猪流感病毒NP蛋白单克隆抗体的制备与鉴定     

李鸽  刘肖  李青梅  杨艳艳  王彦红  张改平 《河南农业科学》2019,48(8)

为了制备猪流感病毒(SIV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(MAb),采用差速离心法纯化H1N1和H3N2亚型SIV后交叉免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过建立的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)单克隆抗体检测方法进行筛选。获得3株能稳定分泌抗NP蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为16D5、18G8和20C4,将它们诱导小鼠产生的腹水IPMA效价分别为1×10~(-6)、1×10~(-6)和1×10~(-5)。亚型鉴定结果显示,3株单克隆抗体的重链均为IgG1,轻链为κ链。3株单克隆抗体特异识别H1N1、H3N2、H5N1、H7N9和H9N2亚型流感病毒,并且与猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒无交叉反应。Western blot检测结果表明,3株杂交瘤细胞培养上清均在56 ku附近出现一条特异性的蛋白质条带,说明针对SIV的NP蛋白制备了3株单克隆抗体。综上,成功制备了针对SIV NP蛋白的3株单克隆抗体,可识别不同亚型的SIV。  相似文献   

复方白头翁散抑制鸡白痢沙门菌生物被膜形成的初步研究     

赵一宁  陈新延  王丽扬  周雯  魏诗谣  王彦红 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2023,(2):47-53

为探讨复方白头翁散防治鸡白痢沙门菌的效果,并研究其抑制细菌生物被膜的机制。从临床样品中分离出鸡白痢沙门菌,对其进行药敏试验,测定其生物被膜的形成能力。体外试验中,检测复方白头翁散对分离菌株的最小杀菌浓度(MBC)、生物被膜的抑制效果、抑制细菌黏附、侵袭效果以及对相关基因sipC、rpoS、rcsC、invA、hilA、csgB、bcsA和pagC表达水平的影响。结果表明：从临床样品中分离出10株鸡白痢沙门菌,这些菌株至少对1种抗生素耐药,多重耐药率为30%,最高为5重耐药;90%分离株可形成生物被膜。复方白头翁散对9株细菌的最小杀菌浓度为62.5 mg·mL^-1;该药可在1/2 MBC浓度使分离株黏附率下降93%,侵袭率下降36%,在1/4 MBC浓度使黏附率下降87%,但使侵袭率升高;实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR, qRT-PCR)分析发现,复方白头翁散下调鸡白痢沙门菌sipC基因表达量,上调其invA、bcsA和pagC等基因表达量。这一研究说明通过调节相关基因的表达水平,复方白头翁散抑制鸡白痢沙门菌生物被膜形成,...  相似文献   

4株荚膜A型多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定     

张竹君  彭欠欠  李娟  王彦红  刘慧谋 《上海畜牧兽医通讯》2013,(3):5-7

2011年7月，从高邮某养殖户两次送检病死麻鸭的肝脏、心脏中分离出4株细菌，对纯化的菌株进行形态学和培养特性的观察、生化反应、血清型PCR鉴定及16SrDNA基因序列分析，确定4株分离茵均为荚膜A型多杀性鸭巴氏杆菌，鸭群所患疾病为该致病菌引起的鸭霍乱。4株分离茵的药敏结果表明，其对氯霉素、强力霉素、萘啶酸等药物多重耐药，而对左氟沙星等药物敏感。  相似文献   

3株松鼠葡萄球菌的鉴定及耐药性分析     

王果帅  王鹏勇  陈革  王彦红 《黑龙江畜牧兽医》2019,(4)

为了对从2017年送检的3个病例中分离得到的病料进行病原菌鉴定,试验采用细菌分离、纯化、生化鉴定及16S rDNA基因PCR扩增与序列分析法进行鉴定,并对分离菌进行药敏试验。结果表明:共分离得到3株分离菌,分别命名为J1、J2、J3株,3株分离菌均能发酵蔗糖和麦芽糖,产酸,不能发酵甘露醇和乳糖;PCR扩增分离菌,得到500 bp的目的条带,与NCBI中已知序列进行比对,均为松鼠葡萄球菌(同源性达99%);3株松鼠葡萄球菌对多西环素、阿莫西林、环丙沙星等药物敏感。说明3株分离菌为松鼠葡萄球菌,其对药物有不同程度的敏感性。  相似文献   

