布鲁氏菌分泌蛋白BspD多克隆抗体制备及其生物信息学分析     

李芮芮  马忠臣  张弘扬  王震  努尔赛力克·努素甫  王勇  陈创夫 《中国畜牧兽医》2021,48(2):676-684

本研究旨在获得布鲁氏菌BspD蛋白,制备其多克隆抗体,并分析其潜在生物学功能。根据流产布鲁氏菌（Brucella abortus）2308的BspD基因序列（GenBank登录号：NC_007618.1）获得BspD基因序列,对布鲁氏菌BspD氨基酸序列进行生物信息学分析,然后将目的基因嵌入pMD19-T载体,使用限制性内切酶切下目的基因重组入pET-28a（+）载体,构建pET28a-BspD重组载体,经过双酶切、测序验证后,IPTG诱导表达菌株,SDS-PAGE法鉴定BspD的表达,His标签蛋白纯化柱纯化BspD蛋白,BCA试剂盒检测蛋白浓度。用纯化BspD蛋白免疫新西兰大白兔,Western blotting鉴定多克隆抗体的特异性,间接ELISA法检测抗体的效价及反应原性。结果表明,成功表达出37 ku BspD蛋白,BCA方法测得纯化BspD浓度为2 000 μg/mL;Western blotting结果显示制备的抗体具有良好的特异性,间接ELISA检测出BspD多克隆抗体的效价为1：12 800,成功制备出BspD多克隆抗体,但其反应原性较低。生物学信息分析得出BspD蛋白具有亲水性,存在跨膜区,无信号肽,有17个磷酸化位点和11个抗原决定簇,BspD蛋白二级结构以α-螺旋为主,达到86.80%,还存在少量延伸链、无规则卷曲、β-折叠等;在线软件Phyre 2构建BspD三级结构证实其多为α-螺旋。以上结果可为进一步研究布鲁氏菌分泌蛋白BspD的功能及分子机制提供参考。  相似文献   

‘砀山酥梨’果实CCoAOMT基因的克隆与表达分析     

王丹阳  高付永  孙炜  芮伟康  Khanizadeh Shahrokh  张绍铃  陶书田 《南京农业大学学报》2015,38(1):33-40

[目的]通过克隆‘砀山酥梨’(Pyrus bretschneideri ‘Dangshansuli’)果实中咖啡酰-辅酶AO-甲基转移酶(CCoAOMT)基因的全长序列,并对其进行生物信息学及基因表达差异分析,阐释了其在梨果实木质素合成途径的作用,以期为今后利用基因调控技术来改变果实中石细胞含量从而改善梨果实品质提供一定的理论依据。[方法]以15年生‘砀山酥梨’果实为试材,根据从NCBI数据库中搜索得到关于植物木质化的CCoAOMT基因序列与梨基因组数据库调取的序列比对,利用RT-PCR技术克隆得到了木质素生物合成途径中的一种关键酶基因PbCCoAOMT,GenBank登录号为KJ577544。[结果]该基因全长1133bp,具有1个744bp的完整开放阅读框(ORF),编码247个氨基酸。序列比对及系统进化树分析表明:CCoAOMT酶是氧甲基转移酶类,与其他植物CCoAOMT编码的蛋白序列有较高的相似性,尤其与枇杷的相似度最高,达到98.79%,且亲缘关系最近。利用荧光定量PCR技术对其在果实不同发育时期表达模式的分析发现,基因表达量呈先上升后下降的趋势,与梨果实中石细胞含量的变化趋势相似。[结论]初步认为从‘砀山酥梨’中克隆得到的PbCCoAOMT基因可能参与了梨果实中木质素的代谢。  相似文献   

青花菜特性及高产栽培技术     

芮金富  吴国良  谢红联 《上海农业科技》2004,(5):76-76

青花菜食用部分为带有花蕾的肥嫩花球，色泽鲜绿，风味清香，花茎脆嫩，品质优良，营养丰富，其维生素A、C含量高，可用于清炒、荤炒、冷冻或制作罐头外销等。  相似文献   

厚皮网纹甜瓜秋延后高产栽培技术     

张志友  倪利锋  芮明方  叶根如 《农业科技通讯》2005,(11):50-50

厚皮网纹甜瓜耐贮运，甜度高。一般含糖量在13％～16％，很受消费者青睐。一般大棚温室早春种植厚皮网纹甜瓜，3～5月份上市，每亩效益1～1．5万元；而在秋季栽培．元旦上市，每亩收入可在2．5万元以上。现将厚皮网纹甜瓜秋延高产栽培技术介绍如下。  相似文献   

