牛支原体重组蛋白P48原核表达、多克隆抗体制备及间接ELISA抗体检测方法的建立     

张妍  战力源  姜福洁  马红霞  孔令聪 《中国畜牧兽医》2023,(11):4621-4631

【目的】建立牛支原体抗体间接ELISA检测方法,为牛支原体灭活疫苗的效力检测提供方法。【方法】构建pET-32a-P48原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)Plyss感受态细胞筛选阳性质粒并进行双酶切验证,用终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导重组蛋白表达,使用镍柱进行蛋白纯化,经SDS-PAGE验证蛋白纯度及分子质量大小,采用Western blotting检测重组P48蛋白特异性和反应原性;将重组P48蛋白免疫家兔制备多克隆抗体。建立牛支原体间接ELISA抗体检测方法并进行条件优化,确定阴阳性临界值。对建立的方法进行敏感性、稳定性、特异性及与平板凝集试验的符合率试验检测。【结果】经SDS-PAGE验证,P48蛋白分子质量大小为62.68 ku,纯度在90%以上;Western blotting检测结果显示,P48蛋白仅与相应抗体结合呈现单一条带,该蛋白特异性和反应原性良好;琼脂扩散方法测得阳性血清效价为1∶64。建立的间接ELISA检测方法条件优化结果为：抗原包被浓度为0.3μg/mL,1%BSA 37℃封闭120 min,待检血清按1∶1 280稀释,37℃孵育60 m...  相似文献   

解淀粉芽孢杆菌菌株P-r21抑菌广谱性及对番茄灰霉病的防治     

李永丽  源春彦  周洲  王春生  雷振山 《中国农学通报》2023,39(6):105-110

为明确内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株P-r21的抑菌广谱性及对番茄灰霉病的防治效果,本研究优化了菌株P-r21发酵条件,利用平板对峙法测定了该菌株对6种病原菌的抑菌活性及对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)孢子萌发的抑制作用,并通过离体接种试验研究了对番茄灰霉病的防效。结果表明：菌株P-r21最佳发酵条件为在PYJ中培养初始pH 6.0,培养时间为12 h。菌株P-r21对供试的6种植物病原菌(Botrytis cinerea、Fusarium proliferatum、Rhizoctonia cerealis、Gaeumannomyces graminis、Fusarium graminearum、Colletotrichum karstii)的生长均表现出抑制作用;对C. karstii和B.cinerea抑制作用最强,抑菌率达到88.0%和84.5%。发酵滤液对B. cinerea孢子萌发抑制率达80.6%,对叶片和果实灰霉病的防效达到100%和80.0%;发酵液10倍稀释后防效也可达到67.1%和60.7%。本研究明...  相似文献   

为促婚姻付彩礼离婚之时难索回     

章法 《四川农业科技》2005,(7):44

在我国很多地区,尤其是广大农村及偏远地区,婚前给付彩礼的现象还相当盛行。这种基于风俗习惯而不得已为之的彩礼给付在离婚时应否返还,2004年4月1日起施行的新司法解释对此作出了明确的规定。2005年3月25日,湖南省桃江县人民法院就审结了一起该解释实施以来不支持彩礼返还案——  相似文献   

非洲12国农机化官员考察团来鲁考察     

辛章法 《山东农机化》2005,(11)

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杂交三倍体泥鳅GISH技术反应体系的建立及应用     

李雅娟  林忠乔  张蕊  徐其征  梁雨婷  查荒源  庄子昕  周贺 《大连海洋大学学报》2018,(1):1-6

为研究杂交三倍体泥鳅Misgurnus anguillicaudatus的形成机制,探寻其产业化生产的有效途径,通过对GISH的多项试验参数进行优化,建立杂交三倍体泥鳅GISH技术反应体系,并对天然四倍体泥鳅(4n=100)与大鳞副泥鳅Paramisgurnus dabryanus(2n=48)正、反杂交后代进行GISH分析。结果表明:杂交三倍体泥鳅GISH技术反应体系中,探针DNA在温度为105℃、持续时间为2 min时,片段化后探针DNA片段长度为500~1000 bp;封阻DNA在温度为110℃、持续时间为10 min时,片段长度为100~500bp;标记后的探针DNA与片段化后的封阻DNA混合比(P/B)在1∶25和1∶50时均可以得到较好的杂交信号;以大鳞副泥鳅全基因组DNA为探针DNA、天然四倍体泥鳅全基因组DNA为封阻DNA,与二者正、反交后代进行基因组原位杂交试验,结果显示,来源于亲本大鳞副泥鳅24条染色体在着丝点处均有杂交信号,无杂交信号染色体50条,来源于亲本泥鳅。该研究结果不仅为杂交三倍体泥鳅后代的鉴定提供了最直观的证据,也为中国天然四倍体泥鳅是含有四套染色体组的遗传四倍体并能产生2n的配子提供了分子细胞遗传学基础数据,对泥鳅三倍体育种研究具有一定的指导意义。  相似文献   

