PEDV、TGEV和PoRV三重PCR检测方法的建立及初步应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

蒲翠敏  冯旭芳  张双翔  胡兴义  张海  丁尊俄  王开功  周碧君  文明  程振涛 《动物医学进展》2018,(2)

为建立一种快速、敏感的猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)三重PCR检测方法,根据GenBank登录的PEDV S基因、TGEV M基因和PoRV VP7基因参考序列,设计3对特异性引物,以克隆的质粒为模板,进行反应条件的优化以及特异性、敏感性试验。结果采用所建立的方法能够扩增出PEDV、TGEV和PoRV特异性片段,且不能检出PCV2、CSFV、PRRSV;对PEDV、TGEV和PoRV质粒模板的最低检测量分别为1×10~2拷贝/μL、1×100拷贝μL、1×10~3拷贝/μL;对10~2份临床病料进行检测,结果 PEDV、TGEV和PoRV的检出率分别为37.25%、1.96%和6.86%,与单项PCR检测结果进行比较,符合率均为100%。结果表明,所建立的三重PCR检测方法可为猪病毒性腹泻病的快速诊断及流行病学调查提供技术支持。  相似文献   

复合益生菌对早期断奶仔猪生长性能和免疫水平的影响     

祝永才  胡兴义  张双翔  周碧君  陈国权  陈广  王开功  文明  程振涛  温贵兰  张海  冯旭芳 《中国畜牧兽医》2018,45(6):1518-1525

为研究酿酒酵母菌和枯草芽孢杆菌组成的复合益生菌对早期断奶仔猪免疫水平的影响,试验选取（杜×长×大）三元杂交断奶仔猪80头,分为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组及对照组,每组20头,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在基础日粮中分别添加0.10%、0.20%、0.30%复合益生菌,对照组饲喂基础日粮,以期评价其生长性能、血液生化、血清细胞因子和肠道黏膜分泌性球蛋白A（SIgA）水平。结果表明,试验Ⅱ、Ⅲ组末重极显著高于试验Ⅰ组和对照组（P<0.01）;试验Ⅲ组平均日增重极显著高于试验Ⅰ、Ⅱ组及对照组（P<0.01）,试验Ⅲ组平均日采食量显著高于试验Ⅰ、Ⅱ组及对照组（P<0.05）,对照组、试验Ⅱ组腹泻率均极显著高于试验Ⅰ、Ⅲ组（P<0.01）;试验组中的乳酸脱氢酶（LDH）、谷丙转氨酶（ALT）和碱性磷酸酶（ALP）含量均高于对照组,总蛋白（TP）含量低于对照组,差异均不显著（P>0.05）;试验组中尿素氮（BUN）含量均显著高于对照组（P<0.05）,试验Ⅱ、Ⅲ组谷草转氨酶（AST）含量显著高于试验Ⅰ组和对照组（P<0.05）。试验0 d,试验组白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平与对照组相比差异不显著（P>0.05）;试验20 d,试验Ⅱ、Ⅲ组中IL-6水平极显著高于试验Ⅰ组及对照组（P<0.01）,IL-1β和TNF-α水平与对照组相比差异不显著（P>0.05）;试验40 d,试验组IL-1β水平均高于对照组（P>0.05）,IL-6和TNF-α水平均极显著高于对照组（P<0.01）。试验组中空肠黏膜SIgA水平极显著高于对照组（P<0.01）;十二指肠和回肠黏膜SIgA水平均显著高于对照组（P<0.05）,盲肠黏膜SIgA水平低于对照组,差异不显著（P>0.05）。说明不同含量酿酒酵母菌-枯草芽孢杆菌复合益生菌均可有效提高断奶仔猪的生长性能,缓解早期断奶仔猪应激反应,增强断奶仔猪的免疫功能。  相似文献   

