玉米自交系SSR技术反应体系的优化   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈珣  肖军  龚娜  王红  王娜  肇莹  杨涛 《江苏农业科学》2011,39(2)

以玉米自交系为材料,研究了PCR反应体系的Mg(2+)浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶浓度、模板DNA浓度及退火温度对玉米自交系SSR扩增结果的影响,确定适合玉米自交系SSR分子标记研究的优化体系.最终确定总反应体系为20μmol/L,Mg(2+)浓度3.0mmol/L、dNTPs 0.1mmol/L、引物0.45μmol/L、Taq DNA聚合酶0.4U、模板DNA 50ng.PCR扩增条件:94℃预变性5 min;94℃ 45s,56℃ 45s,72℃ 1 min,35个循环;最后72℃5 min.  相似文献   

基于响应面法优化红曲霉菌丝体中红色素的提取工艺     

王红  李冰宇  肖军  肇莹  王娜  陈珣  丛玲  杨涛 《辽宁农业科学》2011,(1):20-24

以突变株红曲霉（Monascus rubber YT1）发酵后菌丝体为原料,优化其红曲色素的提取工艺,采用单因素试验对影响红曲色素提取的三个主要影响因素进行了考察（乙醇体积分数、提取时间、提取温度）。以红曲色素的色价为指标,对三因素进行Box-Behnken响应面优化,得到二次多项式回归方程预测模型,对方程进行最优值求解。结果表明菌丝体中红曲色素的最佳提取工艺条件为：乙醇体积分数90%,浸提时间100 min,浸提温度62℃,最优色价值达到799.2（U/g）,与预测值误差为0.467%。  相似文献   

2株越橘菌根菌培养条件的研究     

贾东贝  杨涛  肇莹  马晓颖  李冰宇 《江苏农业科学》2011,39(2)

对分离自越橘根内的2株菌根真菌进行了生理学特性研究,明确了2株菌根真菌的最佳培养条件,为其菌丝体扩繁和菌剂生产奠定基础.采用固体培养,研究不同培养温度、pH值、碳源、氮源对2种菌根真菌生长的影响.结果表明:2种真菌生长的最佳条件不完全相同,A菌和D菌最适生长温度为25℃,属中温菌;2种菌根真菌在pH值3.0～9.0都能生长,A菌最适生长pH值为5.0,D菌为6.0;A菌和D菌生长速度最快的碳源分别为淀粉和乳糖;A菌对不同氮源的利用效果差异性不明显,D菌最适氮源为硝酸钾.  相似文献   

通过花粉管通道导入外源DNA获得抗盐番茄新品系   总被引：3，自引：0，他引：3  

肖军  张立军  任志莹  陈殉  肇莹 《沈阳农业大学学报》2008,39(3)

利用花粉管通道技术,以生长在盐碱地的碱蓬总DNA为供体,以1个不耐盐番茄为受体,进行外源DNA直接导人,对转基因番茄D2代分别浇灌1/2和1/4浓度海水进行筛选,获得了抗盐植株.随机抽取20粒抗盐番茄的种子,以碱蓬基因组为探针,通过基凶组荧光原位杂交技术进行鉴定,有13株番茄有杂交位点存在,初步证实碱蓬基因存在并整合入抗盐番茄的基因组中.  相似文献   

植物基因分离的抑制消减杂交PCR     

任志莹  杨立国  肖军  肇莹  陈珣 《辽宁农业科学》2008,(1):41-43

在植物的不同生长阶段,不同生理状态和不同类型的细胞中,表达的基因各不相同.因此,比较两种不同类型细胞中基因表达的差异是非常必要的.近几年发展起来了一些克隆表达基因的方法(SH,DD,RDA,SSH等).SSH报道于1996年,该法是以抑制PCR为基础将检测子cDNA标准化与消减杂交相结合所形成的.本文详细阐明了SSH的原理以及操作规则,相对于以上其他方法SSH有一些优点,例如假阳性低,重复性强,灵敏度低和操作繁琐,并对其在植物中的应用进行了展望.  相似文献   

玉米幼胚愈伤组织诱导及植株再生研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

龚娜  杨涛  肖军  陈珣  王娜  王红  肇莹 《江苏农业科学》2010,(6)

以玉米幼胚为外植体,研究了2,4-D不同浓度对愈伤组织诱导以及6-BA不同浓度对愈伤组织分化的影响.结果表明,2,4-D浓度显著影响愈伤组织的诱导,愈伤组织诱导培养基中2,4-D适宜的浓度范围是2～3 mg/L,但不同品种的外植体对2,4-D浓度反应不同,其中辽单565愈伤组织诱导2,4-D最佳浓度为2.62 mg/L,自交系742愈伤组织诱导2,4-D理论最佳浓度为2.60 mg/L;6-BA对植株的再生有促进作用,胚性愈伤组织分化的最适6-BA浓度为1.0 mg/L.  相似文献   

一株蓝莓菌根真菌的鉴定及对蓝莓生长的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

肇莹  杨涛  孙进杰  杨镇  王红  肖军 《浙江农业学报》2015,(3):400-405

文章明确了一株能够明显促进蓝莓生长的菌根真菌的分类地位,通过形态观察结合18S r RNA测序比对结果表明该菌株为晶粒鬼伞菌种(Coprinus micaceus)。同时在蓝莓不同生长期接种该菌,系统研究该菌对蓝莓各生长时期生理生长方面的影响,结果表明接种该菌后,蓝莓组培苗、驯化苗株高分别比对照高出30.0%,56.1%,盆栽苗生长量比对照高出34.54%。蓝莓顶端叶片激素含量是对照的23倍,蓝莓N,P吸收率显著提高,分别比对照增加12.8%,15.3%。接种菌根菌晶粒鬼伞菌对蓝莓的生长起到明显的促进作用。因此该菌株具有较好的应用前景,可以作为蓝莓生产储备菌株。  相似文献   

高效毛细管电泳法测定金针菇提取物中β-烟酰胺单核苷酸含量的初步研究     

马晓颖  肖军  陈珣  龚娜  刘国丽  杨涛  肇莹 《中国农业科技导报》2023,25(2):220-226

金针菇既是一种美味食品，又是较好的保健食品，营养成分十分丰富，建立了金针菇提取液中β-烟酰胺单核苷酸（β?-nicotinamide mononucleotide，NMN）的高效毛细管电泳（high performance capillary electrophoresis，HPCE-DAD）含量测定方法。试验结果表明，检测波长218 nm，运行缓冲液30 mmol·L^-1硼砂缓冲液和10 mmol·L^-1磷酸二氢钠缓冲液（pH 9.2），分离电压25 kV，进样时间为5 s时，该方法能够检测到金针菇提取液中的β-烟酰胺单核苷酸，检测限为0.17 μg·mL^-1，并在0.03~2.00 mg·mL^-1范围内呈较好的线性关系，利用标准曲线获得回归方程y=2E+6x-345.69，R²=0.999 4，将金针菇图谱中的相应β-烟酰胺单核苷酸（NMN）峰面积带入回归方程，计算得β-烟酰胺单核苷酸含量为27.57 μg·mL^-1。方法学考察结果表明β-烟酰胺单核苷酸标准品迁移时间和峰面积相对偏差为0.68%和1.44%；且样品8 h内的迁移时间和峰面积的相对偏差分别为1.26%和2.82%；β-烟酰胺单核苷酸在金针菇样品中的回收率为89%~94%。结果表明该方法适用于金针菇提取液中β-烟酰胺单核苷酸的测定，为食用菌中β-烟酰胺单核苷酸含量的测定提供了新的方法。  相似文献