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61.
目的:构建安徽三黄鸡β-防御素2(gal-2)基因的真核表达栽体,表达gal-2蛋白.方法:提取鸡肺组织中总RNA,应用RT-PCR技术获得鸡β-防御素2(gal-2)全长eDNA基因片段,经PCR获得gal-2的成熟肽基因片段,并将其克隆入真核表达载体pPIC3.5K中,构建重组表达质粒pPIC3.5K-gal-2;经测序鉴定正确后,电转化巴斯德毕赤酵母菌GS115.经甲醇诱导表达gal-2蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析.结果:通过电转化方法成功将经酶切线性化的重组表达质粒整合入宿主菌基因组中,并在甲醇诱导的条件下成功表达出了目的蛋白.结论:成功构建了重组真核表达质粒pPIC3.5K-gal-2;并借助巴斯德毕赤酵母细胞表达出了gal-2的蛋白,其分子量大约为4.1 kDa.该研究为下一步应用基因工程和蛋白质工程技术进行gal-2蛋白的规模化生产奠定了基础. 相似文献
62.
63.
犬低温体外循环综合监测的试验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
试验借助现代医学监测设备,首次在我国兽医临床对28只低温体外循环的犬系统开展了生命体征综合监测的研究。结果表明,密切观察动态心电(ECG),结合平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)、心率(HR)的变化,是判断循环功能、冠状动脉灌注、心肌缺血改变、保证脑血流通畅以及辅助转流时间长短的主要参考指标。保持良好的血气监测水平,是达到满意组织灌注不可缺少的指标;进一步证实,体外循环期维持良好的血钾水平,并于主动脉开放后10min适时补钙,有利于心脏收缩与复苏,对减轻心肌再灌注损伤具有重要作用。研究提示为确保每只手术犬在低温体外循环的肝素标准化以及合理使用鱼精蛋白用量,激活全血凝固时间(ACT)的监测必须个体化。 相似文献
64.
65.
免疫分析法在兽药残留分析中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
免疫分析是利用抗原与抗体的特异性结合反应为基础的分析技术,以抗体为核心试剂,具有高选择性、高灵敏度等特点。免疫分析在兽药残留分析中有广泛的应用前景,已经渗透到兽药残留分析的各个环节。文章主要从分析原理出发,对免疫亲和色谱(IAC)、酶免疫分析(EIA)、发光免疫分析(LIA)、荧光免疫分析(FIA)和生物传感器(biosensor)的应用进行了综述,并展望了其前景。 相似文献
66.
从隐性乳腺炎的牛乳中分离金色葡萄球菌及其药敏试验安徽农业大学(合肥230036)潘玲,祁克宗,魏梅芳乳牛乳腺炎是乳牛群的常见多发病,它不仅降低产奶量,而且影响乳汁品质。特别是隐性乳腺炎(以下简称隐乳),约占产奶牛的98%。因其无明显临床指征而不易被发... 相似文献
67.
本试验从鸡的肝脏中提取总RNA,根据GenBank公布的鸡β-防御素Gallinacin-8(简称gal-8)基因序列设计2对引物,运用RT-PCR技术扩增出大小为20lbp的鸡β-防御素gal-8的基因片段.通过序列分析得知其由66个氨基酸组成,包括20个氨基酸残基的信号肽、5个氨基酸的原片肽及41个氨基酸的成熟肽.BLAST分析表明与GenBank中已公布的序列相比较缺失2个碱基,其同源性达到98%.将该基因克隆进pGEM-T Easy载体中,并转化大肠杆茵感受态DH5α,经筛选和测序鉴定获得了阳性重组质粒.从重组质粒中扩增出的成熟肽,大小约123 bp.试验为进一步构建重组核蛋白及表达具有广谱抗微生物活性的防御素提供了实验基础. 相似文献
68.
69.
鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留HPLC检测方法的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
建立了同时检测鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留的高效液相色谱.经乙腈提取,正己烷脱脂,旋转蒸发浓缩后,以0.05mol/L磷酸/三乙胺(pH3.0):乙腈(40:60)作为流动相,反相高效液相色谱-紫外检测法检测,检测波长240 nm.鸡组织中地克珠利和妥曲珠利的回收率分别为92.0%~102.0%和83.4%~89.0%,变异系数为5.9%~12.2%,地克殊利和妥曲珠利的检测限分别为0.012 mg/kg和0.010 mg/kg,在0.05~1.0 mg/L质量浓度范围内呈良好的线性相关.该法样品处理简单,可同时检测地克珠利和妥曲珠利的残留,且准确度和精密度均符合残留分析的要求. 相似文献
70.