日粮蛋白水平对长顺绿壳蛋鸡产蛋性能的影响     

张华  赵丽芬  王慧  李照伟  熊力  唐英秀  程振涛 《贵州畜牧兽医》2016,(4):16-19

为了研究日粮中不同蛋白水平对长顺绿壳蛋鸡产蛋性能的影响,选取健康无病、体重相近的长顺绿壳蛋鸡450只随机分为3组,每组150只,分为CP14%、CP15%、CP16%3个试验组进行试验研究。结果表明:(1)蛋鸡生产性能:试验全程CP16%组产蛋率均高于其他2组,在26 w达到最大值65.46%;试验后期,3组产蛋率均缓慢下降并趋于同一水平,但CP16%组下降速度较慢,说明粗蛋白水平对产蛋率呈正相关。(2)鸡蛋品质:各组蛋形指数均在标准值范围内,且3组之间差异不显著(P0.05);蛋壳平均厚度均在0.33 mm以上,蛋壳质量良好,且随着粗蛋白质水平的增加而增厚。(3)鸡蛋营养含量:各组鸡蛋中灰分、蛋白质及赖、蛋、精、色、苏5种氨基酸含量随着蛋白水平的增加而增加,但赖、蛋、精、色、苏5种氨基酸相差不大;胆固醇和脂肪含量的变化未表现出一定规律性。  相似文献   

贵阳市散养奶牛牛奶中沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析     

杨德凤  吴小慧  黄梦夏  李德华  蒙利洁  程振涛  王开功  杨琦 《贵州畜牧兽医》2018,(2)

为了解贵阳市散养奶牛牛奶中沙门氏菌的污染及耐药情况,采集散养奶牛牛奶样本26份,运用细菌分离培养技术对样本进行细菌分离;PCR鉴定后测序;细菌药敏试验。结果:共分离鉴定沙门氏菌3株,分离率为11.5%(3/26);3株沙门氏菌对庆大霉素(GEN)、卡那霉素(KAN)、阿莫西林(AMC)等耐药,对四环素(TET)、环丙沙星(CIP)、恩诺沙星(ENR)等较为敏感。  相似文献   

牛支原体vspY基因克隆及序列分析研究     

谢晓东  罗维  苟昌勇  吴巧群  唐沙  杨源  王军  程振涛 《贵州畜牧兽医》2018,(2)

通过对牛支原体vspY蛋白基因的扩增、克隆及序列分析,研究vspY蛋白基因的保守性。结果:扩增vspY基因片段长度约为1 121 bp,vspY基因克隆测序显示基因片段确定为1 121 bp,与引物设计扩增长度相符;vspY基因序列分析显示,与牛支原体参考株基因同源性为98%,仅在533、728位点存在点突变;系统进化树显示,牛支原体贵州分离株与参考株处于不同系统进化分支,存在一定进化距离。结果表明:牛支原体vspY蛋白基因相对保守,不同地区分离株存在一定进化关系。  相似文献   

鸡传染性喉气管炎病毒、鸡毒支原体、鸭源鸡杆菌混合感染病例的病原学诊断     

杨鹏  陈静  尹德晶  谢晓东  李乔斌  岳筠  程振涛 《贵州畜牧兽医》2020,44(3):44-48

为确诊贵州省六盘水市某养殖场蛋鸡群发病死亡的原因,采集病料进行新城疫病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡毒支原体、滑液囊支原体核酸检测,以及细菌分离培养、鉴定和药敏试验。结果:(1)鸡传染性喉气管炎PCR试验扩增出大小为537 bp目的基因条带,鸡毒支原体PCR试验扩增出大小为636 bp目的基因条带,呈阳性;其余病毒核酸检测均呈阴性。(2)分离菌在血液琼脂培养基上生长呈白色半透明状、可溶血的小菌落,经革兰氏染色镜检为革兰氏阴性杆菌,分子生物学鉴定为鸭源鸡杆菌;对硫酸安普霉素、氟本尼考、延胡索酸泰妙菌素高度敏感,对硫酸粘菌素、盐酸多西环素、替米考星中度敏感,对酒石酸泰乐菌素低度敏感,对盐酸大观霉素、盐酸林可霉素、磺胺间甲氧嘧啶、阿莫西林耐药。结论:确诊病例为鸡毒支原体、鸡传染性喉气管炎病毒、鸭源鸡杆菌混合感染。  相似文献   

