黑灵芝免疫调节蛋白基因的克隆和生物信息学分析     

苏恺琪  王雪飞  周选围   《上海交通大学学报(农业科学版)》2012,30(1):65-71

黑灵芝(Ganoderma astum)是灵芝家族中一个重要成员,克隆和分析黑灵芝免疫调节蛋白基因,可为进一步了解真菌免疫调节蛋白在种群中的分布打下基础。以黑灵芝为材料,采用同源克隆方法,对真菌免疫调节蛋白(FIPs)基因进行PCR扩增,并对其核苷酸编码序列进行了生物信息学分析。结果表明:黑灵芝真菌免疫调节蛋白基因序列包含336bp,可编码111个氨基酸残基,命名为FIP-gas。FIP-gas分子量为12.4kD,理论等电点为4.80,符合FIPs的特性,是FIPs家族一新成员。对FIP-gas进行序列分析发现其氨基酸序列具有FIPs的保守序列模式,与紫灵芝(G.japoncium)、紫芝(G.sinensis)、小孢灵芝(G.microsporum)、赤灵芝(G.lucidum)、松杉灵芝(G.tsugae)、金针菇(Flammulina velutipes)及草菇(Volvariella volvacea)的FIP序列的同源性分别为99%、98%、87%、86%、86%、61%、55%。系统进化树分析表明黑灵芝的FIP与紫芝的FIP亲缘性最高,与金针菇和草菇的FIP亲缘性相对较远。该研究为进一步了解免疫调节蛋白在灵芝种群中的分布提供了较详细的数据。  相似文献   

甜瓜乙烯受体基因Cm-ETR2的克隆及其在果实发育成熟过程中表达特性的分析     

郝金凤  王雪飞  怡荣  哈斯阿古拉  牛一丁 《华北农学报》2012,27(2):40-43

为研究Cm-ETR2基因在甜瓜果实发育成熟过程中的作用机理,根据已报道的甜瓜(Cucumis melo)品种Cantalupensis的Cm-ETR2基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR技术从甜瓜品种河套蜜瓜(Cucumis melo L.cvHetao)成熟果实中克隆得到了乙烯受体基因Cm-ETR2 cDNA,序列分析显示,序列长度为2 304 bp,编码767个氨基酸。利用实时荧光定量RT-PCR方法,对其在河套蜜瓜果实发育成熟过程中的表达特性进行了分析,Cm-ETR2基因在15DAP至30DAP表达基本没有变化,35DAP表达量开始上升,上升趋势一直持续至45DAP,且45DAP表达量为15DAP的9倍。  相似文献   

石棉黄果柑叶片苔藓的田间防治技术     

严巧巧  汪志辉  吴世磊  王雪飞  蒲雪荔 《北方园艺》2012,(23)

选用代森铵、杜邦可杀得叁仟、噻霉酮、大生M-45、农用链霉素5种药剂,每药剂3种浓度,共15个单剂处理对石棉黄果柑叶片苔藓的控制作用进行了田间试验.结果表明:防治效果最好的是可杀得叁仟1 500倍液,防效为85.62％,且能较好的保持黄果柑果实品质;防效达60％以上且无药害产生的有45％代森铵800倍液、可杀得叁仟1 000倍液、1 500倍液、2 000倍液;防效最差的是农用链霉素,3种浓度的防效均在20％以下;可杀得叁仟对黄果柑叶片苔藓具有较好的控制作用.  相似文献   

版纳微型猪近交系CPN10克隆、亚细胞定位、组织表达和生物信息学分析     

宋雪  秦彩艳  霍金龙  王配  李罗刚  张霞  王淑燕  王雪飞 《云南农业大学学报(自然科学版)》2019,(2)

【目的】以版纳微型猪近交系(BMI)为材料克隆CPN10基因,从亚细胞、m RNA水平及生物信息学方面初步探索其结构及功能特性,为该基因在猪—人异种器官移植免疫排斥中的作用研究奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法获得CPN10基因c DNA序列,应用分子克隆技术构建目的基因和报告基因EGFP的重组真核表达载体pEGFP-C1-CPN10,将其转染猪肾细胞PK15进行瞬时表达,通过EGFP示踪CPN10在PK15细胞中的表达和定位。进一步应用荧光定量技术明确其mRNA的多组织表达特征。最后利用生物信息学分析CPN10蛋白质的结构特征。【结果】得到BMI CPN10 CDS 309 bp序列(GenBank登录号:KM098149),成功构建了BMI CPN10基因的绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C1-CPN10,转染PK15细胞且主要在细胞质中检测到绿色荧光蛋白表达。多组织荧光定量表达分析表明:BMI CPN10 mRNA在皮肤中具有最高表达量,在肝和肾上腺中的表达量较高,在其余各组织中呈中低度表达或几乎不表达。生物信息学分析表明:CPN10编码102个氨基酸,其蛋白分子量为10.93 ku,等电点为8.89,含1个CPN10保守结构域和5个磷酸化位点,二级结构以延伸链结构为主,无跨膜螺旋结构和信号肽。【结论】CPN10基因定位在细胞质中,在皮肤中高表达,该研究结果为进一步研究该基因在免疫排斥方面的功能奠定了理论基础。  相似文献   