深圳市生态监测站点高等动物多样性与植物多样性的关系研究     

李仕新  黄玉源  唐军  曾嘉凯  余欣繁  杨慧纳  梁鸿  陈慧明  蒋呈曦  杨立君 《绿色科技》2018,(20)

采用植被生态学及高等动物生态调查方法,研究了深圳市大鹏新区七娘山东北部、坪山新区田心山的赤坳山地、福田区莲花山东部与东南部、南山区小南山西北部及东部和宝安区羊台山应人石山地等5个生态监测站点的植物群落结构特征、多样性与高等动物多样性的关系。结果表明:在研究期间,观测到这5个站点的野生高等脊椎动物种类分布为七娘山东北部有33种、莲花山有23种、田心山8种、小南山17种及羊台山10种;发现鸟类的多样性与树种密切相关,而且与各区域的植物多样性有关,即植物多样性高的区域,其高等动物的数量也多;表明不仅是植被的高度指标高的区域,其高等动物的种类数会高,而且高等动物的多样性水平与植物群落的科、属、种的综合丰富度及种类的丰富度指数存在正的相关关系,与植物种类的辛普森指数也存在正的相关关系;而与植被盖度指标的关系不明显。该结果可对了解深圳乃至中国范围内的城市及城郊区域生物多样性的保护及高等动物的分布、动态变化及与植物的关系状况,以及进一步的研究提供理论参考。  相似文献   

雷公山国家级自然保护区常绿阔叶林蕨类植物群落特征   总被引：1，自引：1，他引：0  

余德会  谢镇国  余永富  李扬  吴必锋  付梓源  彭彩丽  侯德华 《安徽农业科学》2016,(9)

[目的]明确雷公山国家级自然保护区常绿阔叶林蕨类植物群落组成。[方法]调查16个20 m×20 m样地256个5 m×5 m小样方以及每个样地各边分别外延20 m范围出现的蕨类植物种类。[结果]调查样地中有蕨类植物64种,隶属于28个科39个属,物种种类丰富,种群数量极不均匀(相对多度在2以下占78.13%)。其中地生种所占比例占主导地位(96%),附生种极少(4%),表现为东南亚热带北缘植物区系的性质或特点,并有热带山地向亚热带过渡的特征;里白、芒萁、狗脊蕨、蕨4个种是该区高密度的种类,其他绝大多数种类的密度较低。[结论]研究结果为进一步阐明雷公山常绿阔叶林蕨类植物的组成特征及其生态学提供了理论依据。  相似文献   

黄河源区退化高寒草甸48种常见植物种子萌发特性及其生态意义     

任国华  邓斌  王彦龙  后源 《草地学报》2015,23(4):744-751

本文通过对黄河源区退化高寒草甸48种常见植物种子的萌发特性研究,比较了不同功能群植物萌发行为的异质性,旨在揭示不同植物萌发对策的生态适应机制。结果显示:萌发率超过80%的植物有17种,小于20%的有14种,1种植物未萌发;萌发速率在1以下的有15种,大于10的有21种;萌发起始时间小于5 d的有12种,大于15 d的有5种;有6种植物的萌发持续15 d以上,30种植物的萌发在10 d内结束。种子萌发速率与种子大小呈显著负相关(P <0.05),小种子物种有更高萌发率(P=0.085)和更早萌发起始时间(P=0.093)的趋势。48种植物的萌发划分为爆发型、过渡型、缓萌型和低萌型等4种类型,其中禾本科植物以爆发型为主,莎草科则是低萌型和缓萌型占优势,杂类草在几种萌发类型中均有分布,说明不同功能群植物在生存风险分摊上的异质性策略。  相似文献   

大青河森林公园森林游乐效益的经济评价     

申彩霞  杨荒源 《新疆林业》2009,(5):20-21

森林是陆地生态系统的主体,是生态文明建设的重要标志。森林作为～种风景资源,可供人们游乐观赏。通过森林旅游,一方面使旅游者能投身大自然的怀抱,欣赏名胜风景和呼吸新鲜空气,使人欣赏自然美,陶冶情操,增长知识;另一方面可以换取货币,以这些货币用于森林管护,购买木材,从而减少对森林的采伐量,起到保护森林、增加森林面积和覆盖率的作用,从而达到不破坏森林、永续利用的目的。这就是森林的游乐效益。  相似文献   

广州部分城区绿地系统结构分析   总被引：1，自引：1，他引：0       下载免费PDF全文

黄玉源  罗国良  倪才英  符红霓  何柳静  丁怡明  何福成 《中国城市林业》2011,9(5):13-16

以广州市区的绿地系统为研究对象,在不同城区选取公园、广场、道路等不同绿地类型,对各样点的不同植物进行盖度、胸径、高度、间距、重要值、物种多样性指数、群落相似系数等数量参数的调查,从生态学和统计学的角度进行分析;发现广州市区的绿地生态系统群落结构还较简单,群落植物种类相对单一,分布也不够合理;在此基础上,对存在的问题提出改进的方法和措施,为广州的城市生态系统优化提供参考。    相似文献