鸭源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析     

陈国权  张旭  阎朝华  周碧君  王开功  程振涛  文明 《中国畜牧兽医》2020,47(2):620-628

为鉴定临床疑似鸭多杀性巴氏杆菌感染肉鸭的病原菌，本试验通过细菌分离培养、菌体形态观察、细菌生化鉴定、16S rRNA基因测序分析、细菌种特异性鉴定、荚膜分型鉴定和动物回归试验进行鉴定，并通过药敏试验和耐药基因检测进行耐药性分析。结果显示，从患病鸭肝脏组织分离到的细菌在鲜血琼脂培养基中呈现表面光滑凸起、灰白色菌落，为革兰氏阴性短小杆菌，瑞氏染色呈两极浓染；生化鉴定结果显示，分离菌能发酵葡萄糖、蔗糖和甘露醇，硫化氢、氧化酶和吲哚等试验阳性；16S rRNA基因序列系统进化树分析显示，该分离菌与多杀性巴氏杆菌聚为一支，同源性 > 99%；细菌种特异性鉴定结果与多杀性巴氏杆菌相符；荚膜分型鉴定结果仅扩增到约为1 050 bp的目的基因片段，与荚膜血清A型相符；动物回归试验显示，该分离菌有较强的致病性；药敏试验结果显示，该分离菌对羧苄西林、氨苄西林、复方新诺明和四环素等12种药物耐药；经耐药基因PCR检测显示，该分离菌携带Sul1、Sul3、tet（X）和Intl1 4种耐药基因，与药敏表型相符。本试验成功分离到1株鸭源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌，为鸭多杀性巴氏杆菌病的防治提供参考依据。  相似文献   

PRRSV、CSFV混合感染病例的实验室诊断     

王慧  程振涛  刘霞  李涛  张双翔  张霞 《贵州畜牧兽医》2017,41(2)

为确诊贵阳市某猪场疑似猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)死亡病例,对死亡猪进行剖检及实验室诊断。病理剖检可见,病死猪出现淋巴结肿大充血、肺部有坏死灶、胸腔有大量积液等病理变化;同时采集病理组织应用分子生物学和细菌学方法进行PRRSV(普通毒株和Nsp2变异毒株)、猪瘟病毒核酸检测和细菌分离鉴定。结果显示:该病例为PRRSV(普通毒株)、CSFV混合感染所致。  相似文献   

贵州省种猪场5种传染病的血清学调查分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

张双翔  文明  方英  陈军义  周碧君  王开功  程振涛  岳筠 《黑龙江畜牧兽医》2009,(11)

近年来,贵州省一些种猪场出现了一种以母猪繁殖障碍、仔猪呼吸道症状及生长发育不良为主要临床表现的疫病,严重影响了养猪业的健康发展.研究资料表明,引起上述症状的病毒性传染病主要有猪瘟(hog cholera,HC)、猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)、猪伪狂犬病(pseudorabies, PR)、猪细小病毒病(porcine parvovirus infection,PP)和猪圆环病毒病(porcine circovirus infection,PC)等.  相似文献   

基于山羊痘病毒P32蛋白间接ELISA方法的建立     

程振涛  岳筠  周碧君  许乐仁  王开功  文明  李永明 《兽医大学学报》2012,(1):18-22

通过Ni柱亲和层析和G-100层析技术对真核表达蛋白进行纯化,SDS-PAGE分析GPVP32蛋白纯化效果;应用琼脂扩散试验检测纯化蛋白的抗原反应性,并以纯化蛋白作为包被抗原建立间接ELISA方法。结果显示,从真核表达产物中获得了纯化的GPVP32蛋白,琼脂扩散试验显示纯化的GPVP32蛋白具有良好的抗原反应性;基于纯化蛋白建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。结果表明,本试验建立的间接ELISA方法可用于山羊痘流行病学的调查和血清抗体水平的监测,为山羊痘的防控提供了有效技术。  相似文献