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【目的】为基于大孔树脂吸附结合环氧交联剂交联法固定脂肪酶等工业用酶奠定基础。【方法】使用大孔树脂吸附,而后环氧交联剂交联的方法进行脂肪酶的固定化,研究各因素对吸附–交联固定化的影响,并采用响应面法对固定化条件进行优化,制备固定化酶并考察其稳定性。【结果】筛选出大孔树脂HPD750为载体,聚乙二醇二缩水甘油醚为交联剂。最佳固定化条件为:吸附温度45℃,给酶量60 mg·g–1,交联温度30℃,交联时间12.5 h,pH6.36,交联剂体积分数为0.7%。由上述条件制备所得的固定化酶活力为565.31 U·g–1,酶活力回收率为32.16%。与游离酶相比,固定化酶的热稳定性和酸碱稳定性均有明显提升;连续操作10次,固定化酶活力仍保留34.86%,操作稳定性较好;4℃条件下储存30 d,固定化酶活力仍保留64.81%。【结论】大孔树脂HPD750为载体,聚乙二醇二缩水甘油醚为交联剂制备的固定化脂肪酶热稳定性、酸碱稳定性均得到显著提升,且具有良好的操作及储存稳定性。 相似文献
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[目的](S)-乙酸苏合香酯是手性药物合成的关键手性砌块,其在多种手性化合物的合成及医药、香料的工业生产中具有重要的作用.传统的化学合成手性化合物的方法需要有毒有机溶剂及重金属的参与,对环境及人类具有严重的危害,同时得到的手性化合物的光学纯度较低.与传统的化学合成相比,酶法选择性拆分消旋体化合物,具有高立体专一性和区域选择性、副反应少、产率高、产物光学纯度好以及反应条件温和的优点,是一种被广泛认可的拆分方法.实验表明,Bacillus sp.DL-2胞内蛋白游离酶可拆分制备(S)-乙酸苏合香酯,然而游离酶不易回收且稳定性差,将Bacillus sp.DL-2胞内蛋白游离酶制备成固定化制剂,克服了游离酶对环境敏感,稳定性不高的缺点,为工业化生产(S)-乙酸苏合香酯奠定了基础.[方法]酶的固定化方法主要有物理吸附法、离子结合法、共价结合法、交联法和包埋法.以吸附法固定酶,酶的构象很少改变,因此,酶的催化活力损失较少;且吸附法固定化操作过程简单,因此吸附法在经济上是最具吸引力的固定化方法.硅藻土由硅藻的细胞壁沉积而成,硅藻土表面的多孔性与负电性使其呈现明显表面吸附性,因而被常用做吸附载体.以硅藻土作为固定化载体,对Bacillus sp.DL-2胞内蛋白酶进行固定化,用以拆分制备高光学纯的(S)-乙酸苏合香酯.利用单因素实验优化,确定制备固定化酶的最佳固定化条件及制备(S)-乙酸苏合香酯的最佳拆分条件,并测定了制备的固定化酶对金属离子的敏感度及储存稳定性.[结果]最佳固定化条件为:温度40℃,pH为7,固定化时间10 h,载体添加量100 g/L.在最佳固定化条件下制备了固定化酶,优化确定了制备(S)-乙酸苏合香酯的最佳拆分条件为:固定化酶用量为160 mg/mL,拆分时间7 h,拆分温度30℃,缓冲液pH为7.[结论]在最佳固定化及拆分条件下,制备的(S)-乙酸苏合香酯e.e.值可达到96.8％,转化率为73.9％,且固定化酶对金属离子敏感度较低,对反应环境要求较低,适用于工业化生产.固定化酶在4℃条件下储存,随保存周数的增加,e.e.值及转化率均逐渐降低,但4周后e.e.值仍能达到90.1％,转化率保持在66.6％左右,具备较高的储存稳定性,为工业化生产(S)-乙酸苏合香酯提供了参考. 相似文献
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以人工养殖的子二代大鲵为试材,将大鲵去皮去内脏后预冻至中心温度为0℃,分割成0.8~1.0 cm的肉片,装入PP托盘内,进行充气包装,气体比例为20%N2+10%O2+70%CO2,并分别采用10、20、30、40μL/L肉桂精油进行处理,然后在0℃条件下储藏,定期测定肉样的理化、微生物及感官品质指标,并对肉样新鲜度进行综合评价。结果表明,肉桂精油对大鲵分割肉有较好的保鲜作用,其中,以30μL/L肉桂精油处理对大鲵分割肉的保鲜效果最好,其可保持较低的汁液流失率和挥发性盐基氮含量,抑菌效果较好,且能在一定程度上保持大鲵分割肉的感官品质,延长储藏期至22 d。 相似文献
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钙信号与MDCK细胞活力的关系 总被引：1，自引：0，他引：1
为探讨钙信号与犬肾上皮细胞(MDCK)活力之间的关系,采用MTT比色法观察了特异性钙调素拮抗剂-三氟拉嗪,胞内Ca2+螯合剂-BAPTA/AM以及Ca2+载体-A23187对MDCK细胞活力的影响.结果表明,12.5,25μmol/L三氟拉嗪和15μmol/L的BAPTA/AM作用72 h后分别使MDCK细胞活力降至对照组的51.4%,25.1%和34%,三氟拉嗪与BAPTA/AM对MDCK细胞活力的抑制作用随药物浓度增加和作用时间延长而增强;5μmol/L的A23187对MDCK细胞具有一定程度的刺激效应,但这种刺激效应随时间的延长而减弱;15μmol/L的BAPTA/AM可增强三氟拉嗪对MDCK细胞活力的抑制作用.说明Ca2+-钙调素系统在MDCK细胞生长和增殖过程中发挥重要作用. 相似文献
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近几年来,在夏季进行平菇生产已成为菇农提高效益的途径之一.但是夏季温度高,病虫害严重,对缺少经验的栽培户来说,还是具有一定的难度.现将夏季种植平菇的几个关键环节总结如下. 相似文献
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熟化枸杞子的加工工艺及功能特性 总被引：1，自引：1，他引：0
为了有效开发利用枸杞子资源,进一步提高枸杞子附加值,该文以新鲜枸杞子为原料,在传统干制工艺的基础上,基于美拉德反应原理,开发熟化枸杞子新产品,并对其活性进行检测。研究结果表明,熟化枸杞子三段式干制工艺为:干制预处理阶段温度为60℃,时间为12 h;熟化阶段温度为80℃,时间为24 h,相对湿度65%;定型阶段温度45℃,干制6 h即可。制备的熟化枸杞子为黑褐色、酸甜适口、抗氧化活性显著高于(P0.05)普通干制枸杞子,其总还原能力、羟自由基清除能力、DPPH自由基清除能力分别是普通干制枸杞子的1.87倍、1.45倍和2.21倍,是一种较好的抗氧化食品,枸杞子的附加值得到了有效提高,并且该熟化枸杞子的制备工艺简单、成果易转化,具有很好的应用前景。 相似文献
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微型保鲜节能冷库(以下简称微型库)的开发着眼于农村农民,库体建造如同普通民房,设备自动化,库温在-5～15℃内任意调节,温差±0.5℃,使用环境-30～45℃,可广泛地用于我国南北方地区贮存保鲜式预冷销售各种果蔬.该库造价低,材料来源方便,操作简便、易行,保鲜效果显著,目前已在四川、山西、山东、安徽、江苏、河北、辽宁、广西等地推广应用.现笔者以贮存蒜薹为例,详细介绍微型库的建造、使用及经济效益. 相似文献
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