现场分割奶牛胚胎产生同胚双犊的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

樊敬庄  窦忠英  王新庄 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1993,21(Z2):49-51

采用简易徒手胚胎分割法,一分为二分割奶牛胚胎。应用非手术方法,每头受体移植成对二分胚。移植4头受体,2头妊娠,其中1头产公犊1头,1头产母犊2头。该母犊为同胚双犊,健康,发育正常。  相似文献   

几种培养液对昆白系小鼠早期胚胎体外发育的影响   总被引：1，自引：1，他引：1  

刘淑娟  华进联  葛秀国  严兴荣  胡勇策  窦忠英 《西北农业学报》2007,16(3):19-22,36

为了完善小鼠早期胚胎体外培养体系,探讨以KSOM为基础液添加新生牛血清（NBS）、胎牛血清（FBS）及BSA和G1/G2对小鼠早期胚胎体外发育的影响.结果表明：①添加10%NBS的KSOM组和G1/G2培养液组的囊胚率分别为89.52%和87.08%,二者差异不显著;②添加10?S组囊胚率为10.26%,与①中两组差异极显著;③添加0.1%BSA和0.4%BSA组囊胚率为0%,与其他三组差异极显著.添加新生牛血清的KSOM与胚胎培养液G1/G2均有效克服昆白小鼠2-细胞阻滞,并能得到较高的囊胚率.  相似文献   

人类胚胎干细胞研究述评   总被引：1，自引：0，他引：1       下载免费PDF全文

华进联  杨炜峰  窦忠英 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2007,35(3):1-6

对人类胚胎干细胞(hESCs)的来源、培养方法、建系条件、生物学特性和鉴定方法、遗传操作及其需解决的问题进行了讨论。提出目前研究的重点在于揭示维持ES细胞多能性和自我更新的机理,进一步优化人类和其他哺乳动物类ES细胞的分离、培养、建系方法,探讨其定向分化机理,建立胚胎干细胞(ESCs)和胚胎生殖细胞(EGCs)的大规模快速扩增技术;完善hESCs向重要功能细胞(生殖细胞)分化的体系;单细胞比对分析ESCs、畸胎瘤细胞(ECSs)、EGCs、类胚体(EBs)、各级生殖细胞和成体细胞的基因及蛋白表达图谱,以探求生殖细胞、成体细胞、ESCs、ECSs、EGCs的本质区别,积极开展将ES细胞用于治疗人类疾病模型的研究。  相似文献   

支持牛类胚胎干细胞发育的饲养层培养体系的建立   总被引：2，自引：1，他引：2       下载免费PDF全文

安立龙  杨奇  窦忠英  雷安民  杨春荣  高志敏  邱怀 《西北农业学报》2001,10(3):4-8

以小鼠胎儿和牛睾丸为材料 ,以含 1 5 % NBS、0 .1 mmol/ Lβ-巯基乙醇、0 .1 μmol/ L Na2 Se O3的DMEM溶液为培养液 ,分离获得了传 1 5代的小鼠胎儿成纤维细胞和 5代牛睾丸成纤维细胞 ,建立了小鼠和牛类 ES细胞培养体系。结果表明 :牛睾丸成纤维细胞和小鼠胎儿成纤维细胞均属附着生长型细胞 ,与小鼠胎儿成纤维细胞相比较 ,牛成纤维细胞直径和长度大 ,生长速度快 ,易于老化 ;1 2～ 1 6日龄的小鼠胎儿最适宜分离与克隆小鼠胎儿成纤维细胞 ;在 2 5℃条件下 ,以 0 .2 5 %胰蛋白酶 0 .0 4% EDTA消化液作用胎儿小块组织分离原代小鼠胎儿成纤维细胞 ,消化液作用时间不应超过 2 0 min,以相同的消化液在 3 7℃条件下 ,离散贴壁成纤维细胞 ,作用时间以 2～ 3 min为宜 ;培养细胞密度与传代时间间隔有密切关系 ,若传代时间间隔为 3～ 4d,培养细胞浓度应为 3× 1 0 5个 / ml～ 5× 1 0 5个 / ml;在成纤维细胞分离与克隆过程中 ,培养基中添加0 .1μmol/ L Na2 Se O3 0 .1 mmol/ Lβ-巯基乙醇 1 5 % NBS,有利于 MEF和 NBTF的增殖  相似文献   