带毒灰飞虱对水稻条纹叶枯病的传毒率测定     

芮明方  谭宏  叶根如 《安徽农业科学》2007,35(19):5793-5793

[目的]为了明确湖州市条纹叶枯病主要病区灰飞虱的传毒率。[方法]用人工饲养的五代灰飞虱,对“嘉花1号”水稻进行水稻条纹叶枯病的接毒试验。将饲养的5代灰飞虱成虫每穴1头接入瓶内的试验苗上,用网罩隔离培养接虫苗,连续观察60 d,通过统计计算带毒灰飞虱传毒率。[结果]主要病区灰飞虱的传毒率为5.69%。[结论]带毒灰飞虱对水稻条纹叶枯病的传毒率较高,应密切监控灰飞虱的发生动态,防止条纹叶枯病扩散蔓延。  相似文献   

水稻条纹叶枯病主要病区灰飞虱传毒率测定     

沈卫新  张建明  叶根如  芮明方 《上海农业科技》2007,(1):92-92

水稻条纹叶枯病是由带毒灰飞虱传播的病毒病，田间灰飞虱传毒率是反映条纹叶枯病发生流行的重要指标。为明确湖州市水稻条纹叶枯病主要病区灰飞虱的传毒率，2005年笔者捕捉了本市老病区——道场乡菰城村直播单季晚稻田的二代灰飞虱成虫。进行网罩大棚繁殖饲养后。测定了五代灰飞虱成虫的传毒率，现将结果报道如下。  相似文献   

农村饮水水质的模糊神经网络评价     

刘涛  倪福全  邓玉  李林芮  周先平  何雪勤 《安徽农业科学》2011,39(23):14250-14252

将模糊理论和神经网络模型耦合,得到一种新的具备学习水质评价模糊信息以及处理模糊信息能力的混合型模糊神经网络模型。基于对水质分级标准数据的计算机仿真及网络训练,对雅安市名山县42个农村地下水源水质进行评价。结果表明,名山县42个水源地中11个为第Ⅳ类水,2个为第Ⅴ类水,主要危害指标为硝酸盐、铁。  相似文献   

超级稻天优998超高产栽培技术   总被引：3，自引：0，他引：3  

曾建辉  傅伟康  吴小萍 《安徽农学通报》2008,14(23):239-239

天优998（天优丝苗）是广东省农科院水稻研究所育成的首批列入国家超级稻示范推广的优质杂交稻品种。兴宁市自2005年成功引进种植以来,取得了较好的社会效益,并总结出一套超高产的栽培技术规程,该规程技术成熟,适于操作,已在生产上大面积推广应用。介绍了天优998的栽培技术规程。  相似文献   

播期和种植密度对不同熟性棉花生理特性及产量的影响     

李侃  谢章书  何玉玺  杨丹  许豆豆  覃业玲  李佳芮  周成轩  朱方歌  郭歌  贺云新  刘爱玉  周仲华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2023,49(3)

以棉花早熟品种‘湘K27’和‘JX0010’为试验材料,以晚熟品种‘HN127’为对照,分别设置2个种植密度(2000株/(667 m2)、3000株/(667 m2))和2个播期(5月25日、6月5日),于2021年在湖南农业大学耘园基地进行大田试验,通过测定其生理生化指标和产量构成因素,研究不同种植密度和播期对棉花产量的影响。结果表明：早熟直播棉较晚熟品种SPAD值高;晚熟品种SOD活性总体高于早熟品种,晚播较早播在蕾期到花铃期时能显著提高棉花的SOD活性;从POD活性来看,早熟棉较优;从MDA含量来看,在早播和高种植密度条件下,营养生长期(蕾期)以晚熟品种表现较佳,生殖生长期(花铃期)以早熟品种‘JX0010’最优;品种极显著影响单铃质量、单株铃数和产量,且均表现为早熟品种优于晚熟品种。综合分析,早播有利于提高早熟棉产量,增加种植密度虽在一定程度上可提高产量,但增产潜力不大。  相似文献   

白掌疫病病原菌的鉴定     

张云霞  曾莎芮  黄耀华  陈灿钿  程东美  向梅梅 《热带作物学报》2019,40(6):1171-1175

在致病性测定的基础上,通过形态特征观察及基于特异性引物Pn1和Pn2扩增的DNA序列分析,对在广州发现的白掌疫病的病原菌种类进行了鉴定。结果表明,引起广州白掌疫病的病原菌为烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)。研究结果为白掌病害的防控提供了理论依据。  相似文献