H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体IPMA检测方法的建立     

石建州  李青梅  王彦红  刘肖  李鸽  郭军庆  邓瑞广  张改平 《中国畜牧兽医》2019,(9)

本试验旨在建立一种针对检测抗H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA)筛选方法。通过优化MDCK细胞接毒量、细胞接毒后培养时间、封闭液的种类和工作浓度、工作时间等各个反应条件,并对建立的IPMA筛选方法的特异性、敏感性和重复性进行评价。结果显示,建立的IPMA检测方法的最优反应条件为MDCK细胞接毒10~(2.63) TCID_(50)/100μL H1N1亚型猪流感病毒,37℃培养24 h,含3‰H_2O_2的甲醇室温固定15 min,5%脱脂乳37℃封闭2 h,50μL杂交瘤细胞上清作为一抗,37℃孵育2 h,羊抗鼠HRP-IgG二抗37℃孵育1 h。所建立的IPMA方法能特异性地检测H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体,与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪瘟病毒(CSFV)阳性血清不发生交叉反应;其敏感性检测结果显示,可检测1∶3 200的HI=2~(-9)标准H1N1猪阳性血清;批间和批内重复性试验结果较好。综上所述,本试验成功建立了抗H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体的IPMA检测方法,该方法特异性强、敏感性高、重复性好,为生产鉴定H1N1亚型猪流感病毒单克隆抗体提供了一种简便、实用、有效的检测手段。  相似文献   

信鸽感染寄生虫病病例     

杨跃飞  朱志明  许益民  陶建平  许金俊  王彦红 《中国兽医杂志》2009,45(7)

由于饲养环境和采集习惯,散养家禽普遍存在着寄生虫感染,这些动物感染后呈亚临床症状,出现消瘦,但很少致死.流行病学调查显示,散养家禽都有蠕虫寄生现象[1].四棱线虫、华首线虫和棘口吸虫是寄生于鸡、火鸡、鸽和鸭的腺胃和肠道的常见的寄生虫,单独或双重寄生于鸭或鸡的体内比较多见,但是在临床上首次见到3种寄生虫同时感染鸽,报告如下.  相似文献   

1株多重耐药性鸽源大肠杆菌的分离与鉴定     

张彬彬  邵慧君  王彦红  刘文博 《养禽与禽病防治》2011,(5):6-7

大肠埃希氏菌（Escherichia coli）感染包括急性败血症、肉芽肿、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎、脐炎、脑炎、气囊病以及其他部分或全部由大肠杆菌引起的疾病[1,2]。经研究表明本病在世界各地均有发生,50%以上的菌株有多重耐药性,该病是比较常见的人畜共患病,但是往往被人们所忽视[3]。鸽的大肠杆菌病也是鸽子养殖过程中常见的细菌病,并且鸽是大肠杆菌的一个天然储存宿主[1]。本病  相似文献   

3株松鼠葡萄球菌的鉴定及耐药性分析     

王果帅  王鹏勇  陈革  王彦红 《黑龙江畜牧兽医》2019,(2):96-97,101

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生态和谐 生命和乐——浅谈城市园林绿化的基本功用     

王彦红 《农村科学实验》2018,(3)

园林绿化是城市生态环境的重要影响因素,有利于加强城市生态建设,创建良好的居住环境,实现人与自然的和谐统一。本文简要探讨城市园林绿化的基本功用。  相似文献   

犬口腔鳞状细胞癌的手术治疗及病理学诊断     

黄旭俊  王鹏勇  王彦红  羊扬  高巍  张信军 《上海畜牧兽医通讯》2018,(4)

正口腔鳞状细胞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC),又称口腔鳞癌,是口腔癌的一种病理分型。OSCC起源于口腔角化细胞,是犬口腔肿瘤中第二多发的恶性肿瘤,仅次于黑色素瘤[1]。OSCC常发生于舌、牙龈、上颌窦等部位,早期常表现为表面粗糙的口腔黏膜白斑,随后发展为乳头状或溃疡状。尽管它的相对转移率只有20%,但生长迅速,常可侵入临近骨组织及周围软组织,且极易复发[2]。  相似文献