动物细胞分化与克隆     

雷安民  窦忠英 《农业生物技术学报》2005,13(2):247-253

细胞分化是细胞行使功能的前提条件，是特定基因表达的结果。细胞分化状态的维持需要细胞外环境、细胞与细胞之间信息交流及其细胞内环境等共同作用，从而保证分化细胞染色体的特定空间结构。细胞内环境中细胞核因素的影响可以归结为后生性遗传作用，细胞质因素主要有转录后基因沉默(RNAi)和蛋白质磷酸化作用等。克隆动物的实质是细胞分化过程的逆转。克隆动物的过程及其卵母细胞质中的特殊物质破坏了维持供体细胞分化状态的各种条件，改变了分化细胞染色体的特定空间结构，对分化细胞进行了重新编程。克隆过程中卵母细胞质对体细胞的去分化过程并非完全正确，同时由于体细胞染色体可能存在的变异，导致体细胞克隆效率很低。加强对发育生物学基本问题的研究和对现有克隆动物进行详细的研究分析，并继续改进和完善现有的体细胞克隆操作程序，是提高克隆动物效率的当务之急。  相似文献   

小鼠胚胎干细胞密度梯度离心去核法     

李相运  窦忠英  李松  华进联 《畜牧兽医学报》2003,34(1):40-43

在细胞松弛素B的参与下，通过Ficoll密度梯度离心法可有效制备小鼠无核ES细胞，在适宜条件下，悬液培养中40％的小鼠ES细胞可发生去核作用，经Hoechst染色和形态观察确定：80％的去核ES细胞在30min内可恢复其原有形态，但其生活力不会超过48h，这为研究ES细胞的胞质功能及核质互作效应提供了一种可行的细胞去核方法。  相似文献   

近期干细胞研究专利     

华进联  窦忠英 《动物医学进展》2001,22(1):95

专利号主题申请者作者日期 专利类型WO985 896 3将人干细胞移植入第一和第二种动物胚胎 ,第一胚胎注入抗原 ,而第二胚胎注入源于第一胚胎的细胞 ,以大量制备人单克隆纯体。Wengler Q S Wengler Q S 1998.12 .30 A1U S5 85 1832 富集多能神经干细胞的哺乳动物神经细胞的体外培养 ,以生产分化的神经细胞。Neurospheres L td(Calgary,Alber-ta,Canada)Baetge E E,Ham-m ang JP,Reynolds B,et al1998.12 .2 2 AU S5 8495 5 3用位于重组酶靶位点两侧的永久化基因载体转化神经嵴干细胞 ,以生产永久化细胞系 ,该细胞可用于移植、制备单…  相似文献   

细胞外环境中分化抑制物对动物胚胎干细胞克隆率的影响     

安立龙  效梅  窦忠英  邱怀 《家畜生态学报》2001,22(2):44-49

介绍了饲养层、条件培养基、分化抑制因子对哺乳动物胚胎干细胞分离与克隆的影响，并探讨了白血病抑制因子影响胚胎干细胞克隆的机理。  相似文献   

奶牛不排卵状况的研究综述   总被引：2，自引：0，他引：2  

杨炜峰  窦忠英  高志敏 《乳业科学与技术》2003,26(2):88-91

卵泡生长可分为三个阶段：卵泡出现；卵泡的选择优势化与闭锁分离；卵泡排卵。不排卵的情况可分为：①生长卵泡不能生长至“分离期”。原因可能是极度的营养缺乏。②卵泡可生长到“分离期”，但没有达到排卵体积。这方面研究得较多，认为这类牛比正常牛有更强的E2对GnRH／LH的负反馈，在营养不良或吮乳时可引起这类不排卵状况。③卵泡生长的最终体积大于排卵卵泡，这类牛的特征是下丘脑对E2的正反馈作用不敏感；高产奶牛常见。对于第一种情况，关键在于预防，提高育成期的饲管水平。后两种常见的不排卵状况是由于下丘脑对E2反应的敏感性改变；常用增加血液循环中P4的浓度改变GnRH／LH释放的脉冲以协助卵泡最后阶段的生长，或重新建立下丘脑对E2的正反馈来治疗。  相似文献   

牵牛子浸出物对于各种动物的下泻试验     

王建元  扈交杰  窦忠英  柴根旺 《中国兽医杂志》1962,(6)

牵牛子为旋花科植物牵牛的干燥种子,别名“黑丑”“白丑”,中药中最常用的泻药。据文献记载其致泻成分为牵牛子脂(pharbitin),易溶于乙醇。张颂(1)(1959)在小白鼠和家兎上作过下泻试验,但在家畜方面尚无试验报告。我们用牵牛子的乙醇浸出物在犬、猪和山羊等动物上,作了下泻试验。  相似文献