利用原核及真核表达系统体外表达草鱼Ⅱ型呼肠孤病毒外突VP56蛋白的研究     

盛佳璐  宗乾坤  喻飞  王浩  吕利群 《上海海洋大学学报》2018,27(4):469-476

草鱼Ⅱ型呼肠孤病毒是当前引起我国草鱼出血病的主要流行毒株,VP56是其外层衣壳上的唯一突起蛋白并有可能在病毒入侵阶段发挥核心作用,但该蛋白的具体功能尚不清楚。为了探讨VP56的生物学功能,分别利用大肠杆菌原核表达系统和杆状病毒真核表达系统研究了VP56的体外表达特性。首先从GCRVJX02W株的细胞感染混合物中抽提总RNA,并通过RT-PCR方法获得目的基因VP56,分别克隆至pGEX-4T-3及pFastBacHTA载体上,将质粒pGEX-4T-3-VP56转化至BL21(DE3),经IPTG诱导后,成功表达融合蛋白GST-VP56,大小为83ku,以包涵体形式存在;蛋白经纯化后免疫老鼠,制备了VP56的多克隆抗体,可以和rVP56产生特异性免疫结合。将pFastBacHTA-VP56转化至DH10Bac,成功转座后,提取重组杆粒DNA并鉴定且测序正确后转染SF9昆虫细胞。结果表明,自转染96h起,转染杆粒的细胞生长停滞,不断裂解。Westernblot结果显示,细胞表达重组蛋白His-VP56,大小约为62ku,为可溶蛋白。本研究利用原核表达系统和真核表达系统体外表达了VP56蛋白,制备了抗VP56多克隆抗体,为深入研究VP56蛋白在病毒入侵时的生物学功能奠定了基础。  相似文献   

果园电动履带运输车车架轻量化设计     

范思宇  陆华忠  丘广俊  李君  荀露  王浩 《江苏农业科学》2018,(6)

为实现果园电动履带运输车车架的轻量化,构建车架的有限元分析模型,获取弯曲工况及扭转工况下的车架应力应变分布特点,并进行静态电测试验研究。基于结构优化的方法轻量化设计车架,并对优化后的车架进行有限元校核和模态分析。结果表明,静态电测试验的各测点应力值与模拟计算值基本一致,验证了所构建有限元分析模型的可行性;在满足承载强度及刚度的条件下,轻量化设计后的车身质量减轻8.82%,一阶频率提高11.81%。研究结果为果园电动履带运输车的轻量化设计与结构优化提供了参考。  相似文献   

三金排石汤加减方在输尿管结石围手术期的疗效观察          下载免费PDF全文

孙青风  王浩  王晓鹏  陈保春  田龙江  刘利峰  郭岩松  蔡蔚 《勤云标准版测试》2018,38(2):200-203

目的 观察三金排石汤加减方在输尿管结石围手术期的临床疗效及1年后肾积水改善、结石复发情况。方法 将所选取的135例患者完全随机分为综合治疗1组、综合治疗2组和手术组三组,均予以行输尿管镜碎石取石术、留置D-J管及术后对症治疗,而综合治疗1组间断服用中药半年,综合治疗2组仅术后服用中药半个月。观察3组治疗前后中医证候积分、术后住院时间及血尿清除时间、不良反应发生情况,1年后肾脏积水改善结石复发情况。结果 治疗后综合治疗组、手术组均能明显改善输尿管结石症状,且综合治疗组的疗效明显优于手术组,差异具有统计学意义（P<0.05）;综合治疗组在术后住院时间、血尿清除时间、不良反应发生情况上,均优于手术组,差异具有统计学意义（P<0.05）;在1年后结石复发情况方面,综合治疗1组未见结石复发,与综合治疗2组、手术组比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 在输尿管结石围手术期服用中药三金排石汤加减方能明显降低手术并发症、改善保留D-J管的不良反应及预防结石复发疗效确切,值得临床使用及深入研究。  相似文献   

瓮福上下齐心春销攻坚忙     

王浩 《中国农资》2018,(12)

正本报讯前不久,瓮福(集团)有限责任公司总经理助理陈少平、集团运管部经理刘木福、瓮福农资公司总经理邓军一行前往东北市场调研销售、发运等工作。在春销启动的关键时期,提振了一线销售队伍的士气,提振了合作伙伴的信心。春季的东北市场是各个厂家拼杀的主战场,是每个化肥年度的重头戏。但2018年的东北春销却异常的寂静,由于土地流转价格大幅上涨、肥料价格处于近几年高位等因素,农民的备肥积极性普遍不高。彼时春分已过,播种在即,可是农民、基层门店、经销商和生产厂家依旧处于僵持状态。今年的市场启动晚、时间短、发  相似文献   

笋壳利用现状及其分析——以四川省为例     

王浩  李凯  田瑶  李文洁  陈豪  龚芮影 《农村经济与科技》2018,(9)

四川是全国闻名的竹林大省,在川内许多地区都拥有大片的竹林种植,产有大量的竹笋。而在大力发展竹业的同时,也造成了大量的笋壳堆积。如何正确高效地利用这些废弃资源、减少环境污染成为一个问题。通过对国内外笋壳利用现状进行研究发现,笋壳中含有丰富的可利用的物质,例如木质素、纤维素等,将这些正确地运用起来可以起到保护环境节约资源等作用,同时能够促进四川相对欠发达地区的经济发展。  相似文献   

