄皮甜瓜两个类型,其中,薄皮甜瓜遗传多样性水平较高,厚皮甜瓜遗传多样性水平偏低.[结论]江浙沪地区种植的甜瓜品种果实性状遗传差异明显,其中厚皮甜瓜品种的遗传基础较狭窄,需引进新的种质资源拓宽其遗传基础.  相似文献   

基于改进型支持度函数的畜禽养殖物联网数据融合方法   总被引：4，自引：4，他引：0  

段青玲  肖晓琰  刘怡然  张璐  王康 《农业工程学报》2017,33(Z1):239-245

物联网技术已广泛应用在畜禽养殖中,针对畜禽养殖物联网中数据异常实时检测以及多源感知数据融合的需求,该文提出了一种畜禽养殖物联网数据融合模型。首先对传感器采集到的原始数据进行一致性检测,确保数据准确性;其次针对来自同类型传感器的多源同构数据,采用基于改进型支持度函数的加权算法进行数据融合处理,提高融合数据准确度;最后根据畜禽养殖物联网编码规则和数据组织格式,对畜禽养殖过程中的异构感知数据进行统一描述并转换为标准数据格式,为数据分析和应用提供数据基础。该文采用实际生产中的生猪养殖物联网数据进行试验,结果表明:在数据一致性检测阶段,异常数据检测率为96.67%,保证了数据质量;在多源同构数据融合计算中,该文提出的改进型支持度函数与高斯型、新型2种支持度函数相比融合方差最小,为0.192 5,能够有效提高数据融合准确度,满足畜禽养殖物联网数据分析要求。  相似文献   

犯罪目的与犯罪动机在司法实践中的区分价值——以一起过失致人死亡案为例     

王康 《四川畜牧兽医学院学报》2012,(7):47-50

犯罪目的与犯罪动机既有联系,也有区别,二者在刑事案件中对案件的定罪及量刑均有一定的影响。犯罪目的是指行为人通过犯罪想要达到的效果,是犯罪的构成要件之一;犯罪动机在人的需求无法得到满足的过程中形成,针对的是为什么犯罪的问题。相对于犯罪目的而言,犯罪动机更能反映行为人的主观恶性,对于案件的定性更为重要。针对文中提出的案例,应以过失致人死亡罪定罪。  相似文献   

农牧交错带不同利用方式下土壤菌群数量及剖面分布特征     

甄莉娜  王康  杨俊霞  张英俊 《中国草地学报》2012,34(2):87-92

应用稀释平板法对农牧交错带天然草地、耕地、退耕还草地及撂荒地几种不同土地利用方式下0～50cm土层可培养的细菌、真菌和放线菌数量进行研究,结果表明:同一种利用方式下各类菌群数量为细菌>放线菌>真菌。在不同利用方式下,细菌的数量天然草地>五年生羊草地>耕地/五年生苜蓿地>撂荒地;真菌的数量撂荒地>五年生羊草地>五年生苜蓿地>天然草地>耕地;放线菌数量在天然草地中最多,撂荒地及五年生苜蓿地中数量最少。三类菌群在0～50cm土层中基本上都表现为0～10cm含量最多,往下逐层递减的趋势。退耕地种植羊草对土壤微生物数量的增加效果好于紫花苜蓿。  相似文献   

保护地黄瓜霜霉病的无公害防治     

黄鸿  王康  康蕾  刘红 《上海蔬菜》2004,(6):62-63

随着我市保护地黄瓜重茬次数的增多，加之生育期栽培管理措施的不当，使保护地黄瓜的多种病害相继发生，造成危害，特别是黄瓜霜霉病的发生最普遍，严重影响黄瓜的产量，一般减产幅度为20％-50％，有的植株刚结瓜就会全株枯死。面对黄瓜生产上存在的问题，我们采用无公害防治技术，  相似文献   

沼液叶面肥对水稻生长的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

王康  吴家旺  戴辉  施兵  张家宏 《江苏农业科学》2019,(15)

沼液作为沼气的副产物,含有丰富的氮、磷、钾等营养元素和钙、铜、铁、锌、锰等中微量营养元素,同时还含有多种氨基酸、植物激素和维生素等,将其在水稻生产上资源化利用,对于沼气工程发展和提高水稻品质具有重要的现实意义。喷施不同量的以沼液为母液生产的叶面肥,研究其对水稻生长和产量的影响。以不喷叶面肥为对照(CK),根据1 hm~2水稻在分蘖期、孕穗期和灌浆期喷施叶面肥量设置3个处理:CL1(6.00、6.00、3.00 kg)、CL2(7.50、7.50、3.75 kg)和CL3(9.00、9.00、4.50 kg),加水稀释到450 kg喷施。结果表明,喷施合适量叶面肥能有效促进水稻生长、提高产量和效益,超过一定量反而会导致水稻减产;其中CL2整体效果最佳,有效穗数、千粒质量、产量和效益分别提高17.2%、4.5%、15.4%和4 331.4元/hm~2。  相似文献