132份爆裂玉米自交系的相关性状鉴定及杂种优势类群划分     

王雪飞  李婷婷  郑云霄  李召辉  贾晓艳  赵永锋  祝丽英  宋伟彬  郭晋杰 《中国农业大学学报》2023,28(5):25-33

为筛选爆裂玉米不同类群的优异种质资源,采用40对玉米核心SSR分子标记对来源广泛、遗传多样性丰富的132份爆裂玉米自交系进行杂种优势类群划分,并测定爆裂相关性状指标。结果表明：不同爆裂玉米自交系间的籽粒膨爆特性和穗部性状遗传变异系数为3.34%～42.26%,具有丰富的遗传多样性。膨爆特性、果穗性状间的相关性分析表明,爆花率与膨爆倍数呈极显著正相关,与穗行数、行粒数均呈显著负相关;膨爆倍数与穗行数、行粒数均呈显著负相关;穗长与穗粗、穗行数、行粒数、秃尖长均呈极显著正相关;穗粗与穗行数和行粒数呈极显著正相关;穗行数与行粒数呈极显著正相关,与百粒重呈显著负相关。利用核心标记将爆裂玉米自交系分为5个杂种优势类群,结合表型性状鉴定,各类群共筛选出21个优良自交系,其中Ⅱ类群的‘XF 133’在所有优良自交系中膨爆倍数最高,是最优异的种质资源。  相似文献   

浅谈临床犬骨折的诊断与治疗     

高魁  王剑飞  刘艳琴  何建文  褚震芳  王雪飞 《中国工作犬业》2020,(9):22-23

  相似文献   

胰岛素联合利奈唑胺抑制糖尿病细菌性肺炎的机制研究     

倪丽慧  栾文静  王雪飞  李媛  安雅男  马方雪  周宏  王超  梁俊超  于录 《中国畜牧兽医》2021,48(1):356-366

试验旨在研究胰岛素联合利奈唑胺是否同时具有降糖、抗菌以及抑制α-溶血素活性，从而抑制糖尿病细菌性肺炎。本研究通过体外试验探讨了联合用药对高糖和金黄色葡萄球菌α-溶血素共同诱导的巨噬细胞炎症反应的作用，并探讨其机制。通过药物敏感试验测定最小抑菌浓度（MIC）；通过检测D_{600 nm}值绘制生长曲线来考察胰岛素、利奈唑胺单独或联合胰岛素的抗菌活性；通过溶血试验考察药物组合对α-溶血素活性的抑制效果；通过细胞毒性试验判定药物组合的体外安全性；借助Western blotting药物组合对炎症通路蛋白的作用。药物敏感性试验结果显示，胰岛素组未检测到金黄色葡萄球菌8325-4株和DU1090株的MIC值，利奈唑胺和胰岛素+利奈唑胺药物组合对这两种金黄色葡萄球菌的MIC均为0.5 μg/mL；由生长曲线结果可知，胰岛素不抑制正常组和高糖组金黄色葡萄球菌的生长，但是在利奈唑胺组和胰岛素+利奈唑胺药物组合组，0.25~4 μg/mL利奈唑胺可抑制金黄色葡萄球菌的生长；溶血试验结果显示，正常组和高糖组胰岛素均不抑制α-溶血素活性，0.25~4 μg/mL利奈唑胺均可抑制α-溶血素活性；细胞毒性试验显示，正常组和高糖组，细胞存活率均大于88.038%，50 nmol/L胰岛素、0.25 μg/mL利奈唑胺、50 nmol/L胰岛素+0.25 μg/mL利奈唑胺药物组合可提高高糖诱导的MH-S细胞存活率；Western blotting结果显示，50 nmol/L胰岛素单独使用对高糖和α-溶血素共同诱导小鼠肺泡巨噬细胞（MH-S细胞）中TLR2、MAPKs及NLRP3蛋白的表达水平没有抑制作用，而50 nmol/L胰岛素联合0.25 μg/mL利奈唑胺可降低高糖和α-溶血素共同诱导MH-S细胞中上述蛋白的表达水平，其抑制作用比单独使用利奈唑胺时显著。综上所述，胰岛素联合利奈唑胺可通过降糖、抗菌和抑制α-溶血素活性的方式抑制小鼠肺泡巨噬细胞炎症反应。  相似文献   

桦甸地区主推大豆品种的种植方式与产量关系试验     

王雪飞  牛建光  蒋喜伟  宋敏  刘影  张东丽 《农业科技通讯》2012,(11)

针对吉林省桦甸地区的两个主推高产大豆新品种九农26号、九农33号进行连续3年的不同种植方式与产量关系试验，目的是寻找最佳种植模式用来指导当地大豆生产实践，以有利于种豆农民的增产增收。从结果可以看出，九农33号、九农26号均以株距20cm、每穴双株，公顷保苗15．477株的种植方式为最佳，产量超过3700kg／hm^2。  相似文献   

GMP在奶粉加工过程中贯彻实施的必要性     

张连潮  王雪飞  张永久 《养殖技术顾问》2014,(6):264-265

GMP的中文的意思是良好作业规范，或是优良制造标准，在整个生产过程中是一种特别对产品质量和卫生安全实施自我约束。食品GMP一般是指规范食品加工企业硬件设施、加工工艺和卫生质量管理等的法规性文件，是政府强制性的食品生产、贮存卫生法规。  相似文献   

复合酶法提取稻麸蛋白工艺的优化   总被引：1，自引：2，他引：1       下载免费PDF全文

徐红华  王雪飞  于国平 《农业工程学报》2006,22(1):157-160

运用配料试验设计，采用纤维素酶、复合蛋白酶、植酸酶提取米糠分离蛋白，建立复合酶配合比例与蛋白得率之间的数学模型，确定最佳配比为：纤维素酶65.84%、蛋白酶18.52%、植酸酶15.64%，最佳反应条件为：复合酶温度45℃、底物浓度 20%、酶添加量4%、pH值5.5、水解时间2 h，最终蛋白收率可达86%以上。  相似文献