磷肥施用方式对黄淮地区夏玉米土壤磷素有效性及产量的影响     

窦航宇  阮毅好  张颖蕾  宋苗苗  张义涵  杨留洋  杨青华  王浩 《华北农学报》2024,(1):127-134

为探究黄淮地区适宜的磷肥施用方式,通过开展大田试验对4种磷肥施用方式(常规撒施(P1)、分层施(P2)、条施(P3)、穴施(P4))下玉米不同生育时期干物质积累量、根系形态指标、不同土层土壤速效磷含量及磷酸酶活性、玉米产量及其构成因素进行测定分析。结果表明,不同施磷方式下,P2、P4处理的穗长和行粒数较P1处理显著提高22.57%,16.81%和15.19%,7.60%,P2、P3、P4处理穗粒数较P1处理分别显著提高25.26%,13.86%,17.00%,但P2处理单位面积穗数较P1处理显著降低15.30%,最终P2、P4处理产量较P1分别显著提高15.20%,10.79%。根系性状中,施磷方式显著影响了根长、根表面积、根体积、根尖数,其中P2和P4处理的根长较P1处理显著提高30.41%,33.75%; P2处理根表面积相较于P1处理显著提高23.77%,P4处理根表面积相较于P1和P3处理显著提高29.60%,21.70%;P2和P4处理下的根体积和根尖数较P1和P3处理均显著提高。对土壤速效磷含量分析表明,三叶期10～20 cm的土层中,P2和P4处理速效磷含量较P1显著提高...  相似文献   

鲤疱疹病毒Ⅱ型对异育银鲫背鳍细胞的显微形态与免疫基因表达水平的影响   总被引：1，自引：1，他引：0  

夏思瑶  王浩  Patorida Podok  许丹  姜有声  吕利群  佐野元彦 《水产学报》2016,40(12):1915-1922

为研究鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cy HV-2)体外感染复制特征以及异育银鲫抗病毒免疫应答反应。本实验采用组织块培养法建立了异育银鲫背鳍细胞的原代培养体系。结果显示,在10 d左右可观察到组织块迁移分离出新的单层细胞,3周左右细胞可覆盖底部面积为25cm2培养瓶的底部;经Cy HV-2悬液感染离体培养的原代细胞,3 d后病毒滴度增殖至106拷贝/m L;在病毒感染6 d后出现典型的细胞病变效应;Cy HV-2感染原代细胞后,分析前期通过鱼体水平实验鉴定出的与该病毒感染相关的免疫基因:PNP5a、MPO、MHCⅠ、LYZ-C、IL-11、ITLN、PNP5a和DUSP,Real-time Rt-PCR结果显示大部分基因在细胞水平均有显著性的上调,与鱼体水平实验结果一致。本研究建立了原代培养的异育银鲫背鳍细胞,用于构建体外感染Cy HV-2病毒的细胞模型,为深入研究Cy HV-2的感染复制规律及其与宿主的相互作用关系,以及细胞水平筛选抗病毒药物实验奠定了基础。  相似文献   

木糖醇酸奶的发酵工艺研究     

李洪波  张晶晶  史丽倩  张君颜  王浩  于景华 《安徽农业科学》2016,(28):96-98

[目的]优化得出木糖醇酸奶的最佳发酵工艺。[方法]以还原乳和木糖醇为主要材料,以保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌为发酵菌种发酵生产无糖酸奶。在单因素试验的基础上,通过正交试验优化木糖醇添加量、发酵剂接种量和发酵时间3个因素,确定木糖醇酸奶发酵的最佳工艺。[结果]木糖醇酸奶的最佳发酵工艺:12%还原乳,木糖醇添加量5.5%,发酵剂接种量为1.5%,发酵温度42℃,发酵时间3.5 h。在该条件下发酵的酸奶色泽均匀,酸甜适中,柔和细腻,组织状态稳定。[结论]该产品的研制增加了酸奶的营养保健功能,丰富了酸奶市场,同时为市场开发木糖醇酸奶产品提供了理论依据。  相似文献   

离心压缩机受损叶轮再制造方法   总被引：1，自引：0，他引：1  

王浩  赵世伟  王立文  王涛  丁华鹏  陈董燕 《农业机械学报》2016,47(5):407-412

叶轮是离心压缩机的核心功能部件,极易出现损坏。受损叶轮再制造技术国内面临的主要问题是缺少设计数据。为此,提出一种基于受损叶轮结构特征建立再制造目标模型的方法。设计了离心压缩机受损叶轮的再制造流程;对受损叶轮原始三维点云进行滤波和精简;针对叶轮叶片的损伤区域和未损伤区域,分别提取并拟合叶片截面的边界曲线;重建叶轮叶片的再制造目标模型,通过布尔运算得到叶片损伤部位的三维模型。以离心压缩机受损叶轮为例,进行了再制造实验,再制造后的叶轮误差精度在±0.5 mm范围内,满足工作要求并已投入使用,证明了本方法的可行性。  相似文献   

2015年上半年全国养殖渔情分析报告     

朱泽闻  王浩  李可心 《中国水产》2015,(8)

<正>总体上看,全国采集点出塘量和出塘收入同比增加,出塘量增幅大于出塘收入增幅;出塘价格总体平稳;苗种投放稳中有增,生产投入同比略减;病害、灾害损失同比减少。根据16个省(区)、200个养殖渔情信息采集定点县、733个采集点、6000多个采集终端,1-6月上报养殖渔情数据,结合有关生产调研情况,对2015年上半年养殖渔情分析如下:  相似文献