T7 RNA多聚酶基因的克隆、序列测定及其在E.coli中的表达     

余兴龙  涂长春  徐兴然  张茂林  张青婵  李作生 《中国兽医学报》2003,23(5):452-454

从BL21(DE3)E．coli菌株中以PCR的方法扩增得到了与T7RNA多聚酶(T7RNApolymerase，T7pol)基因大小一致的DNA片断。将PCR产物纯化后直接克隆到pGEM—T载体中，经酶切鉴定和DNA序列分析表明克隆得到了正确的T7pol基因。将T7pol基因亚克隆入pET-28b( )中，构建得到原核表达质粒pET28T7。该质粒的BL21(DE3)pLysS转化菌在IPTG的诱导下可表达约98800的蛋白，这与T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5α、JMl09、HBl01、BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS等5种不同的宿主菌，仅有转化T7pol酶活性受到抑制的宿主菌BL21(DE3)pLysS才能得到转化子，而其余4种T7T7pol酶活性不受抑制的E．coli宿主菌不能得到转化子。pET28T7原核表达质粒这种仅能在T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的T7pol基因能正确表达出具有RNA转录酶活性的蛋白。  相似文献   

轮状病毒VP4基因的克隆与核苷酸序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

王鹏雁  陈创夫  余兴龙  徐兴然  涂长春  张高轩 《猪业科学》2002,19(5):25-28

用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从轮状病毒感染的细胞中扩增了816bp的VP4片段中抗原表位区.通过T4 DNA连接酶将其直接连接于克隆载体质粒pGEM-T上,转化至受体菌DH5α中.提取质粒经PCR扩增、酶切鉴定,证明重组质粒pT-V4中含有轮状病毒的VP4基因片段.经核苷酸序列分析,表明克隆了轮状病毒主要保护性抗原VP4基因中抗原表位区.  相似文献   

商品龟网箱养殖技术     

赣龙丙  程辰  诚义 《河南畜牧兽医(综合版)》2001,22(12)

网箱养龟与陆地池子养龟相比,有设施简单、管理省工、不必换水、投资省、迁移方便等优点,适宜于河湖江面水域宽阔地带围养,经济效益显著.也适用于大型人工鱼塘内部分置网围养,提高鱼塘单位产出率并增加收益.  相似文献   

干香菇的级选和贮藏     

吉富清志  张甫安 《国外农学:国外食用菌》1993,(3):26-26

  相似文献   

饲草青贮技术     

原敬凯  罗国祥  武家龙 《河南畜牧兽医(综合版)》1993,(3)

青贮饲料是将新鲜的青刈饲料作物、牧草、野草、玉米秸秆和各种青绿藤蔓等,经切碎后装入青贮容器内,在厌氧环境下经过微生物作用发酵制成的一种具有特殊芳香气味,营养丰富的饲料。它基本上保持了青绿饲料原有的一些特点。  相似文献   

再谈肉鸡腹水症的发生与控制     

李增光  龙菲平 《山东家禽》1997,(5):26-30

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拖拉机局部漏油巧排除     

王晓波  龙华强 《农机使用与维修》2005,(4):66-66

1.油箱供油开关漏油。原因是开关处的石墨及石棉油封损坏。排除方法:(1)将开关卸下,取出填料,用耐油橡胶片做两个外径比开关壳体孔大1mm、内径比手柄螺杆大1.50mm的圆垫,把橡胶垫夹在钢垫中间,然后一同套在手柄螺杆上,拧紧压盖装置。(2)用石墨及石棉绳缠在两个钢垫中间并填满,拧紧压盖装置。2.油箱放油龙头漏油。原因是龙头内的钢球  相似文献   

巴林右旗草地资源生产力现状、存在问题及发展对策   总被引：2，自引：0，他引：2  

苏雅拉  王霄龙 《内蒙古草业》2004,16(4):52-55

本文就巴林右旗草地资源利用现状及存在的问题进行了较系统的分析，认为“三大矛盾”是本旗草地畜牧业可持续发展的主要限制因素，提出了化解矛盾的思路与对策。  相似文献   

鼱危害越冬蜂群的观察及预防     

江名甫  江华 《中国蜂业》2005,(11)

鼱危害越冬蜂群的重要敌害。过去养蜂书刊尚无报道,现将多年来的观察、调查研究情况分述如下:一、危害越冬蜂群的情况是以昆虫成虫、幼虫及其它小蠕虫为食的小型哺乳动物。蜂群越冬期间工蜂活动减弱,失去防卫能力。此时,身体瘦小的,夜间常由巢门钻入蜂箱,捕食蜂团外层的工蜂,食其腹部和胸部肌肉,弃其翅、足及丁质外壳,堆积在箱底的角落。若蜂箱内有保温填充物,常在其中做成巢穴,留居箱中;也有夜间进入箱内捕食工蜂,饱食后逃离箱外隐居。不冬眠,食量较大,一昼夜能食数十只工蜂。弱小蜂群很快被吃光,全群覆没,有时也啃部分蜜粉脾。1983年2月…  相似文献   

柑橙高接换种试验报告     

罗建标  乐昌龙 《热带作物研究》1993,(3):61-63

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